医学细胞-24学时李2011.3改第十章

第十章细胞的衰老与死亡第一节细胞衰老（cellsenescence）一、细胞衰老的概念和特点

细胞衰老：细胞的形态结构、化学成分和生理功能逐渐衰退的现象。

机体衰老≠细胞衰老细胞总体的衰老反应了机体的衰老，细胞的衰老是机体衰老和老年病发病的基础。二、细胞的寿命与Hayflick界限

不同类型细胞的寿命很不一致

细胞的寿命接近于动物的整体寿命：神经元、脂肪细胞、肌细胞等。缓慢更新的细胞，其寿命比机体寿命短：肝细胞、胃壁细胞等。快速更新的细胞：表皮细胞、红细胞和白细胞等。

1961年，Hayflick首次报道了体外培养的人成纤维细胞具有增殖分裂的极限。他发现来自胚胎的成纤维细胞分裂传代50次后开始衰退和死亡，而来自成年组织的成纤维细胞只能培养15～30代就开始死亡。

Hayflick界限

体外培养的二倍体细胞的增殖能力和寿命不是无限的，而是有一定的限度。体外培养的年轻和老人的成纤维细胞的形态物种的寿命与体外培养时细胞传代次数的关系三、细胞衰老的表现（一）形态改变

1、核：增大、染色深、核内有包含物

2、染色质：凝聚、固缩、碎裂、溶解

3、质膜：粘度增加、流动性降低

4、细胞质：色素积聚、空泡形成

5、线粒体：数目减少、体积增大

6、高尔基体：囊泡肿胀、碎裂

7、内质网：弥散、总量减少

8、尼氏体：消失

9、包含物：糖原减少、脂肪积聚

10、核膜：内陷（二）分子水平变化

1、DNA：复制与转录受到抑制。端粒DNA丢失，线粒体DNA特异性缺失，DNA氧化、断裂、缺失和交联。

2、RNA：mRNA和tRNA含量降低。

3、蛋白质：含量下降，蛋白质发生修饰反应，导致蛋白质稳定性、抗原性、可消化性下降，自由基使蛋白质肽链断裂，交联而变性。

4、酶分子：活性中心被氧化，金属离子丢失，酶分子的二级结构、溶解度、等电点发生改变，总的效应是酶失活。

5、脂类：不饱和脂肪酸被氧化，引起膜脂之间或与脂蛋白之间交联，膜的流动性降低。四、细胞衰老的发生机制（一）遗传决定学说衰老是遗传上的一个程序化过程，其推动力和决定因素是遗传的基因组。控制生长发育和衰老的基因都在特定时期有序地开启和关闭（衰老相关基因）。正常儿童（左）婴幼儿早衰症患者（右）（二）自由基学说自由基：在外层轨道上具有不成对电子的分子或原子基团。与其他物质反应时夺取电子，引起细胞氧化性损伤。自由基在机体代谢过程中产生（如代谢产生的活性氧基团，ROS），引发氧化性损伤，导致衰老。消除自由基的物质可一定程度延缓衰老，如超氧岐化酶(SOD)、维生素E等。（三）端粒钟学说端粒随细胞的分裂不断缩短；端粒长度缩短到一定阈值时，细胞进入衰老。（四）代谢废物累积学说细胞功能下降→代谢废物不能及时排出胞外，不能降解消化→代谢废物↑→占据的空间↑→影响代谢废物运输→阻碍正常生理功能→衰老脂褐质β淀粉样蛋白→阿尔茨海默病（五）基因转录或翻译差错学说年龄增长→DNA复制效率下降，核酸、蛋白质、酶等大分子的合成差错→细胞功能降低→衰老→死亡（六）线粒体DNA损伤学说（七）其他学说（一）抗衰老基因SOD基因P53基因APOC3基因（二）衰老基因MORF4基因P16基因P21基因五、细胞衰老的相关基因第二节细胞死亡细胞坏死（necrosis）：指由环境因子或病理状态导致的细胞死亡，为被动性、非正常的死亡。细胞凋亡（apoptosis）：指在特定信号诱导下，按一定程序发生的细胞死亡，为主动的、由基因决定的正常死亡，亦称程序性死亡（programmedcelldeath，PCD）。一、细胞死亡的原因正常死亡非正常死亡物理的化学的生物的二、细胞死亡的特征与形式坏死细胞凋亡细胞自噬双层膜的自噬泡细胞胀亡第三节细胞凋亡PRIZED

Horvitz,andSulstonsharePhysiologyorMedicineNobel（2002）

“fortheirdiscoveriesconcerninggeneticregulationoforgandevelopmentandprogrammedcelldeath”1090–131=959(cells)机体结构细胞增殖细胞分化细胞凋亡细胞信号转导染色体（DNA与蛋白质的相互作用）衰老一、细胞凋亡的概念与特征细胞凋亡是细胞在一定的生理或病理条件下，遵循自身的程序，自己结束其生命的过程。细胞凋亡亦被称为细胞编程性死亡（ＰＣＤ），即在一定的时间内，细胞按一定的程序发生的死亡，具有严格的基因时控性和选择性。细胞受到激烈的化学、物理和生物等环境因素的伤害引起。细胞膜和细胞器的膜发生破裂，线粒体肿胀。继而溶酶体破裂,

胞浆外溢，细胞解体并引起周围组织发生炎症反应。（一）细胞坏死的形态特征细胞核染色质断成核小体片段，浓缩成块，聚集于核膜下或中央部异染色质区，核呈新月状、花瓣状等；染色质进一步聚集，使核膜在核膜孔处断裂，形成核碎片或核残片。细胞质线粒体增大，嵴增多，空泡化；内质网腔增殖膨大；细胞骨架结构变得致密和紊乱。（二）细胞凋亡的形态特征细胞膜微绒毛、细胞突起及细胞间连接等逐渐消失；细胞膜起泡，但仍完整，未失去选择通透性；与细胞间连接有关的蛋白质从凋亡的膜上消失，但新出现一些生物大分子调节凋亡细胞的清除。A、NormalcellB、Apoptosis:Apoptoticbodies凋亡小体细胞凋亡时质膜始终完整，胞膜突起将内容物包被成一些囊状小泡，即凋亡小体(apoptoticbody)，后者被周围细胞吞噬，无细胞内容物外泄，不引起炎症反应。坏死凋亡染色质聚集细胞器肿胀细胞轻微回卷染色质压缩并断成核小体片段细胞质浓缩细胞瓦解细胞内容物释放炎症反应核碎片化产生凋亡小体吞噬作用凋亡小体吞噬细胞（三）细胞凋亡时细胞生化改变的复杂性和多样性1.DNA片段化

凋亡时，细胞的内源性核酸内切酶特异地在核小体连接区切断DNA链，形成长度为180-200bp整数倍的寡聚核苷酸片段，在琼脂糖凝胶电泳时，表现出特征性的DNA梯状条带(DNAladders)。坏死时DNA随机断裂，电泳呈弥散条带。2.细胞凋亡中的蛋白酶3.胞质内Ca2+、pH的变化

细胞凋亡的整个过程由多种蛋白酶通过级联切割控制。控制凋亡的蛋白酶有caspase家族、钙蛋白酶或分裂素等。Ca2+

能诱导细胞凋亡

H+

浓度引起的胞浆碱化和酸化均能影响细胞凋亡4.线粒体在细胞凋亡中的作用①呼吸链受损，能量代谢受破坏→细胞死亡；②释放细胞色素C(cytC），cytC为凋亡所必需的caspase家族的激活物；③是ROS的主要来源，ROS是凋亡的信使分子和效应分子；④渗透转变孔(PTpores)通透性增高，这是凋亡早期的决定性变化。（四）失巢凋亡

由与细胞外基质和其他细胞脱离接触而诱发的细胞凋亡

诱导因素生理或病理因素强烈的刺激因素细胞皱缩、与相邻细胞的连接丧失肿胀细胞膜始终保持良好的整合性破裂细胞器形态改变较轻，结构完整肿胀、破裂、结构崩解

细胞核固缩、染色质凝聚在核膜下呈半月状固缩、核被膜破裂、分解

凋亡小体形成一个或多个无

DNA

核小体DNA断裂，有规律地降解随机降解分子机制由凋亡相关基因调控无基因调控代谢反应蛋白酶参与的级联反应无有秩序的代谢反应

周围组织反应无炎症性破坏引起炎症反应细胞凋亡和细胞坏死的区别

细胞凋亡细胞坏死二、细胞凋亡的影响因素（一）凋亡抑制因子1、生理性抑制因子bcl-2、突变型p532、病毒基因（二）凋亡诱导因子1、生理性诱导因子TNF2、与损伤相关的因子野生型p53、自由基3、与治疗相关的因子生物治疗三、细胞凋亡的分子机制（一）细胞凋亡受多种基因调控

1、ced基因家族ced-3/-4促进ced-9抑制

2、bcl-2基因家族bax等促进bcl-2等抑制

3、survivin基因抑制

4、ice基因促进

5、p53基因促进

6、Fas和FasL促进

7、c-myc基因促进或抑制

8、bag-1基因抑制（二）细胞凋亡的信号转导途径

1、死亡受体介导的信号转导通路

2、线粒体介导的信号转导通路

3、其他四、细胞凋亡的检测（1）形态学检测（2）生化特征检测

主要针对核小体片段（3）流式细胞仪检测凋亡引发包括细胞膜、细胞器和细胞核等的改变，造成荧光染料对凋亡细胞DNA可染性发生改变；以及细胞形态的改变影响了光散射特性。普通光学显微镜HE、甲基绿-派诺宁、Giemsa染色荧光显微镜吖啶橙、Heochst33258染色电子显微镜超薄切片琼脂糖凝胶电泳法原位末端标记法(TUNEL)ELISA法五、细胞凋亡的生物学意义1、在发育过程中清除多余的细胞蹼2、清除已经完成功能的细胞蝌蚪尾部3、清除发育不正常的细胞神经细胞4、清除生理活动过程中无用的