第十章体液电解质检验

第十章体液电解质检验授课内容:第一节概述电解质的生理功能二、电解质的测定方法及评价第二节血清钾钠测定第三节血清氯化物测定硝酸汞测定法二、硫氰酸汞比色法教学目标与要求：

掌握：1.钙平衡紊乱的分类及原理；2.钾平衡紊乱的分类及原理；3.钾钠氯测定的原理、影响因素及临床意义熟悉：1.钠平衡紊乱；2.电解质的生理功能；3.电解质平衡教学重点、难点与进展：

重点：钾钠氯测定的原理、影响因素及临床意义2.钾平衡紊乱的分类及原理难点：理解各种电解质紊乱的临床意义电解质质的生理功能1、维持体液渗透压和酸碱平衡2、维持肌肉、心肌的应激性3、维持细胞的正常新陈代谢4、其他电解质的测定方法1、火焰光度法2、化学试剂显色法3、滴定法4、电量分析法5、原子吸收分光光度法6、酶动力学法7、离子选择电极法硫氰酸汞比色法原理：血清氯化物的氯离子与未解离的硫氰酸汞溶液混合时，氯离子首先与汞结合形成难以解离的氯化汞，并释放相应的硫氰酸离子，此离子与试剂中的铁离子结合，生成红色的硫氰酸铁，其色泽与氯的含量呈正比。临床意义降低：1.异常丢失2.排除增多3.摄入不足增高：1.脱水2.排出减少3.其他脑脊液绿化物1.降低2.增加3.正常授课内容:第四节血清钙测定一、乙二胺四乙酸钠滴定法二、甲基麝香草酚蓝比色法第五节血清无机磷测定硫酸亚铁-磷钼酸比色法第六节血清铁及总铁结合力测定亚铁嗪比色法教学目标与要求：

掌握：1.EDTA滴定法测定血清钙；2.比色法测定血清钙；3.血清磷测定的原理及注意事项4.血清铁及总铁结合力的测定熟悉：1.血清磷测定的临床意义；2.血清钙测定的临床意义；3.血清铁测定的临床意义教学重点、难点

重点：1.比色法测定血清钙；2.血清磷测定的原理及注意事项难点：血清铁及总铁结合力的测定血清中的钙可分为扩散性钙和非扩散性钙两大类.前者约占60%,其中包括离子钙约45%以及与柠檬酸、磷酸等结合的复合钙约15%;非扩散性钙为蛋白结合钙,约占血钙的40%,其中包括清蛋白结合钙约32%和球蛋白结合钙约8%。离子钙是钙的生理活性形式,它直接影响神经肌肉的应激性和甲状旁腺释放甲状旁腺激素。血清钙的测定对患者是否存在高钙血症或低钙血症的诊断以及病因追查具有重要意义。血清钙测定的方法很多.(1)

滴定法(2)原子吸收法(3)离子选择电极法(4)比色法血清钙测定（滴定法）一、原理：在碱性溶液中，血清钙离子与钙红指示剂结合为可溶性复合物（In-Ca2+），溶液变成淡红色。EDTA-Na2对钙离子有更强的亲合力，能从复合物（In-Ca2+）中夺取钙离子形成配位物，使钙红指示剂重新游离，溶液变成蓝色。根据EDTA-Na2溶液滴定量计算血清钙的含量。二、试剂与器材1、钙标准液2、钙红指示剂3、氢氧化钾4、EDTA-Na25、器材：试管、试管架、移液管、滴管三、实践步骤P182四、计算P182五、参考范围：2.25～2.75mmol/L六、注意事项P182血清钙测定（比色法）钙离子（Ca2+）在碱性溶液中和邻甲酚酞络合酮（OCPC）形成紫色复合物，在577nm处有一个最大吸收峰，加入8-羟基喹啉消除镁和铁的干扰。在570/600nm读取吸光度，复合物显色强弱与血清钙浓度成正比。血清磷的水平亦相当稳定。它和钙一样，骨骼中的磷不断地与血浆中的磷进行交换以保持血浆磷水平的稳定。

磷钼酸比色法原理：在无蛋白血滤液中加入钼酸铵溶液，与无机磷结合生成磷钼酸，再以硫酸亚铁为还原剂，可将磷钼酸还原为蓝色的磷钼蓝。与同样处理的标准液比较，可求得血清无机磷的含量。【临床意义】血清磷增高

(1)甲状旁腺功能减退，因PTH分泌减少，肾小管对磷重吸收亢进。

(2)甲状腺机能亢进，可出现高血磷。

(3)维生素D中毒，出现高血钙同时有高血磷。因为维生素D亦可促进肾小管对磷的重吸收，也促进肠道对磷的吸收。

(4)垂体前叶机能亢进，如生长激素分泌过多，可使尿磷排泄减少，故肢端肥大症患者可出现高血磷。血清磷升高与否可作为肢端肥大症病情是否活动的指标。

(5)慢性肾功能不全，可有磷潴留而致高血磷。血清磷降低

(1)甲状旁腺机能亢进，使尿中磷排出量增加，导致血清磷减少。

(2)肠道吸收不良或维生素D缺乏，可引起血磷降低。

(3)肾小管重吸收功能缺陷，如范可尼综合征、肾小管性酸中毒等可出现血清磷降低。铁及总铁结合力测定总铁结合力(TIBC)是指血清中运铁蛋白所能结合的最大铁量。将过量铁标准液加到血清中，使之与未结合铁的运铁蛋白结合，多余的铁被轻质碳酸镁粉吸附除去，然后测定血清中总铁含量，即为总铁结合力。原理：血清中Fe3+与运铁蛋白结合成复合物，在酸性介质中Fe3+从复合物中解离出来，被还原剂还原成Fe2+，Fe2+与亚铁嗪直接作用生成紫红色复合物，与同样处理的铁标准液比较，即可求得血清铁含量。血清镁测定临床生化测定血清镁的比色法较多,主要有甲基麝香草酚蓝法、Calmagite染料法、二甲苯胺兰法近来报道的偶氮氯磷Ⅰ法血清镁测定（甲基麝香草酚蓝法）血清中镁、钙在碱性溶液中能与甲基麝香草酚蓝（MTB）染料结合，形成一种蓝紫色的复合物。此复合物在600nm波长处的吸光度与样本中的镁含量成正比。在试剂中加入EGTA可掩蔽钙离子的干扰。表面活性剂可防止蛋白干扰，以避免复合物吸收峰的偏移。【试剂】1．碱性缓冲液称取无水亚硫酸钠2g，叠氮钠100mg，甘氨酸750mg和乙二醇双（乙氨基乙基）四乙酸（EGTA）90mg于小烧杯中，加1mol/LNaOH溶液23ml，使其溶解后，转入100ml容量瓶中，加去离子水至刻度。2．MTB试剂精确取MTB(AR)20mg和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)0.6g于烧杯中，加1mol/L盐酸溶液10ml，使其溶解后转入100ml容量瓶中，加去离子水至刻度，混匀，置棕色瓶中保存。3．显色应用液临用前将上述1和2液等量混合即可。4．镁标准液（含镁1.0mmol/L即2.43mg/dl，钙2.5mmol/L,即10mg/dl）精确称取硫酸镁(MgSO4·7H2O)246.5mg于1000ml容量瓶中，加去离子水约50ml溶解。再精确称取经110℃干燥12h的碳酸钙250mg于小烧杯中，加去离子水40ml及1mol/L盐酸6ml，加温至60℃，使其溶解，冷却后转入上述容量瓶中，再加入叠氮钠1g，然后用去离子水加至刻度，混匀。贮存于塑料瓶中可长期保存。【操作步骤】加入物空白管标准管测定管血清－－0.10镁标准液－0.10－去离子水0.10－－显色剂4.04.04.0混匀，室温放置5min，于600nm波长处，以空白管调零，读取各管吸光度值。【注意事项】1．镁显色剂pH值11.7，否则试剂的灵敏度降低，故应予以校正。2．标本应避免溶血，因红细胞内含镁量为血浆的3倍，Hb＞7g/L时出现正干扰。3．不能采用含有枸橼酸盐、草酸盐、EDTA-Na2等能与镁结合的抗凝剂的血浆进行检测。4．EGTA是一个金属络合剂，在碱性条件下能络合钙而不是络合镁，但浓度过高也能络合镁，所以称量必须准确。5．所用器材要防止镁的污染。镁标准液中含有2.5mmol/L钙离子可防止EDTA对镁离子的络合。6．MTB溶液与碱性溶液分别置室温，至少可稳定6个月。7．所用试管应经稀盐酸处理及去离子水清洗、干燥。临床意义：（1）血清镁升高：可见于肾功能不全，特别是在少尿、无尿时期，由于肾清除功能降低，血浆及红细胞内酶含量均增高，可出现高镁血症。此外还可见于甲状腺功能低下、Addisan病、多发性骨髓瘤、严重脱水及用镁剂治疗过量时等情况。血镁增高可出现镁中毒症状，如深部腱反射消失、肌肉瘫软、心动