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文档简介

精液检查广州医学第二附属医院检验科黄海樱1精液检查广州医学第二附属医院检验科黄海樱1*标本采集与处理*精液理学检验*精液显微镜检验精液化学与免疫学检验计算机辅助精液分析精液检验的质量控制与临床应用2*标本采集与处理2产生生精细胞

精子(spermatozoon)

垂体前叶促性腺激素精浆(seminalplasma)精液(seminalfluid)精囊液(50%~80%)精浆前列腺液(15%~30%)睾丸、附睾、输精管、尿道旁腺、尿道球腺分泌的液体(少量)3产生生精细胞精子(sper成分精浆蛋白精浆(90%)酶类精液微量金属元素其它有形成分(5%)精子细胞4成分精浆蛋精液检查的目的.评价男性生育功能.计划生育和科研.辅助男性生殖系统疾病的诊断.为精子库或人工授精筛选优质精子.婚前检查.法医学鉴定5精液检查的目的.评价男性生育功能5第一节标本采集与处理1.标本采集时机:禁欲3-7天?2.标本采集方法:手淫法电动按摩法安全套法性交中断法

6第一节标本采集与处理1.标本采集时机:禁欲3-7天?6精液标本采集方法与评价

方法评价手淫法标准采集方法,但部分病人不能取得精液电按摩法手淫法不能取得精液时采用本法安全套法方法易行,但可杀灭精子及损失精液量性交中断法可能丢失精子密度最高的初始精液7精液标本采集方法与评价方法评价73.标本采集的注意事项⑴标本采集前应禁欲3~7天⑵容器⑶采用手淫法⑷采集细菌培养的标本必须无菌操作⑸标本采集转运:(讲解)采集室、全部精液、容器、保温、即送

83.标本采集的注意事项8第二节精液理学检查量2~6ml减少前列腺和精囊病变精囊缺如、射精管阻塞无精液症TB、淋病、炎症过多>8ml雄激素↑稀释精子颜色灰白、乳血精:炎症、TB、肿瘤白、淡黄脓精:精囊炎、前列腺炎气味腥味恶臭:肿瘤、炎症

项目正常病理状态9第二节精液理学检查量2~6ml项目正常病理状态粘稠度胶冻状→米汤样、粘稠度低:先天性精液化囊缺如、输精管道阻塞、少精、无精子症粘稠度高:前列腺炎液化时间20~60分钟液化延缓:前列腺炎PH7.2~7.8PH>7.8:附属性腺或附睾有急性感染性疾病PH<7.2:慢性感染性疾病、精囊机能减退、先天性精囊缺如、输精管阻塞10项目正常

精液粘稠度(粘度计法):测定0.5ml精液通过粘度计所需的时间1111精液粘稠度(玻棒法)以25℃室温,30分钟为精液液化标准,观察已液化的精液粘稠度,可将玻棒与精液接触,提棒时可拉起粘丝,正常精液丝长≤2cm,异常>2cm。异常结果又分:Ⅰ度:30分钟基本液化,用吸管吸取精液出现细丝状粘稠丝Ⅱ度:60分钟不液化,吸取精液出现粗大粘稠丝,涂片时有粘稠感Ⅲ度:24小时后不液化,吸取精液时难吸出12精液粘稠度(玻棒法)以25℃室温,30分钟为精液液化标准项目正常病理状态粘稠度胶冻状→米汤样、粘稠度低:先天性精液化囊缺如、输精管道阻塞、少精、无精子症粘稠度高:前列腺炎液化时间20~60分钟液化延缓:前列腺炎PH7.2~7.8PH>7.8:附属性腺或附睾有急性感染性疾病PH<7.2:慢性感染性疾病、精囊机能减退、先天性精囊缺如、输精管阻塞13项目正常第三节精液显微镜检查涂片检查无精子症(azoospermia)精子缺乏(spermacrasia)14第三节精液显微镜检查涂片检查14一、精子活动率和活动力(一)精子活动率(spermactivityrate):活动精子所占精子总数的百分比【检测原理】1.湿片法:混匀高倍镜观察2.精子体外染色法:精液+染液推片计数(不着色)【方法学评价】15一、精子活动率和活动力15精子活动率检测的方法学评价

方法评价湿片法快速、简便、易操作,但主观性较大,结果误差较大,重复性较差体外染色法操作稍复杂,费时,但能较客观反映精子的死活比例,结果准确可靠、重复性好,试剂易配制与保存16精子活动率检测的方法学评价方法评价16【参考值】1.湿片法:>70%(30-60min)2.精子体外染色:>75%(30-60min)

17【参考值】17【临床意义】活动率<40%可致不育活动率下降见于:①精索静脉曲张②生殖系感染③物理因素④化学因素

18【临床意义】18(二)精子活动力(spermmotility):精子向前运动的能力WHO:a级--快速前向直线运动b级--缓慢或呆滞的前向运动c级--精子呈缓慢或非前向运动

d级--精子呈不动状态

1919【检测原理】1.显微镜检验2.连续摄影法3.精液质量分析仪测定【方法学评价】2020精子活动力检测的方法学评价

方法评价显微镜检验操作简便,但主观性较强,且受许多因素影响连续摄影法需要高精度的实验设备,因此不便于开展普及精子质量分析简单、快捷、易操作、可重复性仪测定好,是一种理想的检验精液质量的方法

21精子活动力检测的方法学评价方法评价21

【参考值】射精后60分钟内a级+b级≥50或a级≥25%【临床意义】精子活动率不足40%,且以C级活力精子为主,男性不育原因之一2222二、精子形态(spermmorphology)【检测原理】1.湿片法:高倍镜观察2.染色法:涂薄片干燥、固定染色油镜观察【方法学评价】1.湿片法:简便、快速,结果偏差大。2.染色法:复杂、费时,准确可靠,重复性好,为WHO推荐方法。23二、精子形态(spermmorphology)23【精子形态判断标准】

1.正常形态:似蝌蚪状,分头、体、尾①头部正面呈卵圆形,侧面呈扁平梨形,头部长4.0~.5μm,宽2.5~3.0μm②体部轮廓直而规则,与头部纵轴成一直线,长5-7μm,宽1μm③尾部细长,外观规则而不卷曲,长50-60μm24【精子形态判断标准】242.异常形态:头、颈、尾、联合缺陷体【参考值】异常精子<20%【临床意义】异常形态精子增多见于生殖系感染、精索静脉曲张、雄激素异常、某些药物、遗传等。2525三、细胞(一)未成熟生殖细胞<1%曲精管受损:↑(鉴别)(二)红、白细胞、上皮细胞<5/HP↑:生殖道炎症、结核、肿瘤等癌细胞:生殖系统恶性肿瘤26三、细胞26四、精子计数精子密度(spermdensity)、精子总数【检测原理】1.显微镜计数法(手工法?)①血细胞计数板法②Makler精子计数板法2.计算机辅助精液分析27四、精子计数27精子密度检测的方法学评价方法评价血细胞计数板法需稀释,计数速度慢,不能同时检测其它参数Makler精子计数板法不需稀释,能同时检测其它参数,计数速度慢,易受精液中细胞等成分影响计算机辅助精液分析操作简便,快速,具有客观、准确和定量分析特点,易受精液中细胞等成分影响

28精子密度检测的方法学评价方法评价28【参考值】精子浓度≥20×109/L一次排精总数≥40×10629【参考值】29【临床意义】精子数量减低见于:①先天性或后天性睾丸疾病②精索静脉曲张③输精管或精囊缺陷④某些药物⑤某些理化因素⑥50岁以上老年人⑦输精管结扎术后6周30【临床意义】精子数量减低见于:30五、精子低渗肿胀试验(HOS)观察精子在低渗溶液中的变化,以检测精子膜的完整性。男性不育症的精子肿胀率明显降低。

31五、精子低渗肿胀试验(HOS)31第四节精液化学与免疫学检验一、精浆果糖(seminalplasmafructose)零:先天性精囊缺如、两侧输精管发育不良、逆行射精↓:精囊炎和雄激素分泌不足单纯性输精管阻塞性无精症的果糖含量正常二、精浆乳酸脱氢酶-X(LDH-X)睾丸萎缩,少精或无精患者:↓三、精浆α-葡萄糖苷酶对鉴别输精管阻塞和睾丸生精障碍所致的无精症有一定意义。

32第四节精液化学与免疫学检验一、精浆果糖(seminalp四、精浆酸性磷酸酶(acidphosphatase,ACP)前列腺炎:PAP↓前列腺癌,前列腺肥大:PAP↑五、精子顶体酶(acrosomalenzyme)与不育指标相关六、精浆锌:↓:生育力下降、生殖器官发育不良33四、精浆酸性磷酸酶(acidphosphatase,ACP七、抗精子抗体1.酶联免疫吸附试验2.精子凝集试验3.精子制动试验4.免疫珠试验5.混合抗免疫蛋白试验34七、抗精子抗体34第五节计算机辅助精液分析

(computeraidedsemenanalysis,CASA)35第五节计算机辅助精液分析

(computeraided36363737检测原理连续抓拍获取精子动静态图像并存入计算机存贮单元图像存储样品识别确定各图像中精子的位置、大小和数量关联运算确定各精子的运动方向、距离和轨迹运动参数计算计算精子动静态的参数指标输出38检测原理连续抓拍38CASA参数术语曲线速度(VCL):单个精子在单位时间内两个连续位置间运动的平均距离。直线速度(VSL):根据精子头在开始检测时的位置与最后所处位置之间的直线运动的时间平均速度。平均路径速度(VAP):精子头沿其空间轨迹移动的时间平均速度。精子头侧摆幅度(ALH):精子头沿其空间平均轨迹侧摆的幅度。39CASA参数术语曲线速度(VCL):单个精子在单位时间内两个CASA参数术语直线性(LIN):曲线轨迹直线性。VSL/VAP摆动性(WOB):精子头沿其实际轨迹的空间平均路径摆动的尺度。VAP/VCL前向性(STR):空间平均路径的直线性。VSL/VAP鞭打频率(BCF):精子曲线轨迹越过其平均路径轨迹的时间平均速率。平均移动角度(MAD):精子头沿其曲线轨迹瞬间转折角度的时间平均绝对值。40CASA参数术语直线性(LIN):曲线轨迹直线性。VSL/V【方法学评价】优点:①精子运动指标的检测客观、准确、指标多②可以提供精子动力学的量化数据③操作简便、快速、可捕捉的信息量大,可自动化等。41【方法学评价】41缺点:①设备昂贵②准确性受精液中其它成分影响③系统设置缺乏统一的国际标准42缺点:42(一)分析前质量控制1.临床医师2.病人3.检验人员4.器材及试剂5.标本的采集及运送6.检验方法第六节精液检验的质量控制43(一)分析前质量控制第六节精液检验的质量控制43(二)分析中的质量控制1.液化时间2.精子活动率及活动力检验3.精子计数及形态检验4.化学及免疫学检验5.计算机辅助精液分析和精液质量分析仪6.室内质量控制7.室间质量控制44(二)分析中的质量控制44(三)分析后质量控制1.由质控人员审核检验结果后,方可出报告。2.结果报告单规范化,并向临床医生提供必要的讲解和宣传。3.精液检验结果变化范围大,有时不能仅凭一次的检验结果就做出诊断。45(三)分析后质量控制45前列腺液检查广州医学第二附属医院检验科黄海樱46前列腺液检查广州医学第二附属医院检验科黄海樱46第一节标本采集与处理*第二节前列腺液理学检验*第三节前列腺液显微镜检验第四节前列腺液检验的质量控制47第一节标本采集与处理474848前列腺生理功能:1.维持精浆适当的PH2.参与精子能量代谢3.抑制细菌生长4.使精液液化49前列腺生理功能:49前列腺液电解质:钠、钾、钙、镁、锌等酶:纤溶酶、ACP、ALP、LDH脂类:磷脂、胆固醇免疫物质:Ig、C3、C4、PSA其它:柠檬酸盐等有形成分:卵磷脂小体、细胞50前列腺液电解质:钠、钾、钙、镁、锌等50前列腺液检查目的:前列腺炎、前列腺脓肿、前列腺结核、前列腺癌等疾病辅助诊断、疗效观察,性传播疾病的检验。51前列腺液检查目的:51第一节标本采集与处理

前列腺按摩术检验前3天应禁止性活动采集,洁净玻片、试管立即送检微生物培养:无菌操作禁忌症复查52第一节标本采集与处理52

第二节前列腺液理学检查1.量:数滴~2ML↑:前列腺慢性充血、过度兴奋↓:前列腺炎↓↓:前列腺炎性纤维化、性功能低下2.性状:乳白、稀薄、有光泽黄、混浊、脓性粘稠:前列腺炎红:结核、肿瘤、结石、炎症3.PH:6.3~6.553第二节前列腺液理

第三节前列腺显微镜检验1非染色标本①卵磷脂小体:多量,均匀分布满视野②前列腺颗粒细胞:<1个/HP③淀粉样小体④红细胞:<5个/HP⑤白细胞:<10个/HP⑥其它:精子、滴虫2染色检查54

第三节前列腺显微镜检验54几种病理情况下前列腺液改变外观卵磷脂小体RBCWBC颗粒细胞正常粘稠均匀分布<5<10<1乳白色满视野轻度前无明显下降+列腺炎改变不匀前列腺脓/脓血下降+++++脓肿消失前列腺血性下降+++癌55几种病理情况下前列腺液改变外观卵磷脂小第四节前列腺液检验的质量控制一、标本的采集和运送二、显微镜检验质量控制

56第四节前列腺液检验的质量控制阴道分泌物检查广州医学第二附属医院检验科黄海樱57阴道分泌物检查广州医学第二附属医院检验科黄海樱57第一节标本采集与处理*第二节阴道分泌物理学检验*第三节阴道分泌物病原生物学检验第四节阴道分泌物检验的质量控制58第一节标本采集与处理58阴道分泌物(vaginaldischarge):是女性生殖系统分泌的液体,主要由阴道粘膜、宫颈腺体、前庭大腺及子宫内膜的分泌物混合而成,俗称“白带”(leucorrhea)。阴道分泌物检验目的:诊断生殖系统感染、肿瘤。59阴道分泌物(vaginaldisch第一节标本采集与处理1.病人准备:取材前24h内,禁止性交、盆浴、阴道灌洗、局部上药。2.采集部位:根据不同检验目的自不同部位取材3.采集器材:刮板、吸管、棉拭子4.标本运送:置盐水试管、涂片、湿拭子置洁净试管60第一节标本采集与处理1.病人准备:取材前24h内,禁止性交一、颜色与性状正常:白色稀糊状、无气味、量多少不等临近排卵期:多,清澈透明,蛋清样排卵期后2-3天:混浊粘稠,少行经前:量增加妊娠期:较多第二节理学检验61一、颜色与性状第二节理学检验61异常:1.大量无色透明粘性:应用雌激素后、卵巢颗粒细胞瘤2.脓性,黄/黄绿,臭:泡沫状:滴虫性阴道炎其它:慢性宫颈炎、老年性阴道炎、子宫内膜炎、宫腔积液及阴道异物引发的感染62异常:623.豆腐渣样,凝乳状小碎块:念珠菌阴道炎4.血性:宫颈息肉、子宫粘膜下肌瘤、老年性阴道炎、慢性重度宫颈炎、使用宫内节育器致不良反应等5.血性,有特殊臭味:恶性肿瘤(宫颈癌、宫体癌)6.黄色水样:子宫粘膜下肌瘤、宫颈癌、宫体癌、输卵管癌7.奶油状,稀薄均匀,有恶臭:阴道加德纳菌感染633.豆腐渣样,凝乳状小碎块:念珠菌阴道炎63二、阴道清洁度64二、阴道清洁度64生理盐水涂片高倍镜观察:

阴道清洁度判断清洁度杆菌上皮细胞白(脓)细胞(个/HP)杂菌Ⅰ++++++++0-5--Ⅱ++++5-15--Ⅲ----15-30++Ⅳ--+>30++++6565生理盐水涂片高倍镜观察:

阴道清洁度判断清洁度杆菌球菌上皮细胞脓细胞/白细胞Ⅰ多量几乎无满视野0~5/HPⅡ减少可见少量½视野5~15/HPⅢ更少多量少量15~30/HPⅣ几乎无大量几乎无>30/HP66生理盐水涂片高倍镜观察:66[参考值]Ⅰ~Ⅱ度(无致病菌和特殊细胞)[临床意义]1.阴道清洁度与女性激素的周期变化2.非特异性阴道炎3.特异性阴道炎67[参考值]Ⅰ~Ⅱ度(无致病菌和特殊细胞)67第三节阴道分泌物病原生物学检验一、阴道毛滴虫(TV):生理盐水涂片:梨形、活动涂片染色胶乳凝集试验体外培养法68第三节阴道分泌物病原生物学检验一、阴道毛滴虫(TV):6第三节阴道分泌物病原生物学检验一、阴道毛滴虫(TV):生理盐水涂片:梨形、活动涂片染色胶乳凝集试验体外培养法69第三节阴道分泌物病原生物学检验一、阴道毛滴虫(TV):6二、细菌(一)淋病奈瑟菌1.涂片法:G-双球菌急、慢性感染2.培养3.免疫荧光法4.PCR

70二、细菌(一)淋病奈瑟菌70(二)细菌性阴道病主要由阴道加德纳菌、各种厌氧菌及支原体等引起的混合感染。【检验原理】1.涂片染色法:G-/+小杆菌,(1.5-2.5)μm×0.5μm2.阴道菌群检查:计算乳酸杆菌和加德纳菌的数量变化作为诊断参考。3.线索细胞:71(二)细菌性阴道病717272细菌性阴道炎(BV)诊断标准:1.线索细胞>20%2.胺臭味试验阳性3.分泌物PH>4.54.阴道杆菌减少,加德纳菌和厌氧菌增加73细菌性阴道炎(BV)诊断标准:73三、真菌:生理盐水涂片:孢子、菌丝涂片染色

74三、真菌:生理盐水涂片:孢子、菌丝74第四节阴道分泌物检验的质量控制

75第四节阴道分泌物检验的质量控制75谢谢!76谢谢!761.关于精液标本采集,下列哪项不正确

A.不完整的精液标本不宜进行分析B.精液标本采集前应禁欲3-7天C.用体外排精法采集精液标本送检最为理想精液标本采集后送检时间不超过1小时精液PH值正常范围是7.2-7.8

771.关于精液标本采集,下列哪项不正确

772.何谓精子活动力?可分为几级?参考值是?3.如何鉴别生精细胞和中性粒细胞?

782.何谓精子活动力?可分为几级?参考值是?787979808081818282838384848585868687878888企业的成功,20%在策略,80%在执行P197企业的核心竞争力,就在于执行力。没有执行力,一切都是空谈。执行力决定企业的成败,任何企业的失败都是执行的失败,任何企业的成功都必然是执行的成功。84、制定正确的战略固然重要,但更重要的是战略的执行——联想集团总裁兼CEO杨元庆85、战略越精炼,就越容易被彻底地执行——花旗银行董事长约翰?里德86、三流的点子加一流的执行力,永远比一流的点子加三流的执行力更好。——日本软银公司董事长孙正义87、让流程说话,流程是将说转化为做的惟一出路——战略专家姜汝祥88、企业的执行力靠的就是纪律——中国台湾华建公司总裁卢正昕第十三章现代企业离不开危机管理P211斯坦福大学教授理查德?帕斯卡尔说过一句至理名言:“21世纪,没有危机感是最大的危机。”没有危机感,其实就有了危机;有了危机感,才能有效地避免危机。89、一个伟大的企业,对待成就永远都要战战兢兢,如覆薄冰——海尔集团总裁张瑞敏90、危机不仅带来麻烦,也蕴藏着无限商机——美国大陆航空公司总裁格雷格?布伦尼曼91、微软离破产永远只有18个月——世界首富比尔?盖茨92、预防是解决危机的最好方法——英国危机管理专家迈克尔?里杰斯特93、21世纪,没有危机感是最大的危机——哈佛商学院教授理查德?帕斯卡尔第十四章奖励什么,就会得到什么P223管理者必须在工作与奖励之间建立恰当的联系。想要什么就应该奖励什么,奖励什么,你就会得到什么,有效的奖励可以引导员工努力工作。94、奖励什么,就会得到什么——管理专家米契尔?拉伯福95、我们宣布讲究实绩、注重实效,却往往奖励了那些专会做表面文章、投机取巧的人。——管理专家米契尔?拉伯福96、不能搞平均主义,平均主义惩罚表现好的,鼓励表现差的,得来的只是一支坏的职工队伍——管理学者史蒂格97、不只奖励成功,而且奖励失败——通用电器公司总裁杰克?韦尔奇98、无法评估,就无法管理——管理学家琼?玛格丽塔99、你不能衡量它,就不能管理它——管理大师彼得?杜拉克100、如果强调什么,你就检查什么“不耻最后。”即使慢,驰而不息,纵令落后,纵令失败,但一定可以达到他所向往的目标。——鲁迅

2、不经一翻彻骨寒,怎得梅花扑鼻香。——宋帆3、不要失去信心,只要坚持不懈,就终会有成果的。——钱学森4、常常是最后一把钥匙打开了门。——彦语5、成大事不在于力量的大小,而在于能坚持多久。——约翰生6、达到重要目标有两个途径——努力及毅力。努力只有少数人所有,但坚韧不拔的毅力则多数人均可实行。—拿破仑7、点点滴滴的藏,集成了一大仓。——德国谚语8、读不在三更五鼓,功只怕一曝十寒。——郭沫若9、告诉你使我达到目标的奥秘吧,我惟一的力量就是我的坚持精神。——巴斯德10、革命道德不是从天上掉下来的。它是从日常的坚持不懈的斗争和锻炼中发展和巩固起来的,正如玉石越磨越亮,黄金越炼越纯一样。——胡志明11、苟有恒,何必三更起五更眠;最无益,只怕一日曝十日寒。——毛泽东12、古今之成大事业、大学问者,必经过三种之境界:“昨夜西风凋碧树,独上高楼,望尽天涯路”,此第一境界也;“衣带渐宽终不悔,为伊消得人憔悴”,此第二境界也;“众里寻他千百度,蓦然回首,那人却在灯火阑珊处”,此第三境界也。——王国维13、古人学问无遗力,少壮工夫老始成。——陆游14、故天将降大任于是人也,必先苦其心志,劳其筋骨,饿其体肤,空乏其身,行拂乱其所为,所以动心忍性,增益其所不能。——孟轲15、贵有恒,何必三更起五更眠。最无益,只怕一日曝十日寒。——毛泽东16、坚持对于勇气,正如轮子对于杠杆,那是支点的永恒更新。——[法]雨果17、进锐退速。——孟珂《孟子》18、精诚所至,金石为开。——蔡锷19、涓滴之水终可以磨损大石,不是由于它力量强大,而是由于昼夜不舍的滴坠。——贝多芬20、科学的永恒性就在于坚持不懈地寻求之中,科学就其容量而言,是不枯竭的,就其目标而言,是永远不可企及的。——卡·冯·伯尔21、逆水行舟用力撑,一篙松劲退千寻。——董必武22、骐骥一跃,不能十步;驽马十驾,功在不舍。(骐骥:俊马。驽马:跑不快的马。驾

,马行一日为一驾。——先秦《荀子·劝学》;你不检查,就等于不重视——IBM公司总裁郭士纳影响世界的100条管理名言世界上最伟大的管理大师和世界著名企业家的最实用、最经典的100条管理名言,这些千锤百炼、流传甚广的管理名言融汇了管理大师们的思想精华,浓缩了世界著名企业的管理智慧。很多管理者在管理实践中经常引用这23、锲而舍之,朽木不折;锲而不舍,金石可镂。——荀况24、取得成就时坚持不懈,要比遭到失败时顽强不屈更重要。——拉罗什夫科25、人们还往往把真理和错误混在一起去教人,而坚持的却是错误。——歌德26、忍耐和坚持虽是痛苦的事情,但却能渐渐地为你带来好处。——奥维德27、日日行,不怕千万里;常常做,不怕千万事。——金樱《格言联壁》28、思诚为修身之本,而明善又为思诚之本。——佚名29、泰山不让土壤,故能成其大;河海不择细流,故能就其深。——李斯30、为学须刚与恒,不刚则隋隳,不恒则退。——冯子咸31、为学犹掘井,井愈深土愈难出,若不快心到底,岂得见泉源乎?——张九功32、伟大变为可笑只有一步,但再走一步,可笑又会变为伟大。——佩思33、伟大的作品不是靠力量,而是靠坚持来完成的。——约翰逊34、我们应有恒心,尤其要有自信心!我们必须相信,我们的天赋是要用来做某种事情的。——居里夫人企业的成功,20%在策略,80%在执行P19789精液检查广州医学第二附属医院检验科黄海樱90精液检查广州医学第二附属医院检验科黄海樱1*标本采集与处理*精液理学检验*精液显微镜检验精液化学与免疫学检验计算机辅助精液分析精液检验的质量控制与临床应用91*标本采集与处理2产生生精细胞

精子(spermatozoon)

垂体前叶促性腺激素精浆(seminalplasma)精液(seminalfluid)精囊液(50%~80%)精浆前列腺液(15%~30%)睾丸、附睾、输精管、尿道旁腺、尿道球腺分泌的液体(少量)92产生生精细胞精子(sper成分精浆蛋白精浆(90%)酶类精液微量金属元素其它有形成分(5%)精子细胞93成分精浆蛋精液检查的目的.评价男性生育功能.计划生育和科研.辅助男性生殖系统疾病的诊断.为精子库或人工授精筛选优质精子.婚前检查.法医学鉴定94精液检查的目的.评价男性生育功能5第一节标本采集与处理1.标本采集时机:禁欲3-7天?2.标本采集方法:手淫法电动按摩法安全套法性交中断法

95第一节标本采集与处理1.标本采集时机:禁欲3-7天?6精液标本采集方法与评价

方法评价手淫法标准采集方法,但部分病人不能取得精液电按摩法手淫法不能取得精液时采用本法安全套法方法易行,但可杀灭精子及损失精液量性交中断法可能丢失精子密度最高的初始精液96精液标本采集方法与评价方法评价73.标本采集的注意事项⑴标本采集前应禁欲3~7天⑵容器⑶采用手淫法⑷采集细菌培养的标本必须无菌操作⑸标本采集转运:(讲解)采集室、全部精液、容器、保温、即送

973.标本采集的注意事项8第二节精液理学检查量2~6ml减少前列腺和精囊病变精囊缺如、射精管阻塞无精液症TB、淋病、炎症过多>8ml雄激素↑稀释精子颜色灰白、乳血精:炎症、TB、肿瘤白、淡黄脓精:精囊炎、前列腺炎气味腥味恶臭:肿瘤、炎症

项目正常病理状态98第二节精液理学检查量2~6ml项目正常病理状态粘稠度胶冻状→米汤样、粘稠度低:先天性精液化囊缺如、输精管道阻塞、少精、无精子症粘稠度高:前列腺炎液化时间20~60分钟液化延缓:前列腺炎PH7.2~7.8PH>7.8:附属性腺或附睾有急性感染性疾病PH<7.2:慢性感染性疾病、精囊机能减退、先天性精囊缺如、输精管阻塞99项目正常

精液粘稠度(粘度计法):测定0.5ml精液通过粘度计所需的时间10011精液粘稠度(玻棒法)以25℃室温,30分钟为精液液化标准,观察已液化的精液粘稠度,可将玻棒与精液接触,提棒时可拉起粘丝,正常精液丝长≤2cm,异常>2cm。异常结果又分:Ⅰ度:30分钟基本液化,用吸管吸取精液出现细丝状粘稠丝Ⅱ度:60分钟不液化,吸取精液出现粗大粘稠丝,涂片时有粘稠感Ⅲ度:24小时后不液化,吸取精液时难吸出101精液粘稠度(玻棒法)以25℃室温,30分钟为精液液化标准项目正常病理状态粘稠度胶冻状→米汤样、粘稠度低:先天性精液化囊缺如、输精管道阻塞、少精、无精子症粘稠度高:前列腺炎液化时间20~60分钟液化延缓:前列腺炎PH7.2~7.8PH>7.8:附属性腺或附睾有急性感染性疾病PH<7.2:慢性感染性疾病、精囊机能减退、先天性精囊缺如、输精管阻塞102项目正常第三节精液显微镜检查涂片检查无精子症(azoospermia)精子缺乏(spermacrasia)103第三节精液显微镜检查涂片检查14一、精子活动率和活动力(一)精子活动率(spermactivityrate):活动精子所占精子总数的百分比【检测原理】1.湿片法:混匀高倍镜观察2.精子体外染色法:精液+染液推片计数(不着色)【方法学评价】104一、精子活动率和活动力15精子活动率检测的方法学评价

方法评价湿片法快速、简便、易操作,但主观性较大,结果误差较大,重复性较差体外染色法操作稍复杂,费时,但能较客观反映精子的死活比例,结果准确可靠、重复性好,试剂易配制与保存105精子活动率检测的方法学评价方法评价16【参考值】1.湿片法:>70%(30-60min)2.精子体外染色:>75%(30-60min)

106【参考值】17【临床意义】活动率<40%可致不育活动率下降见于:①精索静脉曲张②生殖系感染③物理因素④化学因素

107【临床意义】18(二)精子活动力(spermmotility):精子向前运动的能力WHO:a级--快速前向直线运动b级--缓慢或呆滞的前向运动c级--精子呈缓慢或非前向运动

d级--精子呈不动状态

10819【检测原理】1.显微镜检验2.连续摄影法3.精液质量分析仪测定【方法学评价】10920精子活动力检测的方法学评价

方法评价显微镜检验操作简便,但主观性较强,且受许多因素影响连续摄影法需要高精度的实验设备,因此不便于开展普及精子质量分析简单、快捷、易操作、可重复性仪测定好,是一种理想的检验精液质量的方法

110精子活动力检测的方法学评价方法评价21

【参考值】射精后60分钟内a级+b级≥50或a级≥25%【临床意义】精子活动率不足40%,且以C级活力精子为主,男性不育原因之一11122二、精子形态(spermmorphology)【检测原理】1.湿片法:高倍镜观察2.染色法:涂薄片干燥、固定染色油镜观察【方法学评价】1.湿片法:简便、快速,结果偏差大。2.染色法:复杂、费时,准确可靠,重复性好,为WHO推荐方法。112二、精子形态(spermmorphology)23【精子形态判断标准】

1.正常形态:似蝌蚪状,分头、体、尾①头部正面呈卵圆形,侧面呈扁平梨形,头部长4.0~.5μm,宽2.5~3.0μm②体部轮廓直而规则,与头部纵轴成一直线,长5-7μm,宽1μm③尾部细长,外观规则而不卷曲,长50-60μm113【精子形态判断标准】242.异常形态:头、颈、尾、联合缺陷体【参考值】异常精子<20%【临床意义】异常形态精子增多见于生殖系感染、精索静脉曲张、雄激素异常、某些药物、遗传等。11425三、细胞(一)未成熟生殖细胞<1%曲精管受损:↑(鉴别)(二)红、白细胞、上皮细胞<5/HP↑:生殖道炎症、结核、肿瘤等癌细胞:生殖系统恶性肿瘤115三、细胞26四、精子计数精子密度(spermdensity)、精子总数【检测原理】1.显微镜计数法(手工法?)①血细胞计数板法②Makler精子计数板法2.计算机辅助精液分析116四、精子计数27精子密度检测的方法学评价方法评价血细胞计数板法需稀释,计数速度慢,不能同时检测其它参数Makler精子计数板法不需稀释,能同时检测其它参数,计数速度慢,易受精液中细胞等成分影响计算机辅助精液分析操作简便,快速,具有客观、准确和定量分析特点,易受精液中细胞等成分影响

117精子密度检测的方法学评价方法评价28【参考值】精子浓度≥20×109/L一次排精总数≥40×106118【参考值】29【临床意义】精子数量减低见于:①先天性或后天性睾丸疾病②精索静脉曲张③输精管或精囊缺陷④某些药物⑤某些理化因素⑥50岁以上老年人⑦输精管结扎术后6周119【临床意义】精子数量减低见于:30五、精子低渗肿胀试验(HOS)观察精子在低渗溶液中的变化,以检测精子膜的完整性。男性不育症的精子肿胀率明显降低。

120五、精子低渗肿胀试验(HOS)31第四节精液化学与免疫学检验一、精浆果糖(seminalplasmafructose)零:先天性精囊缺如、两侧输精管发育不良、逆行射精↓:精囊炎和雄激素分泌不足单纯性输精管阻塞性无精症的果糖含量正常二、精浆乳酸脱氢酶-X(LDH-X)睾丸萎缩,少精或无精患者:↓三、精浆α-葡萄糖苷酶对鉴别输精管阻塞和睾丸生精障碍所致的无精症有一定意义。

121第四节精液化学与免疫学检验一、精浆果糖(seminalp四、精浆酸性磷酸酶(acidphosphatase,ACP)前列腺炎:PAP↓前列腺癌,前列腺肥大:PAP↑五、精子顶体酶(acrosomalenzyme)与不育指标相关六、精浆锌:↓:生育力下降、生殖器官发育不良122四、精浆酸性磷酸酶(acidphosphatase,ACP七、抗精子抗体1.酶联免疫吸附试验2.精子凝集试验3.精子制动试验4.免疫珠试验5.混合抗免疫蛋白试验123七、抗精子抗体34第五节计算机辅助精液分析

(computeraidedsemenanalysis,CASA)124第五节计算机辅助精液分析

(computeraided1253612637检测原理连续抓拍获取精子动静态图像并存入计算机存贮单元图像存储样品识别确定各图像中精子的位置、大小和数量关联运算确定各精子的运动方向、距离和轨迹运动参数计算计算精子动静态的参数指标输出127检测原理连续抓拍38CASA参数术语曲线速度(VCL):单个精子在单位时间内两个连续位置间运动的平均距离。直线速度(VSL):根据精子头在开始检测时的位置与最后所处位置之间的直线运动的时间平均速度。平均路径速度(VAP):精子头沿其空间轨迹移动的时间平均速度。精子头侧摆幅度(ALH):精子头沿其空间平均轨迹侧摆的幅度。128CASA参数术语曲线速度(VCL):单个精子在单位时间内两个CASA参数术语直线性(LIN):曲线轨迹直线性。VSL/VAP摆动性(WOB):精子头沿其实际轨迹的空间平均路径摆动的尺度。VAP/VCL前向性(STR):空间平均路径的直线性。VSL/VAP鞭打频率(BCF):精子曲线轨迹越过其平均路径轨迹的时间平均速率。平均移动角度(MAD):精子头沿其曲线轨迹瞬间转折角度的时间平均绝对值。129CASA参数术语直线性(LIN):曲线轨迹直线性。VSL/V【方法学评价】优点:①精子运动指标的检测客观、准确、指标多②可以提供精子动力学的量化数据③操作简便、快速、可捕捉的信息量大,可自动化等。130【方法学评价】41缺点:①设备昂贵②准确性受精液中其它成分影响③系统设置缺乏统一的国际标准131缺点:42(一)分析前质量控制1.临床医师2.病人3.检验人员4.器材及试剂5.标本的采集及运送6.检验方法第六节精液检验的质量控制132(一)分析前质量控制第六节精液检验的质量控制43(二)分析中的质量控制1.液化时间2.精子活动率及活动力检验3.精子计数及形态检验4.化学及免疫学检验5.计算机辅助精液分析和精液质量分析仪6.室内质量控制7.室间质量控制133(二)分析中的质量控制44(三)分析后质量控制1.由质控人员审核检验结果后,方可出报告。2.结果报告单规范化,并向临床医生提供必要的讲解和宣传。3.精液检验结果变化范围大,有时不能仅凭一次的检验结果就做出诊断。134(三)分析后质量控制45前列腺液检查广州医学第二附属医院检验科黄海樱135前列腺液检查广州医学第二附属医院检验科黄海樱46第一节标本采集与处理*第二节前列腺液理学检验*第三节前列腺液显微镜检验第四节前列腺液检验的质量控制136第一节标本采集与处理4713748前列腺生理功能:1.维持精浆适当的PH2.参与精子能量代谢3.抑制细菌生长4.使精液液化138前列腺生理功能:49前列腺液电解质:钠、钾、钙、镁、锌等酶:纤溶酶、ACP、ALP、LDH脂类:磷脂、胆固醇免疫物质:Ig、C3、C4、PSA其它:柠檬酸盐等有形成分:卵磷脂小体、细胞139前列腺液电解质:钠、钾、钙、镁、锌等50前列腺液检查目的:前列腺炎、前列腺脓肿、前列腺结核、前列腺癌等疾病辅助诊断、疗效观察,性传播疾病的检验。140前列腺液检查目的:51第一节标本采集与处理

前列腺按摩术检验前3天应禁止性活动采集,洁净玻片、试管立即送检微生物培养:无菌操作禁忌症复查141第一节标本采集与处理52

第二节前列腺液理学检查1.量:数滴~2ML↑:前列腺慢性充血、过度兴奋↓:前列腺炎↓↓:前列腺炎性纤维化、性功能低下2.性状:乳白、稀薄、有光泽黄、混浊、脓性粘稠:前列腺炎红:结核、肿瘤、结石、炎症3.PH:6.3~6.5142第二节前列腺液理

第三节前列腺显微镜检验1非染色标本①卵磷脂小体:多量,均匀分布满视野②前列腺颗粒细胞:<1个/HP③淀粉样小体④红细胞:<5个/HP⑤白细胞:<10个/HP⑥其它:精子、滴虫2染色检查143

第三节前列腺显微镜检验54几种病理情况下前列腺液改变外观卵磷脂小体RBCWBC颗粒细胞正常粘稠均匀分布<5<10<1乳白色满视野轻度前无明显下降+列腺炎改变不匀前列腺脓/脓血下降+++++脓肿消失前列腺血性下降+++癌144几种病理情况下前列腺液改变外观卵磷脂小第四节前列腺液检验的质量控制一、标本的采集和运送二、显微镜检验质量控制

145第四节前列腺液检验的质量控制阴道分泌物检查广州医学第二附属医院检验科黄海樱146阴道分泌物检查广州医学第二附属医院检验科黄海樱57第一节标本采集与处理*第二节阴道分泌物理学检验*第三节阴道分泌物病原生物学检验第四节阴道分泌物检验的质量控制147第一节标本采集与处理58阴道分泌物(vaginaldischarge):是女性生殖系统分泌的液体,主要由阴道粘膜、宫颈腺体、前庭大腺及子宫内膜的分泌物混合而成,俗称“白带”(leucorrhea)。阴道分泌物检验目的:诊断生殖系统感染、肿瘤。148阴道分泌物(vaginaldisch第一节标本采集与处理1.病人准备:取材前24h内,禁止性交、盆浴、阴道灌洗、局部上药。2.采集部位:根据不同检验目的自不同部位取材3.采集器材:刮板、吸管、棉拭子4.标本运送:置盐水试管、涂片、湿拭子置洁净试管149第一节标本采集与处理1.病人准备:取材前24h内,禁止性交一、颜色与性状正常:白色稀糊状、无气味、量多少不等临近排卵期:多,清澈透明,蛋清样排卵期后2-3天:混浊粘稠,少行经前:量增加妊娠期:较多第二节理学检验150一、颜色与性状第二节理学检验61异常:1.大量无色透明粘性:应用雌激素后、卵巢颗粒细胞瘤2.脓性,黄/黄绿,臭:泡沫状:滴虫性阴道炎其它:慢性宫颈炎、老年性阴道炎、子宫内膜炎、宫腔积液及阴道异物引发的感染151异常:623.豆腐渣样,凝乳状小碎块:念珠菌阴道炎4.血性:宫颈息肉、子宫粘膜下肌瘤、老年性阴道炎、慢性重度宫颈炎、使用宫内节育器致不良反应等5.血性,有特殊臭味:恶性肿瘤(宫颈癌、宫体癌)6.黄色水样:子宫粘膜下肌瘤、宫颈癌、宫体癌、输卵管癌7.奶油状,稀薄均匀,有恶臭:阴道加德纳菌感染1523.豆腐渣样,凝乳状小碎块:念珠菌阴道炎63二、阴道清洁度153二、阴道清洁度64生理盐水涂片高倍镜观察:

阴道清洁度判断清洁度杆菌上皮细胞白(脓)细胞(个/HP)杂菌Ⅰ++++++++0-5--Ⅱ++++5-15--Ⅲ----15-30++Ⅳ--+>30++++15465生理盐水涂片高倍镜观察:

阴道清洁度判断清洁度杆菌球菌上皮细胞脓细胞/白细胞Ⅰ多量几乎无满视野0~5/HPⅡ减少可见少量½视野5~15/HPⅢ更少多量少量15~30/HPⅣ几乎无大量几乎无>30/HP155生理盐水涂片高倍镜观察:66[参考值]Ⅰ~Ⅱ度(无致病菌和特殊细胞)[临床意义]1.阴道清洁度与女性激素的周期变化2.非特异性阴道炎3.特异性阴道炎156[参考值]Ⅰ~Ⅱ度(无致病菌和特殊细胞)67第三节阴道分泌物病原生物学检验一、阴道毛滴虫(TV):生理盐水涂片:梨形、活动涂片染色胶乳凝集试验体外培养法157第三节阴道分泌物病原生物学检验一、阴道毛滴虫(TV):6第三节阴道分泌物病原生物学检验一、阴道毛滴虫(TV):生理盐水涂片:梨形、活动涂片染色胶乳凝集试验体外培养法158第三节阴道分泌物病原生物学检验一、阴道毛滴虫(TV):6二、细菌(一)淋病奈瑟菌1.涂片法:G-双球菌急、慢性感染2.培养3.免疫荧光法4.PCR

159二、细菌(一)淋病奈瑟菌70(二)细菌性阴道病主要由阴道加德纳菌、各种厌氧菌及支原体等引起的混合感染。【检验原理】1.涂片染色法:G-/+小杆菌,(1.5-2.5)μm×0.5μm2.阴道菌群检查:计算乳酸杆菌和加德纳菌的数量变化作为诊断参考。3.线索细胞:160(二)细菌性阴道病7116172细菌性阴道炎(BV)诊断标准:1.线索细胞>20%2.胺臭味试验阳性3.分泌物PH>4.54.阴道杆菌减少,加德纳菌和厌氧菌增加162细菌性阴道炎(BV)诊断标准:73三、真菌:生理盐水涂片:孢子、菌丝涂片染色

163三、真菌:生理盐水涂片:孢子、菌丝74第四节阴道分泌物检验的质量控制

164第四节阴道分泌物检验的质量控制75谢谢!165谢谢!761.关于精液标本采集,下列哪项不正确

A

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