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文档简介

任务一、血液细胞检查任务一、血液细胞检查[实验目的与要求]1、掌握显微镜红细胞计数的原理和操作。1、掌握显微镜红细胞计数的原理和操作。2、掌握红细胞形态检查的方法、正常红细胞的形态特点、异常红细胞形态学变化。3、掌握显微镜白细胞计数的方法。4、掌握外周血白细胞分类计数的方法、各种白细胞的正常形态和病理形态学改变。[实验方法]1、学生分组:6-7人/组;1、学生分组:6-7人/组;2、教师通过ppt或操作示范等教学手段引导学生回顾血液细胞检查的相关基础知识;3、教师运用各种器材和试剂进行讲解、操作示范;4、学生分组进行操作练习;5、教师逐一指导、检查学生受训情况;6、教师总结学生受训情况。[实验条件要求]1、实验所需器材(设备1、实验所需器材(设备:显微镜、分光光度计。2、所需耗材:采血用具一套,试管、试管架、吸管2m、5m、0.5m胶吸头、干脱脂棉、玻璃棒、改良Neubauer计数板、盖玻片、绸布、香柏油、拭镜纸、清洁液(乙醚与无水乙醇比例3:7)3、试剂:1.0g,361.0ml0.6g100ml210g/L(或亚甲蓝瑞氏染液;(4)磷酸缓冲液(pH6.4~6.8)4、标本:EDTA抗凝静脉血或末梢血。[实验内容]2、操作要点讲解及示范:红细胞计数:准确稀释红细胞,充分冲池,计数计算。红细胞形态检查:血片的制作和染色。白细胞计数:准确稀释血液,充分冲池,计数计算。白细胞分类计数、白细胞形态:血涂片制备,染色,镜检。3、学生操作练习。4、教师总结学生操作情况。[实验评分]血液细胞检查评分标准血液细胞检查评分标准项目名称操作要求标准分扣分实得分准备白大衣穿戴整齐1分,教材、实验报告、中性笔等用品准备齐全(1分记本2分,检查并放置好相关实验物品1分)5计数准确加入红细胞稀释液2分;消毒皮肤,准确取血2分;擦去管尖外面多余的血液,插入稀释液底部,吸取其上清液清洗吸管;充入血细胞计数池内,注意充池的液量要适宜,使之恰好充满,无(5(2将血细胞计数板置于显微镜下,用低倍镜观察计数池内红细胞分布状况是否均匀2分,如红细胞分布均匀,即可用高倍镜进行计数(5分备用(2。20操作血涂片制备:取末梢血一滴,置于载玻片一端1分,将推片的一(2分30~45(2玻片的另一端,玻片上便留下一均匀的薄层血膜。自然干燥(1。红细胞染色:①用蜡笔在血膜两头划线,以防染液溢出1分;②用瑞氏形态检染液~50.~1mi2分;③滴加20查等量或稍多缓冲液于血膜上,用吸球将其吹匀,染色5~10min(2分或用滤纸吸干,即可镜检。镜检:在低倍镜下观察细胞着色情况,然后选择血涂片体尾部,在油镜下遵循数上不数下、数左不数右的原则,按一定的方向顺序观察红细胞形态。(5分)计数检查整体评价

(3分分2~3(65min,待红细胞完全溶解后,充入30清洁而干燥的计数池与盖玻片的缝隙中3分,静置2~3mi,使白细胞下沉(3分的白细胞数((9分洗干净,待干后备用。血涂片制备:取末梢血一滴,置于载玻片一端1分,将推片的一(2分30~45(2。自然干燥(1。染色:①用蜡笔在血膜两头划线,以防染液溢出1分;②用瑞氏染液~50.~1mi2分20等量或稍多缓冲液于血膜上,用吸球将其吹匀,染色5~10min(2分或用滤纸吸干,即可镜检。100200(5)1、实习态度端正,遵守实验室的规章制度(1分)2、动作规范,操作熟练(1分)53、正确进行红细胞、白细胞的计数及形态描述(2分)4、正确书写实验报告(1分)总 分 100任务二、尿液检查[实验目的与要求]任务二、尿液检查1、掌握尿蛋白定性磺基水杨酸法和加热乙酸法的原理和方法。1、掌握尿蛋白定性磺基水杨酸法和加热乙酸法的原理和方法。2、掌握尿葡萄糖班氏定性的原理和方法。3、掌握尿有形成分未染色显微镜检查法,S-M染色法尿有形成分显微镜检查的原理、染色后成分形态。4、掌握尿液干化学试带的反应原理和使用注意事项。5、掌握尿液干化学分析仪的使用方法。[实验方法]1、学生分组:6-7人/组;1、学生分组:6-7人/组;2、教师通过ppt或操作示范等教学手段引导学员回顾尿液检查的相关基础知识;3、教师运用各种器材和试剂进行讲解、操作示范;4、学生分组进行操作练习;5、教师逐一指导、检查学生受训情况;6、教师总结学生受训情况。[实验条件要求]1、实验所需器材(设备1、实验所需器材(设备:显微镜、尿液干化学分析仪。2、所需耗材:小试管、大试管、试管夹、试管架、吸管2ml、5m、10m吸耳球、pH小镊子、尿液有形成分定量计数板、一次性尿杯、单联和多联尿液干化学试带3、试剂:(1)200g/L磺基水杨酸溶液:20g磺基水杨酸溶于100ml蒸馏水中;(2)5%乙酸溶液:冰乙酸5ml,加蒸馏水至100ml,密闭保存;(3)S-M(3.0g0.8g95%V/V20.0ml水80.0ml中,冷藏保存:B液(沙黄0.25溶于95%V/V乙醇10.0m、蒸馏水100.0ml中)按397比例混合,过滤后储存于棕色瓶(室温可保存3个月,冷藏保存。4、标本:新鲜尿液盛尿液的容器必须清洁、干燥、透明,除三杯试验外,其余实验均要求留取中断尿。干化学试带应避光干燥保存,应该注意VitC[实验内容]1、相关基础知识回顾:1、相关基础知识回顾:(1)磺基水杨酸(磺柳酸)阳离子结合,形成不溶性蛋白盐沉淀。淀。此外,加酸还可溶解碱性盐类结晶。葡萄糖班氏法法)中蓝色的硫酸铜(二价)还原为黄色的氢氧化亚铜(一价)及红色的氧化亚铜(一价,出现黄色至砖红色沉淀物。干化学试带法原理,根据指示剂蛋白误差原理。即指示剂溴酚蓝在pH3.2与带阳离子的蛋白质如白蛋白结合,发生颜色反应,蛋白质浓度越高变色程度也越大。2、操作要点讲解及示范:造成假阳性,调pH。蛋白定性加热乙酸法:浑浊尿液应离心或过滤,排除生殖系统分泌物污染,陈旧尿液细菌生长可引起假阳性,操作过程遵循加热→加酸→再加热程序。尿葡萄糖班氏定性:鉴定试剂,试剂与尿液比例控制在10:1,维生素C可引起假阴性。尿有形成分未染色显微镜检查:新鲜尿液,防止女性生殖系统分泌物污染,显微镜观察遵循先低倍镜后高倍镜的原则,检查细胞观察10个高倍镜视野,检查管型观察10个低倍镜视野,显微镜光线要稍弱,注意形态相似有形成分之间的鉴别。(5)S-M染色法尿有形成分显微镜检查:染色时间适当。(6)尿液干化学试带法和尿液干化学分析仪的使用:熟悉试带特性,操作规范,干化学结果与湿化学结果综合分析。3、学生操作练习。4、教师总结学生操作情况。尿液检查评分标准项尿液检查评分标准项目名称操作要求标准分扣分实得分准备白大衣穿戴整齐1分,教材、实验报告、中性笔等用品准备齐全1分显微镜使用登记本2分,检查并放置好相关实验物品1分)5蛋白定性磺基水杨酸法蛋白定性加热乙酸法操作显微镜检查S-M染色法尿有形成分显微镜检查尿液干化学试带法和尿液干化学分析仪的使用整体评价

调pH在56范围内3分,试管2支,各加入清澈尿液1ml(2分2滴,轻轻混15匀,另一支试管不加试剂作空白对照1色背景下观察结果。12/31/3于酒精灯火焰上加15热,沸腾即止5%2~3至沸3分,立即观察结果,结果判断同磺柳酸法5分取班氏糖定性试剂1ml于试管中,加热煮沸2分,若不变色,则可加入尿液0.1m,再煮沸12分钟3分,冷却 10后观察(5。10ml,1500r/min0.2ml(20.02ml,滴在载玻片上(不离心尿1或加入尿液有形成分定量计数板内计数。先用低倍镜20(101)观察管型、上皮细胞及结晶3分镜10个低倍镜视野和10均值报告。制备尿沉渣,同上离心浓缩法5分,取0.2ml

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