检验科标本采集手册参考

标本采集手册目录1申请单（医嘱单） 12标本容器的标识 13患者准备 13.1患者状态 13.2饮食 13.3药物 23.4体位 23.5时间 24采集时间 25血液采集 25.1采血注意事项 25.2采集过程 25.3采集部位 35.4真空采血方法 35.5真空管采血顺序 36尿液采集 36.1临床根据检测的需要选择留尿的方式 36.2采集注意事项和要求 47粪便采集 47.1患者准备 47.2标本采集 47.3标本送检 47.4标本处理 47.5标本拒收 48阴道分泌物标本采集 58.1患者准备 58.2标本采集 58.3标本运送 58.4标本处理 58.5标本拒收 59前列腺液标本采集 59.1患者准备 59.2标本采集 59.3标本运送 59.4标本拒收 510脑脊液标本采集 510.1腰椎穿刺的适应症 510.2腰椎穿刺的主要禁忌症 510.3患者准备 610.4标本采集 610.5标本运送 611浆膜腔积液标本采集 611.1患者准备 611.2标本采集 612临床血液检验标本的采集 612.1血液常规检查 612.2网织红细胞 712.3红细胞沉降率 712.4骨髓细胞检查 712.5血清铁、总铁结合力、血清铁蛋白、运铁蛋白 712.6尿含铁血黄素检测 812.7血红蛋白电泳 812.8凝血和抗凝血筛选试验 812.9血流变检测 913临床生化检验标本的采集 913.1常规生化项目 913.2血气标本的采集 1014临床免疫检验标本的采集 1114.1体液免疫、细胞免疫 1114.2病毒性肝炎血清标志物、HIV抗体的检测 1114.3抗“O”、类风湿因子 1114.4TORCH、呼吸道疾病抗体、生殖道感染抗体、自身免疫抗体谱 1215临床微生物学检验标本的采集 1215.1下呼吸道标本的采集、运送和验收 1215.2尿液标本的采集、运送和验收 1315.3血液标本的采集、运送和验收 1415.4粪便标本的采集、运送和验收 1615.5脑脊液标本的采集、运送和验收 1715.6脓液及病灶分泌物标本的采集、运送和验收 1815.7穿刺引流液标本的采集、运送和验收 2015.8生殖道标本的采集、运送和验收 2115.9临床深部真菌感染标本的采集 2116分子生物学标本采集 2216.1HBV-DNA血清采集 2216.2HCV-DNA血浆采集 2316.3性病标本采集 2316.4结核标本的采集程序 2317输血科标本采集及要求 2418标本验收 2418.1标本输送流程 2418.2不合格及拒收标本 2419已检测样本的材料存放和处置 2419.1血液样本 2419.2体液标本 2519.3微生物标本 2520申请附加检验项目的时间限制和复检要求 2521分析失败的再检验或对同一原始样品做进一步检验 25附件1成都中医药大学附属医院检验科标本采集指南 26附件2检验科检验项目目录 27附件3申请附加检验的项目及时限 29附件4检测项目报告时间和生物参考区间 33附件5检验项目危急值及报告时间 40附件6知情同意书 411申请单（医嘱单）（1）本院具有医师执照的医师开申请单，申请者应对患者讲清楚采集标本的目的，采集的时间、方法及注意事项。（2）申请者应向患者讲清楚采集标本前的准备和用药须知，及可能会影响到结果的注意事项。（3）申请单的填写临床医生在填写申请单时，应完整填写申请单的各项内容，字迹清楚，内容应包括：患者姓名、性别、年龄、病历号（或住院号）、科室、床号（住院病人）、申请日期、标本类型、临床诊断及主要症状、申请检验项目及特殊说明（如用的什么药）、医师姓名、标本采集日期和时间。（4）电子申请单的填写临床医生可通过医院网络开启电子申请，进入医生系统——检验申请流程——在患者姓名窗口进入检验申请窗口——申请单——选择申请项目——录入标本采集时间——核实无误后保存申请——提交申请——自动打印条码——申请状态自动变为已发送（具体步骤需遵从当前使用HIS系统操作说明）。（5）知情同意书（见附件6）：医师开具申请单（医嘱单）并完成对患者的上述告知义务后，患者无异议接受申请单并交纳相关检查费用，住院病人无异议并接受标本采集，视患者知情同意申请单（医嘱单）的检查项目。2标本容器的标识住院患者标本容器上贴上条码，条码信息必须与患者申请单一致且为唯一性标识，包括住院号、条码号、姓名、科室、床号、检验项目、采集时间、采集者信息等。检验科在接收标本后，要打印条码再次进行实验室内编号，同时须有标本接收时间。门诊病人检验申请单必须有临床医生签字或盖章，检验科接收标本后进行条码编号，一个患者3联，分别贴在标本管、申请单上，余下联交予患者用于领取报告单。3患者准备3.1患者状态一般需在安静、休息状态下采集标本。如患者出于高度紧张状态，可使血红蛋白、白细胞增高；运动后由于能量消耗、体液丢失，可造成CK、LDH、ALT、AST等一时性升高，还可引起血液中钠、钙、白蛋白、血糖等成分的改变。3.2饮食多数试验要求在采血前禁食12h，因为饮食中的不同成分可直接影响实验结果。

(1)餐后血液中ALT、GLU、BNU、Na等均可升高，但空腹达24h以上，可出现低血糖，血中TG、游离甘油及脂肪酸可增高。(2)高脂餐后2～4h采血，多数人ALP含量增高，主要来自肠源性同工酶。

(3)高蛋白质餐使血浆尿素、血氨增加，但不影响肌酐含量。(4)高比例不饱脂肪酸食物，可减低胆固醇含量；香蕉、菠萝、番茄可使尿液5-羟色胺增加数倍。

(5)含咖啡因饮料，可使血浆游离脂肪酸增加，并使肾上腺和脑组织释放儿茶酚胺。

(6)食物如含有动物血液，可引起粪隐血假阳性。

(7)饮酒后使血浆乳酸、尿酸盐、乙醛、乙酸等增加，长期饮酒者高密度脂蛋白胆固醇偏高、平均血细胞体积增加、谷氨酰转肽酶亦较不饮酒的病人为高，甚至可以将这三项作为嗜酒者的筛选检查。

（8）吸烟：瘾大者血液一氧化碳血红蛋白含量可达8％，而不吸烟者含量在1％以下。此外，儿茶酚胺、血清可的松亦较不吸烟者为高，血液学方面亦有变化，白细胞数增加、嗜酸粒细胞减少、中性粒细胞及单核细胞增多、血红蛋白偏高、平均红细胞体积偏高。吸烟组血浆硫氰酸盐浓度明显高于非吸烟组。3.3药物药物对检验的影响非常复杂，在采样前，以暂停各种药物为宜，如某种药物不可停用，则应了解可能对检验结果产生的影响。3.4体位体位影响血液循环，由于血液和组织间液因体位不同而平衡改变，则细胞成分和大分子物质的改变较为明显，例如由卧位改为站位，血浆TP、ALB、酶、Ca、胆红素、Tch及TG等浓度增高；RBC、Hb、HCT等亦可增加。由于体位的因素，在确立参考值时，应考虑门诊和住院病人可能存在的结果差异，故采集标本时要注意保持正确的体位和保持体位的一致性。3.5时间病人准备还应考虑病人的生物钟规律，特别是激素水平分析，如女性生殖激素与月经周期密切相关；胆固醇则在经前期最高，排卵时最低；纤维蛋白原在经前期最高，血浆蛋白则在排卵时减少。生长激素于入睡后会出现短时高峰。胆红素、血清铁以清晨最高；血浆蛋白在夜间降低；血Ca往往在中午出现最低值。故采血时间应在相同时间进行。4采集时间要求空腹的项目--住院病人在8：00之前，门诊病人最好在9:00以前，以空腹12小时为准；特殊项目请在相关部门预约。常规项目和急诊项目原则上24小时均可进行。5血液采集5.1采血注意事项严格按照无菌技术操作，无论医生、护士、检验人员除穿戴工作服外，还应戴一次性口罩，同时严格做好采血手的消毒，防止患者采血部位感染。保证一人一针，杜绝交叉感染。真空采血过程如有血液外溢和污染，立即使用过氧乙酸溶液或75%的酒精溶液消毒处理。对所有的采血材料严格执行使用前再次检查，保证安全。采血人员对所采集的标本做好登记工作，并签名。样品采集完后，对所使用的材料做好无害化处置，保证环境和人员安全。静脉采血时，止血带离抽血扎针部位上方约5cm距离，注意袖筒不要太紧，止血带压迫时间宜小于1分钟，若止血带结扎超过2分钟,大静脉血流受阻而使毛细血管内压上升，可有血管内液和组织液交流，能使相对分子质量小于5000的物质逸入组织液；随着压迫时间延长，局部组织发生缺氧而引起血液成分的变化较大，检查结果时出现不应有的增高和减低。为保证检查结果的准确性不能在静脉输液同侧臂或输液三通处进行采血。防止溶血：容器不清洁、不干燥；淤血时间过长；穿刺不顺利，组织损伤过多；抽血速度过快；血液注入容器时未取下针头或注入速度过快时产生大量泡沫；震荡过于剧烈等。若用普通注射器采血后，未取下针头直接将血液注入真空管内，也易造成溶血。5.2采集过程收取检验申请单（医生、护士、检验人员）→审查合格（核对检验单上姓名、住院号、科别、床号、检验项目等是否填写清晰，能正确辨认）→检查真空管条码信息是否与申请单病人信息和要求的检验信息一致→按申请单上的病人姓名呼唤其姓名以再次确认病人→找好采血静脉并消毒→按照采血顺序采取静脉血→用棉签压迫伤口→充分混匀样品（在采血单上填上采血时间）→送至相关部门检测（由运送部或临床医护人员完成）。5.3采集部位通常选择手肘中央部分较粗的静脉血管，用食指触摸，是否为有弹性的血管(肌肉较无弹性)，若血管不明显，请轻拍手肘中央部位(约5～10次)，让血管较易浮现，若该部位不明显，可改用手背处静脉(请患者手轻握)，轻拍手背中央部位(约5～10次)，让血管较易浮现。小儿采用股静脉采血或颈外静脉采血，但有危险性，以少用为宜。5.4真空采血方法确定穿刺部位后，先以碘酒消毒，以选定之静脉穿刺部位为中心点，由内往外以环状涂拭消毒，消毒直径约7.5cm，稍待干躁后进行第二次75%酒精消毒。真空采血装置，设计备有软橡皮套管式止血装置，酒精消毒后，穿刺，回血后即将另一端的硬插管插入真空定量采血管内，血液足量后，拔出硬插管即止血，当插入另一支真空定量采血管时又可采血。整个采血过程无血液溢出和污染，采血完成后，针头从静脉拔除前，先将最后一支试管退出持针器，再拔除针头。针头拆卸，建议直接在针头撤卸器上进行；也可用镊子夹除丢入专用污染废弃桶内；在无镊子卸针的情况下，请将针头平放在桌上，以针就盖。千万不可用手拿针盖而将针套入，避免针扎意外。止血：退针后请病人手指压住棉签，手伸直抬高于心脏，保持两分钟（如果是有出血倾向患者如紫癜，ITP，血液病等，请病人不要离开检验科，要压迫5～10分钟直到无血渗出为止）。5.5真空管采血顺序血标本采集时建议的真空管使用顺序如下：=1\*GB2⑴血液培养（分成人需氧瓶、儿童需氧瓶、厌氧瓶、分支杆菌瓶）（直立旋转混匀）。=2\*GB2⑵生化、免疫(红头)。=3\*GB2⑶凝血象(蓝头)（颠倒混匀8-10次）。=4\*GB2⑷血细胞分析、糖化血红蛋白(紫头)（颠倒混匀8-10次）。=5\*GB2⑸生化、免疫、血流变(绿头)（颠倒混匀8-10次），分离胶普通管（黄头）。=6\*GB2⑹血沉（黑头）（颠倒混匀8-10次）6尿液采集6.1临床根据检测的需要选择留尿的方式=1\*GB2⑴首次晨尿：即留取清晨第一次尿，能真实的反映肾脏病情况。=2\*GB2⑵随机尿：不为条件所限，适于门诊、急诊病人，但受多种因素的影响，有形成分的浓度较低。=3\*GB2⑶午后尿：午餐后2h尿中尿胆原和糖含量高，适于这两种成分的检验，可提高阳性检出率。=4\*GB2⑷中段尿采集法：是临床上最多采用的方法，女性病人先以肥皂水或1：1000高锰酸钾水溶液冲洗外阴部及尿道口；男性病人应翻转包皮，用肥皂水或1：1000苯托溴铵冲洗或消毒尿道口，再用灭菌纱布擦干，让病人排尿，弃去前段尿，收集中段尿10-20ml，盛于无菌容器内立即加盖送检=5\*GB2⑸12h尿：头晚8时排空膀胱并弃去此次尿液，再收集至翌晨8时前的全部尿液，适用于Addis尿沉渣计数。=6\*GB2⑹24h尿：适于代谢产物24h定量测定，如尿蛋白、糖、钠、钾、氯、钙、尿酸、17-羟皮质醇和17-酮皮质醇等。应准确的收集24h尿液，采集方法：早上8点到第二天早上8点，早上8时排空膀胱并弃去此次尿液，再收集，直到第二天早上8点将小便全部收集在容器中，并测尿量，从混匀尿液中采集100-200ml送检。收集24h尿液根据检验目的加入适当防腐剂。24h尿液沉渣还可用于找抗酸杆菌。=7\*GB2⑺特殊体位采集标本：如分别采集直立或运动后尿标本与平卧8h后尿标本，对体位性蛋白尿、运动性血尿诊断有帮助。=8\*GB2⑻下午2点钟至4点钟留取尿标本：适于尿胆原检查。=9\*GB2⑼清洁尿（中段尿、导尿、膀胱穿刺尿等）：适于细菌培养，应注意无菌操作。6.2采集注意事项和要求=1\*GB2⑴应用清洁、有盖、干燥的一次性容器，防止日照与污染。=2\*GB2⑵采集尿液量：尿常规与一般定性检查留取尿液约30-100ml。=3\*GB2⑶尿标本要新鲜，留取后立即送检。放置2h以上尿中成分可发生变化，如红细胞、白细胞溶解等。=4\*GB2⑷尿标本要防止月经血、白带、精液、前列腺液、粪便、烟灰等异物混入。为此应避免月经期验尿。女性患者先要清洁外阴部，用0.1％苯托溴铵溶液侵过的棉球擦洗外阴部并消毒尿道口。一般检查留取晨起第一次清洁中段尿，作细菌培养者应先做尿道口局部消毒处理并注意无菌操作。=5\*GB2⑸尿胆原等化学物质因光分解或氧化，需要避光。7粪便采集7.1患者准备病人必须清楚标本采集前严格饮食控制、标本采集和运送是保证实验结果准确的前提的，应认真与医生合作。免疫法实验前无需控制饮食，化学法实验前3天严格禁食动物性食品，根据病人的病情酌情禁食维生素C等还原性药物。7.2标本采集通常采取自然排出的粪便，无粪便排出而又必须检查时，可经肛门指诊或采便管拭子取标本，灌肠或服油类泻剂的粪便不适合做检验标本。粪便应取新鲜标本，不得混有水、尿液和其它成分。用勺子取新鲜粪便指头大小或2ml（稀便）放入便盒内，大便不正常的，如有脓血粘液时，应选择有脓血粘液部分。不要用卫生纸或其他吸水的物质包大便送检。婴儿不能用尿不湿上的大便。7.3标本送检大便标本采集后应立即送检，不超过1小时。送检过程中需防止出现标本外溢。7.4标本处理粪便标本应及时检验（一般在采集后1小时内检查完毕）。试验所使用的器具必须干净，防止试验出现假阳性。标本容器为一次性使用，检验后标本应焚烧化。7.5标本拒收被容器吸干了水分的标本拒收；标本量过少的标本拒收；混入了尿液或其它成分的标本拒收；采集1小时后采送检的标本拒收。8阴道分泌物标本采集8.1患者准备取阴道分泌物之前应避免性生活、阴道冲洗和上药。8.2标本采集采用无菌生理.盐水棉拭子自阴道后穹窿、子宫颈或阴道壁上多部位取材。8.3标本运送将标本置于消毒小瓶内，迅速送检。如需检查滴虫，应注意保暖。8.4标本处理制备成生理盐水涂片以观察阴道分泌物。若要求找到滴虫，收到标本后应迅速涂片镜检，如不能迅速镜检应将标本继续保温。制成薄涂片做革兰氏染色寻找线索细胞。8.5标本拒收标本采集后未能及时送检，放置时间过长，未采取保温措施的标本。9前列腺液标本采集9.1患者准备患者检查前3天应禁止性活动；检查前先排尿；如做细菌培养，应先清洗尿道口，用无菌试管收集前列腺液。9.2标本采集检查者右手食指涂润滑剂后置于肛门外慢慢插入，直至食指尽量插入直肠内。摸准前列腺，用力适中、均匀，先从上向下按摩前列腺左右叶2～3次，后由中线向肛门按压2～3次，挤压会阴部尿道，前列腺液便从尿道口流出。取样时应弃去第一滴液体，再用试管或玻片收集。9.3标本运送取样后立即送检，避免标本干涸。9.4标本拒收已干涸的标本不能进行镜检，拒收。10脑脊液标本采集10.1腰椎穿刺的适应症（1）怀疑任何形式的脑炎或脑膜炎时；（2）怀疑多发性硬化以及评价痴呆和神经系统病变时；（3）疑有蛛网膜下腔出血时；（4）评价炎性神经病和多发性神经根病时；（5）怀疑脑占位性病变时；（6）神经系统疾患需系统观察或需椎管内给药、造影和腰麻等。10.2腰椎穿刺的主要禁忌症（1）实施腰穿取脑脊液时，一定要考虑是否有颅内压升高，如果眼底检查发现视乳头水肿，一定要先做CT和MRI检查。影像学检查如脑室大小正常且没有移位，后颅凹没有占位征象，方可腰穿取脑脊液，否则不能做腰穿。（2）对休克、衰竭或濒危状态及穿刺部位皮肤有炎症者亦不宜作腰穿。（3）凝血酶原时间延长、血小板计数低于50×109/L、使用肝素或任何原因导致的出血倾向，应该在凝血障碍纠正后方可腰穿。（4）脊髓压迫症做腰穿时应该谨慎，因为腰穿可以加重脊髓压迫症状。（5）开放性颅脑损伤或有脑脊液漏者。10.3患者准备患者应了解腰椎穿刺术的注意事项，放松心情，积极与医生合作。10.4标本采集脑脊液标本由临床医生进行腰椎穿刺采集，必要时可从小脑延脑池或侧脑池穿刺获得。穿刺后应做压力测定，然后将脑脊液分别收集于3个无菌小瓶中，每瓶1～2ml即可，第1瓶做细菌学检查，第2瓶做化学或免疫学检查，第3瓶做细胞计数，顺序不宜颠倒。对于要测定PH的，要求严格保持标本采集过程中的厌氧条件。采集的脑脊液应尽量避免凝固和混入血液。10.5标本运送标本采集后应立即送检，不能超过1小时，以免影响检验结果。11浆膜腔积液标本采集11.1患者准备尽量放松心情，积极与医生配合。11.2标本采集浆膜腔积液标本由临床医生行浆膜腔穿刺术获得，如胸腔穿刺术、腹腔穿刺术、心包腔穿刺术，穿刺术必须严格无菌操作。采集标本量视检验目的而定。积液分别收集于3个无菌小瓶中，第一瓶做细菌学检查，第2瓶做化学或免疫学检查，第3瓶做细胞计数，三瓶顺序不宜颠倒。12临床血液检验标本的采集12.1血液常规检查患者准备采血前患者应避免激烈运动和劳动，一般要求休息15分钟后采血，冬季注意保暖，以保持血液循环畅通。患者心情平静时方可采血。尽量避免药物干扰，化疗患者要求在化疗前采集标本。标本采集采血部位通常选择肘前静脉，幼儿可采用颈外静脉。使用一次性真空采血管，紫头管(抗凝剂为EDTA-K2)。抗凝血2ml。标本运送血液标本应采集后立即送检，并尽快检查。避免标本温度变化过大。标本处理与存储未能及时检验的抗凝血标本在室温下保存，4小时内检测完毕。一般WBC、RBC、PLT可稳定24小时，白细胞分类可稳定6～8小时，血红蛋白可稳定数日。低温（4℃）保存可使血小板计数结果降低。标本拒收检验申请单填写内容与血液标本标识内容不一致或不清楚者可拒收；标本量小于1ml者（婴幼儿、严重烧伤等特殊情况除外），可拒收；血液中有凝块，严重溶血、脂血者，拒收。12.2网织红细胞同血液常规检查的标本采集。12.3红细胞沉降率患者准备患者在安静状态下，采血前一周应尽量避免服用对检测有影响的药物；患者采血时宜采用坐位或卧位。标本采集采血部位通常选择肘前静脉，幼儿可采用颈外静脉。使用黑头管（抗凝剂为枸橼酸钠），采血量1.6ml。标本运送采血后应尽快进行测定。标本处理与存储要求标本应在采血后3小时内完成检测，且在18-25℃室温下进行，室温过高血沉加快，可按温度系数校正。温度过低时血沉减慢，无法校正。室温下标本放置时间不应超过3小时，置4℃不应超过6小时。标本拒收标本量低于要求量、严重溶血、脂血、有凝块者拒收。12.4骨髓细胞检查患者准备患者骨髓穿刺前应避免剧烈运动，休息15分钟。消除恐惧和疑虑。标本采集成人一般取髂后、髂前上棘。取材过程中如遇取材不佳或干抽，可换位取材。必要时应多部位取材，以便全面了解骨髓造血情况。术前应做好消毒处理，严格按照无菌操作规程进行操作。术前给患者注射麻药做局部麻醉，穿刺后应压迫穿刺点一段时间，以免术后出血，再盖上消毒敷料。骨髓液量不宜过多，一般不超过0.2ml，一般不需抗凝，若需要，应使用EDTA-K2。标本运送骨髓标本采集后应迅速送检。标本处理与存储骨髓标本送检后应迅速制片，涂片要新鲜染色，染色剂以瑞氏-姬姆萨混合染色为佳，固定和染色时间要比血片长。标本拒收骨髓标本稀释、凝固拒收。12.5血清铁、总铁结合力、血清铁蛋白、运铁蛋白患者准备一般采血前24小时要素食，避免高脂食物。标本采集标本采集以晨8时为宜，采集患者静脉血2ml，不抗凝或肝素抗凝。标本运送标本采集后应立即送检。标本处理与存储标本送检后应立即检测，4小时内完成。如不能立即检测，应分离血清4℃冰箱保存，1周内进行检测。标本拒收溶血标本应拒收。12.6尿含铁血黄素检测标本最好留取第一次晨尿，不能用铁制容器盛标本。12.7血红蛋白电泳患者准备一般采血前24小时要素食，避免高脂食物。标本采集采集静脉血2ml，紫头抗凝管。标本运送标本采集后应立即送检。标本处理与存储标本制成血红蛋白液后，可在4℃冰箱保存1周。-20℃冰冻可保存几个月，但应避免反复冻融，也可通入一氧化碳形成一氧化碳血红蛋白，冰冻后长期保存。标本拒收标本抗凝失败或抗凝不完全，致使游离红细胞过少者，应予以拒收。12.8凝血和抗凝血筛选试验血浆凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶时间（TT）和纤维蛋白原（FIB）等。患者准备一般采血前24小时要素食，避免高脂食物。情绪稳定，避免剧烈运动。注意患者是否应用肝素、口服抗凝剂等对结果有影响的药物，是否有肝病。标本采集用蓝头管采集静脉血2ml，抽血要顺利，且避免溶血。标本运送标本采集后应立即送检。标本处理与存储3000r/min离心10分钟，分离乏血小板血浆。标本采集后应立即检测，室温下应在2小时内检测完毕。标本拒收溶血、黄疸、脂血、标本量过多或过少、有凝块的标本拒收。12.9血流变检测患者准备采血前避免过度活动和高脂饮食，避免情绪激动。标本采集早晨空腹采血，采血时止血带不宜扎得过紧，采血体位对结果有影响，立位高于坐位，坐位高于卧位。分别用绿头管（标本量5ml）、黑头管（标本量1.6ml）、紫头管（标本量2ml）三支试管同时采集标本。标本运送取血后应立即送检。标本处理与存储取血后静置20分钟后进行试验。最好在4小时内完成。血样不能在0℃以下冰冻保存，室温条件下应在0.5～4小时内完成检测，4℃条件下，在12小时内完成。标本拒收标本量少，有溶血、凝块的标本拒收。13临床生化检验标本的采集13.1常规生化项目患者准备（1）避免剧烈运动：剧烈肌肉运动明显影响体内代谢，引起血中某些成分浓度的改变，如乳酸、肌酸激酶、天门冬氨酸转移酶、乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶、葡萄糖、等的升高，故一般主张抽血前24小时不做剧烈运动，清晨取血，住院病人可在起床前抽血，匆忙赶到门诊的人应至少休息15分钟后取血。（2）注意合理饮食：除了急诊或其它特殊原因外，一般主张在禁食12小时后空腹取血，延长空腹时间(饥饿)或餐后血液的化学成分都会变化。如讥饿时血糖及蛋白质降低、胆红素升高；餐后血糖、血钾、碱性磷酸酶及甘油三酯通常升高，无机磷升高，血清可呈浑浊。另外饮食量及质对检验结果也有影响，如高蛋白饮食可使血清尿素、血氨、尿酸升高；高脂肪饮食引起乳糜微粒血症，导致血清浑浊；饮水过多或过少可使血液稀释或浓缩。血液中成分受饮食影响，变动幅度较大的成分有钾离子、葡萄糖、总胆固醇、甘油三酯、无机磷等。（3）采血前避免饮酒：采血前饮酒可使血乳酸、尿酸等迅速增加，连续饮酒可使天门冬氨酸转移酶、丙氨酸氨基转移酶、γ－谷氨酰基转移酶升高，而γ－谷氨酰基转移酶上升最明显。长期饮酒者往往有甘油三酯血症，γ－谷氨酰基转移酶也会长期不正常。（4）避免紧张与情绪激动，否则可以影响神经内分泌功能，影响呼吸，使乳酸等升高。（5）药物的影响：很多药物进入人体后可使某些检测项目结果增高或降低。如咖啡因可使血糖和胆固醇增高；治疗冠心病的某些药物可使甘油三酯和乳酸脱氢酶减低；维生素C可使乳酸脱氢酶减低；血和尿中维生素C能影响测定过程中的化学反应；维生素B2可使尿呈现黄色；口腹避孕药可影响脂质代谢，可是转氨酶升高等。故病人在检验前应尽可能停服对试验有干扰的药物。（6）体位的影响：体位（站立、坐位、卧位）改变可以引起某些检验指标的显著改变，故建议取血时以坐位5分钟后取血为宜。标本采集采集标本的容器和必需的添加品：(1)不需要抗凝剂的真空采血管（红头管）的项目：TP、ALB、TBIL、DBIL、ALT、AST、ALP、r-GT、GLU、BUN、Cr、CK、LDH、α-HBDH、CK-MB、TBA、HBAIC、K、NA、CL、CA、P、MG、CO2、UA、CK、HBDH、AMY、TG、CHOL、HDL、LDL、APO-A、APO-B(2)需加肝素抗凝的真空采血管（绿头管）的项目：AMON。采集标本的类型和量：(1)血液：一般为静脉血，非抗凝血作生化项目需4ml，抗凝血应视抗凝剂的量而定。(2)尿液：应清楚记录24小时尿量，混匀后取10ml送检，尿淀粉酶取随机尿。静脉血标本采集时应注意的问题：(1)一侧手臂输液时应从对侧手臂采血，禁止在输液同侧手臂采血，以免影响检测结果。(2)压脉带使用时间应少于1分钟，以免引起血液淤滞，超成血管内溶血或血液某些成分的改变，特别是测定乳酸时不可使用压脉带，否则结果偏高。(3)避免溶血，溶血会使血钾、胆红素以及一些酶（如LDH）等指标的结果出现明显偏差。标本运送标本采集后应及时送检。送检过程中应避免日光直接照射，且注意不要剧烈震荡。标本处理和存储标本应及时分离血清，尽快检验。由于血细胞的代谢、气体交换及物质转移使细胞内外多种成分发生变化，导致分析结果出现误差，如血氨、二氧化碳测定的标本放置时间过长，氨和二氧化碳会挥发，影响检测结果。血液中的酶在室温下放置，活性会逐渐降低。血液放置时间过长，葡萄糖会减低，血钾会升高。实验室温度应保持在15℃～25℃，防止标本水分蒸发，标本浓缩。如不能及时检测，可将血清于4℃冰箱放置2～3天，但大多数酶类不管在什么温度下保存，其活性都会有一定损失。标本拒收标本量过少，试管用错，溶血以及严重脂血的标本可拒收。13.2血气标本的采集患者准备患者采血前解除恐惧心理，保持安静是很重要的条件，以免造成血气误差，也减少患者的疼痛。标本采集采用动脉血，取桡动脉、肱动脉、股动脉、足背动脉均可，最常取桡动脉。取血的注射器需用肝素（1000U/ml）抗凝，肝素应充分湿润注射器内壁但不过量，血标本要隔绝空气，可在针尖插入一橡皮塞，然后用两手滚动注射器使标本充分混合达到抗凝，如发现混有小气泡时，可将针管竖直，立即排出气泡，避免血液与气泡震动。标本运送抽血后要求严加密封，不能接触空气，立即混合均匀送检，天热可放冰壶中送检。标本处理和储存采集后应尽快检验，不宜放置过久，以免影响结果的准确性。如不能及时检测，应保存于4℃冰箱中，时间不超过2小时，测定时再在室温放置数分钟，并充分混匀。标本拒收血气标本在采集和运送过程中，封闭的皮塞脱落或密封失败的标本应拒收；未按要求及时送检、体积不足、标识不正确的标本应拒收。14临床免疫检验标本的采集14.1体液免疫、细胞免疫患者准备患者应遵守医嘱用药，特别要告知主管医师服药情况。采集血液标本，以晨起空腹12小时以上为最佳。患者避免剧烈运动，保持情绪稳定。标本采集体液免疫的标本使用真空采血管采集空腹静脉血3ml，不抗凝，即红头管。细胞免疫的标本使用EDTA.2K类抗凝剂抗凝管采集抗凝血1-2ml，即紫头管，不得使用分离胶真空管。标本运送采血后应密闭，尽快送检，途中注意不要剧烈震荡，避免过大的温度变化。标本处理和储存常规分离血清，避免溶血。测定IG时最好使用新鲜血清或保存于4℃条件下且不超过72小时的血清。补体应立即检测，室温不得超过6小时，2～8℃不得超过24小时。标本拒收试管错误标本、溶血标本、陈旧标本、标识有误标本拒收。14.2病毒性肝炎血清标志物、HIV抗体的检测患者准备不需要强调患者禁食。标本采集使用一次性真空管采集静脉血3ml，可以使用血清或血浆，即红头管和绿头管都可，但建议使用血清。标本运送采血后应密闭，注意不要剧烈震荡。标本处理和储存标本应尽快分离血清，及时测定。标本于4℃条件下保存5天或-70～-20℃保存数年，抗体滴度稳定。不得反复冻融。不得使用防腐剂。标本拒收溶血标本、反复冻融的标本、细菌污染的标本拒收。14.3抗“O”、类风湿因子患者准备了解患者服药史；告知患者应禁食12小时以上。标本采集使用一次性真空采血管，不需抗凝，即用红头管。标本运送标本采集后应及时送检，容器密闭，注意避光。标本处理和储存标本密闭，垂直放置，凝集充分后一次完成离心。分离好的血清应及时测定。若8小时内不能完成检测，血清应置于2～8℃保存。若24小时内不能完成检测，应于-20℃保存或冰冻保存。标本拒收溶血标本，标本不足的标本。14.4TORCH、呼吸道疾病抗体、生殖道感染抗体、自身免疫抗体谱患者准备一般不需要禁食，但应忌油腻食物。标本采集使用真空采血管，血清或血浆都可。标本运送容器密闭，避免剧烈震荡。标本处理和储存分离血清时应避免溶血，检测时最好使用新鲜血清或保存于4℃条件下且不超过24小时的血清，较长时间保存应在-20℃以下，且避免反复冻融。标本拒收采集后未按要求储存及处理的标本、溶血标本、标识有误的标本拒收。15临床微生物学检验标本的采集15.1下呼吸道标本的采集、运送和验收送检指征（1）下呼吸道感染患者可有发热、咳嗽和咳痰，痰呈脓性、粘稠或血性，可伴有胸痛、气急、甚至呼吸困难，肺部可闻及湿罗音；（2）白细胞总数和中性粒细胞比例明显增高，甚至核左移是下呼吸道感染最常见的症状，咳嗽的性质与痰的性状如脓或铁锈样痰具有鉴别诊断意义，应采集标本送检。（3）X线检查提示肺部有炎症性浸润或胸腔积液等，严重者可导致感染性休克和呼吸衰竭；（4）下呼吸道标本进行病原学检查对临床诊断和治疗具有重要意义；（5）对婴幼儿最常见的是发热、气急和呼吸困难等症状。标本采集标本采集应在临床工作人员指导下进行，并尽可能在抗菌药物使用之前采集；对可疑烈性呼吸道传染病（如SARS、肺炭疽、肺鼠疫等）的患者采集检验标本时必须注意生物安全防护，一般采用以下几种方法：（1）自然咳痰法晨痰最佳，患者清晨起床后，用清水或牙刷清洁口腔和牙齿，有假牙者应取下假牙。用力深咳，从气管咳出呼吸道深部的痰，痰直接吐入无菌、清洁、干燥、不渗漏的广口带盖容器中，标本量≥1ml，立即送检。。对于痰量少、无痰或咳痰困难者可雾化吸入加温至45℃的100g/L无菌Nacl水溶液，使痰液易于排出。（2）支气管镜采集法由临床医生按相应操作规程采集。用支气管镜在肺内病灶附近用导管吸引或用支气管刷直接取得标本，该方法对患者有一定痛苦，不易接受。（3）防污染毛刷采集法和支气管肺泡灌洗法由临床医生按相应操作规程采集，采集标本放入痰杯中，标本量应大于1ml，立即送检，必须注意采集标本时尽可能避免咽喉部正常菌群的污染。（4）胃内采痰法无自觉症状的肺结核病人尤其婴幼儿不会咳嗽，且有时将痰误咽入胃内，可采集胃内容物做结核分枝杆菌培养。该法应于清晨空腹时，将胃管插入胃内，用注射器抽取胃液。（5）小儿取痰法：用弯压舌板向后压舌，将拭子伸入咽部，小儿经压舌刺激咳嗽时，可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上送检。由临床医生采集。标本的运送标本采集后尽快送检，不能及时送检的标本，室温保存≤2小时.标本的验收（1）检查培养杯是否有渗漏、破损或明显污染；（2）标本是否有标签；（3）检查培养杯上的标签与申请单是否一致；（4）检查标本是否适量，是否合格。15.2尿液标本的采集、运送和验收送检指征患者出现以下症状和体征之一时，应考虑做尿培养：（1）尿频、尿急、尿痛、排尿困难和耻骨上压痛；（2）肉眼脓尿或血尿；（3）尿常规表现为白细胞和/或亚硝酸盐阳性；（4）不明原因的发热，无其他局部症状；（5）留置导尿管的病人出现发热；（6）膀胱排空功能受损有尿储留；应注意儿童和老年患者的尿路感染症状通常不典型，且易引起肾脏损害，需特别留意，及时采集标本送检，以免漏诊。标本采集（1）采集原则尿标本采集应在未使用抗生素之前，注意避免消毒剂污染标本，应保证尿液在膀胱内至少停留4小时以上。（2）采集容器a容器为不与尿液成分发生反应的惰性材料制成；b清洁、无菌、加盖、封闭、防渗漏；c不含防腐剂和抑制剂；d广口、具有较宽的底部，容积应>50ml，盒盖易于开启。（3）采集方法a清洁中段尿：最好留取早晨清洁中段尿，嘱咐患者睡前少饮水。清晨起床后肥皂水清洗会阴部，女性应用手分开大阴唇，男性应翻上包皮，仔细清洗，再用清水冲洗尿道口周围，开始排尿，将前段尿排出，中段尿约10～20ml，直接排入专用的无菌容器中，立即送检，2小时内接种。标本由医护人员采集或医护人员指导由患者正确留取。b耻骨上膀胱穿刺：由医生按无菌操作技术采集，使用无菌注射器直接从耻骨上经皮穿入膀胱吸取尿液。主要用于厌氧菌培养或留取标本困难的婴儿尿标本的采集。c直接导尿：按常规方法对会阴局部进行消毒后，用导尿管直接经尿道插入膀胱获取膀胱尿液。该法可减少尿液标本污染，准确地反映膀胱感染情况，但有可能将下尿道细菌引入膀胱，导致继发感染，一般不提倡使用。d小儿收集包：对于无自控能力的小儿可应用收集包收集尿液,这中装置由于很难避免会阴部菌群污染产生假阳性，所以只有在检验结果为阴性时才有意义。如检验结果为阳性，应结合临床进行分析，必要时可使用耻骨上膀胱穿刺或导尿法流取尿液进行复检。e留置导尿管收集尿液：利用留置导尿管采集标本时，应先消毒导尿管外部，按无菌操作方法用注射器穿刺导尿管吸收尿液，操作时应防止混入消毒剂，不能从尿液收集袋中采集尿液送检。标本运送标本采集后应及时送检，及时接种，室温下保存时间不超过2小时，4℃标本验收（1）检查标本标识是否与申请单相符；（2）检查标本容器有无渗漏，渗出、是否加盖；（3）检查送检时间是否超过规定的标本保存时间。15.3血液标本的采集、运送和验收采血指征患者出现以下一种体征时可作为采血的重要指征：（1）发热（≥38℃）或低温（≤36（2）寒战；（3）白细胞增多（＞10×109/L，特别有“核左移”未成熟的或带状的白细胞增多）；（4）皮肤粘膜出血；（5）昏迷；（6）多器官衰竭，血压降低，CRP升高及呼吸快；（7）血液病患者出现粒细胞减少（成熟的多形核白细胞<1×109/L），血小板减少等。或同时具备上述几种体征时而临床可疑菌血症应采集血培养。新生儿菌血症，应同时做尿液和脑脊液培养。标本的采集（1）皮肤消毒程序：严格执行以下三步法a70%酒精檫拭静脉穿刺部位待30秒以上；b1%～2%碘酊作用30秒或10%碘伏60秒，从穿刺点向外画圈消毒，至消毒区域直径达3cm以上。c穿刺后用70%酒精脱碘。对碘过敏的患者，用70%酒精消毒60秒，待酒精挥发干燥后穿刺采血。（2）培养瓶消毒程序70%酒精或异丙醇檫拭血培养瓶橡皮塞，作用60秒，然后注入血液。（3）静脉穿刺和培养瓶接种程序a在穿刺前或穿刺期间，为防止静脉滑动，可戴乳胶手套固定静脉，手不可接触穿刺点；b用注射器无菌穿刺取血后，勿换针头直接注入血培养瓶，或严格按厂商推荐的方法采血。c血标本接种到培养瓶后，轻轻混匀以防止血液凝固，立即送检，切勿冷藏。（4）采血量成年患者：推荐的采血量为每套不少于10ml，每瓶不少于5ml；婴幼儿患者：推荐的采血量，每瓶不少于2ml（5）血培养份数和采血时间对怀疑菌血症的成人患者，推荐同时采集2-3套（不同部位）血培养标本。婴幼儿患者，推荐同时采集2次（不同部位）血培养标本。一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单份培养或一套血培养。多次采血不应在同一部位进行，应更换部位。对于间歇性寒颤或发热应在寒颤或体温高峰到来之前0.5～1小时采集血液。对于某些全身性和局部感染患者采血培养的建议：a急性发热怀疑菌血症者，应尽量在抗菌药使用之前，在10分钟内于不同部位采集两份血标本，每一份血标本接种需氧和厌氧培养瓶各一个。b对于非急性感染，怀疑有菌血症者，应在24h内于不同部位采集采集2～3份血标本，每次采血的间隔不应小于3h，并应于抗菌给药前采血。C急性细菌性心内膜炎患者，应在在1-2小时内采集3份血标本，并尽量在抗菌药前采血；如果24小时培养阴性，可再采集3份以上的血标本。入院前两周内接受抗菌药物治疗的患者，连续3天，每天采集2份。可选用中和或吸附抗菌药物的培养瓶。D亚急性细菌性心内膜炎患者，在24小时内不同部位采集血液标本2或3份，每次间隔大于1h；如果24小时培养阴性，可再采集2或3份以上的血标本进行培养。E不明原因发热，可在24小时内不同部位采集血液标本2或3份，每次间隔大于1h；如果24～48小时培养阴性，可再采集2或3份以上的血标本。f可疑菌血症或真菌菌血症，但血培养持续阴性，改变血培养条件和方法，以获得罕见的或苛养的微生物。g儿童菌血症患者在24小时只需要采一次血标本进行培养，需特别注意穿刺部位的消毒，以区别感染菌和污染菌，由于儿童厌氧菌菌血症罕见，常规血培养不做厌氧培养。标本运送采血后立即送检，如不能立即送检，室温保存不得大于2小时，最好置35～37℃标本验收（1）检查培养瓶是否有渗漏、破损或明显污染；（2）检查瓶子上的标签与申请单是否相符；（3）检查血液标本是否适量，并在申请单上注明采血量，抗生素使用情况以及采血部位（如静脉、导管）；关注送检是否及时以及血液标本是否适量；（4）对于延迟送检的血培养瓶应注意肉眼观察微生物生长可视信号，如发现可视信号提示有微生物生长，应该立即直接涂片镜检和划线转种。15.4粪便标本的采集、运送和验收送检指征当腹泻患者出现以下任何一种情况时建议采集粪便标本，进行细菌培养（1）粪便涂片镜检白细胞＞5个/高倍镜（2）重症腹泻（3）体温大于38.5（4）血便（5）便中有脓液（6）未经抗菌药物治疗的持续性腹泻患者（7）来自疫区的患者标本采集（1）标本采集尽可能在发病早期和应用抗菌药物治疗之前，在不同的时间采集2～3份标本，可提高致病菌的分离率。（2）自然排便采集标本时，取有脓血、粘液、组织碎片部分的粪便1～3g。液体粪便择取絮状物，1～3ml，直接装入无菌、带盖、广口的培养杯中送检，送检的标本中不能加入防腐剂。（3）直肠拭子采集标本：适于排便困难者或婴幼儿。可用肥皂水将肛门周围洗净，用无菌盐水保存液或增菌液润湿的棉拭子插入肛门，成人4～5cm,儿童2～3cm,与直肠粘膜表面接触，轻轻旋转，必须将拭子置于适当的运送培养基内送检。标本的运送（1）粪便标本应尽快送检，室温条件下不超过2小时。如不能及时送检可加入PH7.0的磷酸盐甘油或转运培养基，但不宜超过24小时。使用改良Cary—Blair培养基时，不能运送培养志贺氏菌的标本。（2）直肠拭子采集的标本必须置入运送培养基或GN肉汤中送检，转运时间不宜超过2小时。（3）高度怀疑霍乱弧菌感染的标本运送必须符合特殊标本的安全要求。（4）直肠活检标本用粪便培养杯送检，内盛少量无菌蒸馏水以防标本干燥。标本验收（1）对粪便标本放置时间＞2小时，拒绝接收，在申请单注明“标本放置时间过长，请重留标本送检”；（2）直肠拭子未置于运送培养基中，拒绝接收，在申请单注明“标本送检不合格，请重留标本送检”；（3）送检的粪便标本中混有尿液,拒绝接收，在申请单注明“送检的标本中混有尿液，不合格，请重留标本送检”。（4）直肠拭子或活检标本干燥，拒绝接收，在申请单注明“标本已干燥，不合格，请重留标本送检”。15.5脑脊液标本的采集、运送和验收送检指征（1）多数成人患者症状为发热、头痛、恶心、呕吐以及颈项强直和反射增强等脑膜刺激征的表现，脑脊液的典型改变有腰穿时压力增高，脑脊液的白细胞和蛋白增高、糖含量减低和致病菌培养阴性；（2）婴幼儿和老年人临床表现经常为不明确和无特异性，因此对于婴儿不明原因发热，应怀疑为脑膜炎，采集脑脊液及时送检。标本的采集（1）采集时间怀疑为脑膜炎的病人，应立即采集脑脊液，必须在使用抗菌药物以前采集标本。（2）采集方法：经腰穿穿刺采集脑脊液a用碘酊消毒皮肤；b在L3-L4、L4-L5或L5-S1间隙插入带有空心针的空针；c到达蛛网膜间隙，拔去空心针，收集脑脊液1～2ml于3支防渗漏的无菌小瓶中，立即送检，选取最混浊的一支送做微生物检查。d抽取足够量的脑脊液：用于检测细菌，脑脊液量应大于或等于1ml；用于检测抗酸杆菌，脑脊液量应大于或等于2ml；用于真菌培养，脑脊液量应大于或等于2ml。标本采集的注意事项（1）如只采集了一小瓶脑脊液，应首先送到微生物室；（2）做脑脊液培养时，建议同时做血培养；（3）采集脑脊液的小瓶不需要加入防腐剂；（4）进行腰穿过程中，严格无菌操作，避免污染。标本的运送采集标本后应在常温下立即送检，否则回影响检出率，用于细菌培养的标本不可置冰箱冷藏或低温保存，否则会使病原微生物死亡，尤其是脑膜炎奈瑟氏菌、肺炎链球菌和流感嗜血杆菌。标本的验收（1）检查培养瓶是否有渗漏、破损或明显污染；（2）检查培养瓶是否有标签;（3）检查瓶子上的标签与申请单是否相符；（4）检查脑脊液标本是否足量。15.6脓液及病灶分泌物标本的采集、运送和验收送检指征包括手术部位感染、皮肤和软组织感染、骨骼感染等。（1）手术部位感染a切口感染：手术后30天内，皮肤、皮下组织或肌膜层以上组织出现感染征象。b深部伤口的感染：无植入物手术后30天内；植入物手术后一年内，肌膜层以下组织出现感染征象。患者常有发热、局部疼痛或压痛等临床症状。（2）皮肤和软组织的感染皮肤和软组织的感染包括皮肤感染、软组织感染、褥疮感染、烧伤感染、乳房溃疡、乳房炎、脐炎等。a皮肤感染：局部出现疼痛、压痛、红、肿或热等临床症状；b软组织感染：坏死性筋膜炎、感染性坏疽、坏死性蜂窝组织炎、感染性肌炎、淋巴腺炎、淋巴管炎等患者出现以下任一项时，需采集标本进行病原学检查：局部出现脓性分泌物；手术或组织兵力检查发现脓疡或其他感染证据；局部疼痛、压痛、红、肿或热等临床症状。c褥疮感染：局部出现疼痛、压痛、红、肿等临床症状，或者产生脓性分泌物。d烧伤感染：患者出现以下任一项时，需采集标本进行病原学检查。①局部出现脓性分泌物；②烧伤部位发生明显变化，如：急速的焦痂剥离、颜色变深或伤口周围肿胀，且组织病理检查发现微生物侵犯至邻近组织；③无明确的感染存在，但血液培养分离出微生物。④骨骼感染a骨髓炎：患者出现以下情况之一者，需采集标本进行病原学检查。①手术或组织病理检查发现骨髓炎征象；②未明原因的发热，局部舯、红、压痛或有引流物等临床症状任两项，血液培养分离出微生物或血液抗原检测阳性或影像学提示感染者。b椎间盘感染：患者出现以下情况之一者，需采集标本进行病原学检查。①手术或组织病理检查发现局部有感染征象者；②未明原因的发热、病灶部位疼痛且血液或尿液抗原检测阳性者；③未明原因的发热或病灶部位疼痛且影像学提示感染者。标本的采集（1）组织（脓肿周围或感染部位下组织）经手术或活检获得的组织是最好的检测标本，应尽快送微生物室，以便及时、正确地处理。（2）开放性脓肿以无菌生理盐水或70%乙醇擦去创口表面分泌物,尽量抽吸深部脓液送检，标本量≥1ml。（3）闭合性脓肿以无菌生理盐水或70%乙醇擦去表面分泌物，再抽吸脓肿壁，无菌操作置入厌氧运送系统。（4）分泌物组织和脓液优于拭子，若必须使用拭子采集标本，则深入伤口，取邻近新生组织处标本，置运送培养基运送。（5）常见皮肤软组织感染标本采集a蜂窝组织炎以无菌生理盐水或70%乙醇清洁局部后,用注射器自炎症中央(而非边缘)抽吸。未形成脓肿时，标本难以采集，可用小量无菌生理盐水灌洗，注入无菌杯送检。b口腔感染口腔感染包括牙龈、牙周、根尖周感染及溃疡坏死性口炎。仔细清洁牙龈及齿缘，去除唾液、碎屑、斑点，用牙周刮仔细刮取齿缘损伤物质置厌氧运送系统运送。以相同方法采集标本涂片、染色。c耳部感染包括内耳及外耳感染。鼓膜穿刺术适用于复杂的、复发的或慢性持续性中耳炎。①鼓膜完整时，用肥皂液清洗耳道，鼓膜穿刺术抽吸脓液置无菌杯或厌氧运送系统；②鼓膜破裂时，通过反射镜，用柔软拭子采集，置运送培养基。③外耳炎时，以湿棉签清洁耳道，用力转动拭子采集标本，以免漏检链球菌。d眼部感染包括结膜、角膜、玻璃体感染。由于标本量小，推荐在床边接种平板及涂片。①以无菌生理盐水湿润拭子，两侧分别以不同的拭子在结膜上滚动，直接接种血平板及巧克力平板，也可将拭子送实验室接种。应注意即使只有一侧发生结膜炎，亦尽能采集双侧标本，以确定局部菌群，与患侧分离菌比较。②角膜刮取物由眼科医生在麻醉下采取（麻醉剂可能抑制某些细菌生长，尽量在麻醉前采集结膜标本）。用无菌刮匙刮取溃疡或损伤处，刮取物直接接种血平板及巧克力平板及真菌培养基。③玻璃体抽吸液注入无菌杯送检，若标本量小，可直接接种培养基。e导管相关性感染怀疑发生导管相关性感染时，应采集导管做病原学检查。采集方法：以70%乙醇消毒导管周围皮肤，无菌操作拔除导管，剪下近心端末梢5cm，置无菌容器，立即送微生物室，以免干燥。标本的保存和运送（1）脓液、拭子或厌氧运送系统，室温下2小时内，最长不超过24小时送到实验室。厌氧培养标本以无菌、无氧容器及时运送，若不能及时运送，应置室温，不可置冰箱保存。（2）组织置厌氧运送系统或无菌杯送检。标本量少时，加及滴无菌生理盐水保湿。室温下15分钟内，最长不超过24小时送到实验室。胃活检组织室温下1小时内，或者4℃（3）蜂窝组织炎标本：无菌杯（不推荐注射器直接运送）室温下15分钟内，最长不超过24小时送达实验室。（4）口腔感染标本：厌氧运送系统室温下2小时内，最长不超过24小时送达实验室。（5）耳部感染标本：室温下2小时内，最长不超过24小时送达实验室。外耳标本若不能在2小时内送达实验室，可于4℃（6）眼部感染标本：培养基或标本室温下15min内，结膜拭子2小时内，最长不超过24小时送达实验室。（7）导管：室温下15分钟内送达实验室。否则，4℃标本的验收（1）检查容器是否有渗漏、破裂或明显污染，容器标签与申请单是否一致。（2）标本量、容器、运送条件、重复检查间隔符合相应标本采集与运送标准。（3）表浅伤口感染标本革兰染色显微镜检查，鳞状土皮细胞<2+，见多形核白细胞，方可接受标本。反之，鳞状上皮细胞>2+，无多形核白细胞，为不可接受标本。（4）标本显微镜学检查发现大量鳞状上皮细胞，提示正常菌群污染，为不可接受标本。15.7穿刺引流液标本的采集、运送和验收送检指征（1）怀疑结核性或化脓性胸膜炎，肺炎、肺脓肿、支气管扩张等感染出现胸膜腔积液者;（2）怀疑细菌性或结核性腹膜炎出现腹腔积液者；（3）心包炎症出现心脏压塞和未明原因的渗出性心包炎时，行心包穿刺；（4）滑膜腔积液采集指针包括：a手术中或组织病理检查发现感染证据者；b不明原因的关节红肿、热、痛、压痛、积水或活动受限等临床表现中任意两项，并且关节液革兰染色显微镜检查发现微生物及白细胞、或影像学提示感染，或血液、尿液或关节液抗原检测阳性，或关节液化学及细胞学检查提示感染而与原有风湿性病变无关者。标本采集一般由临床医生采集穿刺液、引流液标本。避免自引流袋采集标本，避免以拭子送检标本。（1）以碘消毒欲穿刺部位皮肤，无菌操作，经皮穿刺抽取体腔积液，注入厌氧运送系统或无菌杯送检。亦可直接接种血培养瓶，其中0.5ml注入无菌杯以备涂片显微镜检查。（2）细菌培养标本量须在1ml以上，诊断非卧床腹膜透析患者腹膜炎时，至少采集10ml标本。标本运送（1）标本采集后，应及时送实验室。室温下15分钟内，最长不超过24小时送到实验室。（2）心包积液以及用于真菌培养的体液，4℃（3）运送容器中应加入抗凝剂,以防止运送过程中凝固.标本的验收（1）检查容器是否有渗漏、破裂或明显污染，容器标签与申请单是否一致。（2）标本量、容器、运送条件、重复检查间隔符合相应标本采集与运送标准。15.8生殖道标本的采集、运送和验收送检指征成人患者典型症状为尿道口红肿、瘙痒、烧灼感，有时尿急及排尿困难，可有稀薄粘液或粘液脓性甚至粘稠脓性分泌物。但是部分患者可无任何症状，或症状很轻微。标本采集根据感染的部位和可能的病原体确定病原学诊断的标本种类、采集部位和采集方法等。由于外生殖器存在有正常菌群，所以在采集标本时应注意尽量减少或避免正常菌群的污染。（1）尿道分泌物a男性清洗外尿道，将灭菌拭子插入尿道内2～4cm，转动并停留2s采集标本。b女性清洗外尿道，用灭菌拭子经阴道在耻骨联合处按摩尿道采集排出物。c巴氏腺、尿道旁腺：碘酊消毒皮肤，抽吸液体到灭菌容器中或用灭菌拭子蘸取。d阴道分泌物：用灭菌拭子擦去多余的分泌物或排出物，弃去；再用另一灭菌拭子或吸管从阴道穹隆粘膜采取分泌物；如果要作涂片，则再用一根拭子。e宫颈分泌物：用窥器无润滑剂观察官颈，用灭菌拭子擦取官颈的粘液和分泌物，弃去；重新用灭菌拭子小心轻轻地从颈管采集标本。f前列腺按摩液：清洗尿道口，从肛门用手指按摩前列腺，用无菌拭子或无菌容器收集前列腺液。g溃疡分泌物：先用生理盐水清洁病灶，用灭菌拭子取其边缘或底部的分泌物。标本的运送采集标本后应立即室温送检，否则会影响检出率。标本的验收（1）检查培养容器是否有渗漏、破损或明显污染。（2）标本是否有标签。（3）查容器上的标签与申请单是否相符。（4）检查标本是否适量。15.9临床深部真菌感染标本的采集标本采集的类别（1）各种分泌物和排泄物，泌尿生殖道分泌物、耳垢、痰、粪便、尿液等。（2）血液和体液，体液包括胸水、腹水、脑脊液、淋巴穿刺液等。（3）脓汁及渗出物。（4）其他如眼部、下呼吸道灌洗液等。标本采集方法和注意事项具体采集的方法和注意事项见下表1，除此而外应注意以下事项：（1）采集的标本量要足，血液和脑脊液标本5mL，胸腔液20mL，并且应立即送检，深部真菌标本最长不超过2h。（2）对于高度怀疑深部真菌感染的病人如果静脉血培养不成功，应采用动脉血培养。（3）对于引流脓肿或溃疡脓液，最好不用拭子取材，应尽可能从损害的深部取材，非引流的皮下脓肿或窦道中的脓液要用无菌注射器抽吸。表1真菌感染标本的采集方法标本类型标本采集运送／保存的时间和温度备注用途及方法器材及标本最小用量血液碘酒消毒皮肤，采集少量血进行真菌培养无菌血培养瓶，标本量5-10mL≤2h，RT*／≤24h，RT脑脊液采集用于真菌培养取至少2mI_，样本置于无菌杯中≤15min，RT或30℃／≤可吸取或活检脑脓肿标本，杜绝冷藏前列腺液前列腺按摩取液最好直接接种于培养基，或用无菌杯及时送检≤15min，RT／≤24h，RT用于芽生菌病检测，也可用于隐球菌病的检测下呼吸道标本清晨新鲜痰液；支气管肺泡或支气管灌洗液，用于真菌培养取标本>1mL置于无菌杯≤2h，RT／≤24h，4二相性真菌存活时间短上呼吸道标本用灭菌盐水浸湿的拭子采取病损部位拭子或无菌杯≤2h，RT／≤24h，RT酵母菌用选择培养基其他体液(腹水、胸水等)标本离心集菌，取沉淀物进行分离培养置于无菌杯内，酵母菌可用无菌血培养瓶≤15min，RT／≤24h，4少量标本可用注射器过滤浓缩(0.21um)尿液取晨起尿液标本用于真菌培养无菌杯，标本量≥1mL≤2h，RT／≤24h，4留取中段尿阴道分泌物用于真菌培养拭子刮取≤2h，RT／≤24h，RT主要用于顽固性白假丝酵母菌性阴道炎的检测注：RT*室温16分子生物学标本采集16.1HBV-DNA血清采集采集容器无菌真空采血管（红头）标本采集以真空采血方式采集被检者静脉血2－3ml。标本运送标本采集后放入不易破碎的容器中，在30-40分钟内送至实验室。标本的处理室温（20-25℃）1500转/分离心5分钟（或按作业指导书操作），吸取血清盛入另一支无菌离心管中备用，（特别注意不要吸入红血球和严禁溶血，否则易使结果出现假阴性）。标本的保存若标本在1-2周内检测，放2-8℃冰箱保存。若在一个月内检测放-20℃保存，若长期保存则放16.2HCV-DNA血浆采集采集容器无菌真空采血管（紫头）标本采集用EDTA作为抗凝剂，以真空采血方式采集被检者静脉2-3ml，混匀（防止剧烈振动，以免溶血）。若用白细胞，则同“EB-DNA白细胞的采集、运送和保存的标准操作程序”。标本运送标本采集后放入不易破碎的容器中，在20分钟内送至实验室。16.3性病标本采集采集容器无菌管（灰头）。