维生素C不同的测定方法及各种方法优缺点比较

维生素C不同的测定方法及各种方法优缺点比较CC6-二氯靛酚滴定法、2，4-二硝基苯肼法、光度分析法、化学发光法、电化学分析法及色谱法等,各种方法对实际样品的测定均有满意的效果.VC或抗坏血酸和测定"为检索词对1994～2002年中国期刊网全文数据库(CNKI)ABC45.06％,65.69％,18.6312.75％;45.06％,60.92％,19.54％,10.34％.结论目前国内维生素CHPLC一．荧光法1．原理样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化成脱氢型抗坏血酸后，与邻苯二胺（OPDA）反应生成具有荧光的喹喔啉（quinoxaline）,其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓度在一定条件下成正比，以此测定食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。OPDA0.022g/ml。适用范围本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定注意事项C。清液过滤。故活性炭用量应适当与准确，所以，应用天平称量。我们的实验结果证明，用2g二、2，6-二氯靛酚滴定法（还原型VC）1、原理：二氯靛酚，该染料在酸性中呈红色，被还原后红2，6-二氯靛酚的量与样品中C2、注意事项⑴所有试剂的配制最好都用重蒸馏水；⑵滴定时，可同时吸二个样品。一个滴定，另一个作为观察颜色变化的参考；2%C；（Fe2+，要用8%的醋酸代2%使用醋酸可以避免这种情况的发生；⑸整个操作过程中要迅速，避免还原型抗坏血酸被氧化；⑹在处理各种样品时，如遇有泡沫产生，可加入数滴辛醇消除；⑺测定样液时，需做空白对照，样液滴定体积扣除空白体积。32,6—DCIP2,62,6—DCIP2,6—DICP2,6—DCIP立即被还原成无色，一旦溶液中的抗坏血酸全部被氧化时，则滴下微量过剩的2,6—DCIP2,6—DCIP标准溶液的消耗量(ml)，2,6—DCIP2,6—DCIP2,6—DCIP坏样品中还原型抗坏血酸后，再用2,6—DCIP滴定样品中其他还原物质。然后2,6—DCIP2,6—DCIP—DCIP2,6—DCIPpH1—3范围内，进行快速滴定，可以消除或减少其他还原物质的作用，2,6—DCIPDCIPPCMB)而得到消除。三、2，4-二硝基苯肼法1．原理抗坏血酸含量成正比，进行比色测定。2．适用范围本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定。VcV然后与2，4—二硝基苯肼作用，生成红色的脎，将脎溶于硫酸后进行比色。最近国标中该法强调空白，每个样品及标准系列均需作对应空白，这样消除色泽、Vc四碘量法1、维生素C的原理CCCC即为滴定终点。2、注意事项看到红棕色出现时要放慢滴定的速度。30sL-C)测定试剂盒（酶学方法1.应用于食品，饮料及生物制品检测比色方法此方法用于检测水果和蔬菜（如马铃薯，水果和蔬菜产品（如西红柿酱、泡菜、果酱、果汁葡萄酒，还有动物饲料，医药品（如维生素配制、阵痛药、退烧药）和生物样品L-C)，分析物L-抗坏血酸不定量的分布于动物和植物中。人类不能自身生产L-抗坏血酸，因此必须由外源(vitaminC)提供。一般情况下来源于水果和蔬菜中，出于技术原抗坏血酸的检测非常适用于从原始水果和蔬菜中加工食品的质量评定。L用于动物饲料添加剂中。原理L-抗坏血酸(x-H2)+MTT+PMS—>dehydroascorbate(x)+MTT-formazan+L-抗坏血酸+½O2 AAO——>dehydroascorbate+H2OX特异性在给定的条件下，此方法特别针对于L-抗坏血酸。合成的D-阿拉伯抗坏血酸/阿拉伯糖型抗坏血酸能作为抗氧化剂，也能反应，但反应速度较慢。灵敏度0.0051.600ml，0.1mg/lL-抗坏血酸浓度。0.0150.3mg/l1.600ml.。线性测定的线性范围为0.5ugL-（0.3mgL-抗坏血酸/l样品溶液体积为1.600ml）到20ugL-抗坏血酸（0.2gL-抗坏血酸/l样品溶液体积为0.100ml）精密度0.005-0.010准的相对偏差（变异系数）1-3%L-血酸的水溶液稳定性较差，尤其是重金属离子或氧存在时。干扰及错误来源粮食的成分不经常干扰实验。高浓度的酒精和D-ft梨酸醇能降低反应速度，大量的亚硫酸盐必须通过添加甲醛来去除。醋酸抑制酶AAO。金属和亚硫酸盐离子可以导致L-抗坏血酸的自发分解。试剂盒包括内容磷酸盐/柠檬酸缓冲液———— pH值大约3.5；MTTAAO（坑坏血酸-氧化酶）—— 每板约17UAAOPMS六．磷钼蓝分光光度法测定维生素CCCC，准确度和重复性均达到令人满意的程度。适用范围本标准适用于果品、蔬菜及其加工制品中还原型抗坏血酸的测定(不含二价铁、二价锡、一价铜、二氧化硫、亚硫酸盐或硫代硫酸盐),不适用于深色样品。测定原理染料2,6－二氯靛酚的颜色反应表现两种特性,一是取决于其氧化还原状态,氧化态为深蓝色,还原态变为无色;二是受其介质的酸度影响,在碱性溶液中呈深蓝色,在酸性介质中呈浅红色。用蓝色的碱性染料标准溶液,对含维生素C的酸性浸出液进行氧化还原滴定,染料被还原为无色,当到达滴定终点时,多余的染料在酸性介质中则表现为浅红色,由染料用量计算样品中还原型抗坏血酸的含量。七.二甲苯－二氯靛酚比色法12用定量的2,6－二氯靛酚染料与试样中的维生素C进行氧化还原反应,多余的染料在酸性环境中呈红色,用二甲苯萃取后比色,在一定范围内,吸光度与染料浓度呈线性相关,收剩余染料浓度用差减法计算维生素C含量。八.近红外漫反射光谱分析法(NIRDRSA)1965快等优点，逐渐受到分析界的重视。此法已广泛应用于石油、纺织、农业、食品、药物分析等领域[1，2]。在药物分析中，NIRDRSA量分析等工作。维生素C是一种不稳定的二烯醇化合物，其药典[3]含量测定方法为碘量C方法简便，结果可靠。C-H，O-H，N-H的特征振动信息。由于近红外光谱的谱带较宽，谱图重叠严重，不能用特征峰等简单方法分析，需要运用计算机技术与化学计量学方法。本实验应用的是偏最小二乘法(PLS)[4]，首先利用定标集建立预测模型，然后将预测集作为未知样本，根据预测模型进行预测。对所选择的谱区范围，采用对反射吸光度的MSC(散射校正)预处理，对个样品进行交叉验证，即选择一个样品，从校正集中除去该样品对应的光谱和1，循环迭代样品数和主成分数，计算预测残22.029，2，PLS九电位滴定法PtE池＝E+-E-+E液接电位＝EI2/I-+k(常数)原理(具体来说:)突变；引起电位的突变，因此由测量工作电池电动势的变化就能确定终点。计算式：(与碘量法相同)Wvc=C(I2)V(I2)M(vc)/m(vc)*100%优点：解决了滴定分析中遇到有色或浑浊溶液时无法指示终点的问题用线性电位滴定法分析抗坏血酸,抗坏血酸回收率为99.80％～101.5准偏差为0.61％;分析维生素C片中的抗坏血酸,相当标示量为98.90％～100.50.48％,说明线性电位滴定法分析维生素C抗坏血酸含量是可行的.十.分光光度法1. 原理：CpH>5,脱氢抗4－二硝基苯肼生成可溶于硫酸的脎脎在500nm波长有最大吸收VCVC原理：库仑滴定法属于恒电流库仑分析。（中的标准浓液）与待测物质定量作用，借助指示剂或电位法确定滴定终点。Q即： m=MQ/zF=MIt/zF3..化学反应：阴极反应：2H+2e-=H2阳极反应：2I-=I2+2e-终点指示：多种方法(1)化学指示剂－－I2(2)电位法(3)双铂极电流指示法计算式：Wvc=MvcQ/zFmF---（96487C）Z--100％优点：无需标准化的试剂溶液，免去了大量的标准物质的准备工作（配制，标定）只需要一个高质量的供电器，计时器，小铂丝电极，且易于实现自动化控制若电流维持一个定值，可大大缩短了电解时间电量容易控制及准确测量；方法灵敏度，准确度较高Cu＋,Br2,Cl2缺点(难点)：要求电解过程没有副反应和漏电现象，即使电解电极上只进行生成滴定剂的反应，且电流的效率是100％注：电流效率＝i÷i＝i÷（ii＋i）因为：实际电解过程中存在影响电流效率的因素，如，杂质，溶剂，电极自身在电极上的反应等）十二紫外快速测定法原理C2，6—C243nmC十三光电比浊法的原理原理在酸性介质中,抗坏铁酸与亚硒酸(H2SeO3)能定量地进行氧化还原反应.1mol2mol稳定的悬浊液.当抗铁酸的浓度在0-4mg/25-50ml的范围内,该溶液生成的浊度与抗坏铁酸的含量成正比.将试液置分光光度计上测其浊度可以定量地测定抗坏铁酸.十四荧光分析法的原理原理用酸洗活性炭将抗坏铁酸氧化为顺式脱氢抗坏铁酸,然后与邻苯二胺缩合成一种荧光性化合物.样品中其它荧光杂质的干扰可以通过向氧化后的样品中加入硼酸,使脱氢抗坏铁酸形成硼酸脱氢抗坏铁酸的络合物,它不与邻二苯胺生成荧光化合物.这样可以测定其它荧光杂质的空白荧光强度而加以校正十五原子吸收间接测定法原理VcVcCu2+定Cu+SCNCuSCNC化改善。十六．金纳米微粒分光光度法测定维生素C的方法５ｍＬ比色管中，依次加入０．１－２．０ｍＬ浓度为９５．６４μｇ／ｍＬ的↓［４］溶液，０．０２－０．５０ｍＬ０．００１－２．０ｍＬ浓度为０．３８ｍｇ／ｍＬ５２０ｎｍ处测定吸十七L-CL-CVCpH=10.0溶液中，VCL-VＣ度在1.0×10-