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文档简介
CESI8000Plus简CESI8000Plus高效毛细管电泳分离与电喷雾离子化系统,是将具有高分离效率的毛细管电泳技术和高分辨能力的质谱技术整合在一起联用的分析平台。CESI8000Plus不仅管电泳技术在极性物质分离中的优势,有效的应用于在疾相关研究中。毛细管泳技术(CE)及其在疾病相关研究中的优
用的特点,成为目与液相色谱一样,毛细管电泳可以用于各种化学和生物分析的分析,而毛细管电泳的分析范围更为广泛,从无机离子/有机酸,天然产物,酶,核酸到颗粒、细菌都可以进行分离分析。和对比正常人和患者的血、尿蛋白组/多肽组来实现的。常用的方法有2D、HPLC/MS和CE/MS等。然而2D方法需复杂的人工操作及染色过程,并且无法对分子量较小的多肽进行分离;HPLC/MS方法分析时间长,分离效率低,对亲水性的蛋白和多肽很难分离,另外色谱柱极容易被复杂的生物样品污染,柱的使用缩短,对样品毛细管电泳在蛋白质和多肽方面具有相当大的优势,凝胶电泳相比,毛细管电泳的蛋白分子量确定会更加准确,蛋白/多肽的等电点确定可以精确到0.01pH确的等电点确定方法。此外,毛细管电泳在肽、蛋白和糖白的鉴别;蛋白的结构分析,析的最佳,也是蛋白糖基化研究的有效。
1)得到4000多种多肽或蛋白。血、尿中的蛋白和多肽大多数是亲水性的,毛细管电泳方法对水溶性和极性物质的分离效果更好,而色谱的方法对水溶性及极性成分的分离是很的,毛细管电泳是更适合的分析;
分析速度快,毛细管电泳的分析时间通常是10-
清洁的分析方法,毛细管电泳分析中很少用到甲醇/乙腈等试剂,对仪器操作毛细管泳技术(CE)检测的标志物血红蛋白蛋白A1、Alc和其他异构体,对的具有指导价值。采用毛细管电泳方法一个样品糖化血红蛋白的分析过程仅需要4分钟,速度非常快,而且上样、分离及数据分析均为自动处理。毛细管电泳的方法和ESI-MS由于对HbA1C的定量准确,所以被FICC定为糖化血红蛋白测定的基准方法。通常来说,采用毛细管电泳方法测定血红蛋白50ul的全血加150ul的苹果酸溶液即可以上样分析。HbA1cRBC内葡萄糖有关,6~8周体内葡萄糖水平。此外,HbF增高所造成HbA1c假性升高作出解释。在酸性条件下电泳,HbA1a,HbA1bHbA1c下图为采用贝克曼库尔特公司的全自动毛细管电泳仪P/ACEMDQHbA1
is 应用毛细管电泳法鉴别患者血液中Hb的类型及含量对于贫血类型的临床诊断及治疗具有重大意义。HbA2β2轻型地中海贫血的一个重要特征,HbA2减低见于缺铁性贫血及其他Hb合成性疾病(常见如α2地中海贫血)。电泳发现异常Hb如HbC、HbD、HbE、HbKHbSHb分子病。在碱性条件下电泳,HbA2,HbAF等分离开来,下图为P/ACEMDQ及isHbA2试 目前核酸/核苷酸分析及分析大都采用毛细管电泳的方法,这是因为毛细管电泳与传统的平板凝胶电泳相比具有高分辨率,高速度,高自化的优势。100-2000bpDNAPCR扩增产物毛细管电泳可实现3-6bp的分辨率,远高于传统的平板凝胶电泳。在传统凝胶电泳上难以分离的DNA片断在毛细管电泳是可
对于100个碱基以下的单链核酸,毛细管电泳可以做到单碱基的分辨率,国际上的QC的标准方法。反义核酸药物的药物代谢动力学研究也是用毛细管电泳的方法来做的。最著名的
适合用于药(毒)物血药浓度和分析速度。下图显示的是盐酸克伦特罗(瘦肉精)在体存在不同时间下的浓度测定结ClenbuterolConc.3.01.51.00.5CESI-MSCESI-MS质谱是生物样品表征不可或缺的。如何提升质谱的灵敏度,降低离子抑制效应一直是人们关注的重点。BSiex公司推出了全新的质谱前分离和离子化系统CESI8000lus,将毛细管电泳(CE)的高效分离和超低流速的特性与电喷雾离子源(SI)完美结合,从而显著提升灵敏度,降低离子抑制效应,我们称这一无鞘液的、灵敏度的和MS联用技术为CEI-MS技术。CESI-MSESI-MS来说,流速越低,离子化效率越高,也越容易得到高的质谱灵敏度。研究结果显示:流速越低,质谱上的响应值越高,在CESI-MS(nL/min流速)上能够得到比传统LC-MS(mL~µL/min流速)更高的灵敏度结果。CESI-MS降低了离子抑制效应。流速越低,ESI的离子抑制效应越小,同时进样的不OptiMS1。OptiMSCESI8000PlusOptiMS技术。将分离离得到的分析物可以直接进入ESI离子化源,没有鞘液的稀释和干扰作用,能够保证分析方法(LC-MS)正交的分析结果。CESI8000Plus系统的OptiMS卡盒由分离毛细管,导电液输送毛细管,冷却液循环套管,电喷雾喷针保护装置等几部分组成。OptiMS卡盒带有保护装置,可以在、存储和使用过程中有效保护内部的毛细管。同时,采用即插用设计,安装和使用十分简单。2。OptiMS3。CESI8000PlusTripleTOFCESI-MS疾病标志物的发现是蛋白组学研究中的重要研究领域。CESI-MS用于疾病标志物的发现研究中的优势为:(1)灵敏度:CESI-MS具有比nanoLC-ESI-MS具有更高的灵敏度;结合富集技术,可进一步提高灵敏度;可分析低至几 个细胞中的蛋白组;(2)适合极性物质的分析:与nanoLC-ESI-MS互补,适于分析RPLC上无保留或无法洗脱的肽段;适合于分析蛋白质的翻译后修饰。(3)CESI-MS样品需要量少,结合微量样品瓶,最小样品需要量仅为1ul,可以实现珍贵的少量组织样本的分析。(4)可诊断多肽标记物。毛细管电泳方法克服了2D不宜分析低分子肽的缺点。 与MS 联用后可直接测定肽段的分子量,该方法已登于著名医学期柳叶刀Lancetoncology上,并已被德国汉诺威医学院建立为尿发现多肽诊断标志物的标准高速平台,该CE-MS标志物发现平台用于发现上皮细胞癌标志物。以电泳迁移时间为横的强度来进行对比,结合质谱鉴定来确认标志物。CE/MS
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