2013级临床呼吸道病毒

第二十五章

呼吸道病毒

呼吸道病毒(virusesassociatedwithrespiratoryinfections)是指一大类主要以呼吸道为传播途径,侵犯呼吸道粘膜上皮细胞,引起呼吸道局部感染或呼吸道以外组织器官病变的病毒。拒统计，90%以上的急性呼吸道感染由该类病毒引起。病毒科病毒种类所致呼吸道感染性疾病正粘病毒甲、乙、丙型流感病毒流行性感冒副粘病毒副流感病毒1～5型普通感冒、支气管炎等呼吸道合胞病毒婴儿支气管炎、支气管肺炎麻疹病毒麻疹腮腺炎病毒流行性腮腺炎亨德拉病毒脑炎、呼吸道感染尼帕病毒脑炎、呼吸道感染人偏肺病毒毛细支气管炎、肺炎、上呼吸道感染披膜病毒风疹病毒风疹、胎儿畸形或先天性风疹综合征小RNA病毒鼻病毒普通感冒、急性上呼吸道感染冠状病毒普通冠状病毒SARS冠状病毒普通感冒、急性上呼吸道感染SARS（严重急性呼吸道感染综合征）腺病毒腺病毒小儿肺炎主要的呼吸道病毒及其所致呼吸道感染性疾病

正粘病毒第一节正粘病毒（Orthomyxoviridae

）对人或某些动物细胞表面的粘蛋白有亲和性，有包膜，具有分节段RNA基因组的一类病毒。只有流行性感冒病毒（influenzavirus）一个种，包括人流感病毒和动物流感病毒。分为甲（A）、乙（B）、丙（C）三型，其中，甲型流感病毒是反复流行最为频繁和引起流感全球流行的重要病原体。

一、生物学性状（一）形态与结构多为球形，有时呈丝状或杆状,80～120nm，有包膜。

流感病毒的电镜照片核衣壳病毒分片段的RNA，结合有核蛋白（NP）以及与复制和转录有关的三种依赖RNA的RNA多聚酶蛋白。呈螺旋对称。包膜来自宿主细胞膜的外膜和病毒编码的基质蛋白（M蛋白）。刺突HA和NA。流感病毒的内部结构1．核心：核酸为分节段的单股负链RNA。甲、乙型流感病毒为8个节段，丙型为7个节段。基因组分节段的特点是流感病毒容易发生变异的主要原因。

2.核蛋白(nucleoprotein,NP)：

病毒的主要结构蛋白,构成病毒衣壳，呈螺旋对称。抗原结构稳定，很少发生变异，具有型特异性。节段编码多肽功能1PB2RNA聚合酶与RNA转录和复制有关2PB1同上3PA同上4HA1、2血凝素，识别吸附宿主细胞，为中和抗原，有亚型特异性5NP核蛋白，具有型特异性6NA神经氨酸酶，促进病毒释放，为非中和抗原，有亚型特异性7M1M2结构蛋白，与病毒组装、出芽、形态有关膜蛋白，形成膜通道，参与病毒复制8NS1、2非结构蛋白，解除宿主IFN防御系统，在病毒转录和感染过程中起作用3.包膜

内膜：基质蛋白（M蛋白），由病毒编码具有型特异性，抗体无中和能力。M1：病毒主要结构成分，与病毒包装、出芽和形态有关。M2:离子通道型嵌膜蛋白，参与病毒复制。外膜：双层类脂膜，它来自宿主细胞膜。

刺突血凝素

(Hemagglutinin,HA)神经氨酸酶（Neuraminidase,NA）

血凝素(HA)柱状，为三聚体，它基本上以相同的间距覆盖了病毒的全部表面。

凝集红细胞吸附宿主细胞抗原性:易发生变异,刺激机体产生中和抗体神经氨酸酶（NA）扁球形，四个亚单位组成的四聚体，并不平均分布在病毒表面。参与病毒释放促进病毒扩散抗原性:易发生变异,刺激机体产生非中和抗体流感病毒的表面结构HA0HA1：吸附HA2：膜融合蛋白水解酶12435678PB2PB1RNPRNAM2M1NAHA分节段的（-）ssRNAPA

RNA多聚酶核糖核蛋白（RNP）(NP)（二）分型与变异分型：按NP及MP抗原的不同，可分为甲、乙和丙三型。甲型流感病毒又根据其表面HA和NA抗原性的不同可分为若干亚型。

HA：16个亚型，人H1-3NA：9个亚型，人N1-2

禽流感H5N1、H7N2、H7N7、H9N2、H7N9等型亦可感染人。乙型、丙型至今未发现亚型。变异：甲型流感病毒的表面抗原HA、NA最易变异，二者可同时变异，也可分别发生。HA和NA的变异有两种形式：（1）抗原性漂移（antigenicdrift）：变异幅度小或连续变异，属于量变，即亚型内变异。是由病毒基因点突变和人群免疫力选择性降低引成，可引起小规模流行。（2）抗原性转变(antigenicshift)：变异幅度大，属于质变，病毒株表面的一种或两种抗原结构发生大幅度的变异，或者两种或两种以上病毒感染同一细胞时发生基因重组，形成与前次流行株抗原结构不同的新亚型，由于人群对变异株缺少免疫力而容易造成流感的大流行。

(三)培养特性

流感病毒可在鸡胚及培养细胞中增殖。初次分离常接种鸡胚羊膜腔，传代接种尿囊腔。易感动物为雪貂。组织培养一般用猴肾（PMK）、狗肾传代细胞（MDCK）等，但不引起明显CPE。（四）抵抗力

抵抗力较弱，不耐热，56℃30分钟即被灭活。室温下感染性很快消失；对干燥、日光、紫外线及乙醚、甲醛等敏感；酸性条件下更易灭活。-70℃或冷冻干燥后活性可长期保存。二、致病性与免疫性

*有季节性、地区性*甲型感染人类、禽、猪、马等，易变异，曾多次引起世界性大流行*乙型可感染人类和猪，常造成局部爆发流行*丙型只侵犯婴幼儿，很少流行致病性*传播途径：飞沫传播*传染源：患者、隐性感染者、被感染动物*机理在呼吸道柱状上皮增殖，不引起病毒血症毒素样物质进入血液，全身中毒症状*致病特点：发病率高、死亡率低*并发症：多见于婴幼儿、老人、慢性病患者原发性病毒性肺炎继发细菌性肺炎高致病性禽流感（Highlypathogenicavianinfluenza,HPAI）

*

sIgA抗体有阻断病毒感染的保护作用，存留几个月。

*抗HA特异性抗体为中和抗体，抗病毒感染、减轻病情，持续数月至数年。

*不同型别无交叉免疫。*特异性细胞免疫（CD4+T细胞、CD8+T细胞）免疫性三、微生物学检查法

（一）病毒的分离与鉴定

取急性期患者咽漱液或鼻咽拭子，接种鸡胚或培养细胞中。红细胞凝集、血凝抑制试验分型。（二）血清学诊断

血凝抑制（HI）试验：取病人急性期（发病3日内）和恢复期（发病2～4周）双份血清，恢复期血清的抗体效价是急性期的4倍或4倍以上，具有协助诊断意义。补体结合试验：MP、NP抗体，诊断新近感染（三）快速诊断间接或直接免疫荧光法、ELISA法测抗原核酸杂交、实时荧光定量PCR、序列分析检测核酸四、防治原则

一般措施：加强自身锻炼增强免疫力，流行期间应尽量避免人群聚集，公共场所应常通风换气，必要时空气消毒。

特异性方法：接种疫苗，必须与当前流行株的型别基本相同。灭活疫苗（包含甲1和甲3亚型和乙型病毒株的抗原）减毒活疫苗（一）预防（二）治疗金刚烷胺、达菲、帕拉米韦、中草药第二节副粘病毒

副粘病毒科与正粘病毒科的生物学性状相似，为单负链RNA病毒，150～300nm，核衣壳螺旋对称，有包膜，但包膜刺突与正粘病毒不同。副流感病毒parainfluenzavirus

腮腺炎病毒Mumpsvirus

麻疹病毒MeaslesVirus呼吸道合胞病毒RespiratorySyncytialVirus，RSV生物学性状正粘病毒副粘病毒形态大小有包膜，球状或丝状,直径80～120nm有包膜，球形,直径150～300nm核酸类型分节段单负RNA单负RNA，不分节段抗原变异高频率低频率血凝特点有有溶血作用无有包膜表面蛋白HA、NAHN蛋白（副流感病毒、腮腺炎病毒）HA蛋白（麻疹病毒）无HA和NA（呼吸道合胞病毒）鸡胚生长良好多数不佳正粘病毒与副粘病毒比较一．麻疹病毒（measlesvirus）

是引起麻疹的病原体。

致病性与免疫性：

传染源：麻疹患儿。传染性强、易感者接触后90%以上都发生麻疹。好发于6个月到5岁儿童。传播途径：病毒存在于鼻咽和眼分泌物中，通过飞沫或用具、玩具等传播。出疹前6天和出疹后3天都有传染性。麻疹：两次病毒血症脑脊髓炎（0.1%）亚急性硬化性全脑炎（SSPE）（百万分之一）：慢发病毒感染（急性病毒感染的迟发并发症）。

所致疾病微生物学检查法：病毒分离鉴定典型CPE(多核巨细胞、胞内和核内嗜酸性包涵体）2.血清学检查HI试验、CF试验、中和试验、间接荧光抗体法或ELISA法。免疫性：感染后可获得持久免疫力，一般不会出现二次感染。包括体液免疫和细胞免疫，细胞免疫起主要作用。

防治原则：六个月以内的婴儿有被动免疫力，但随年龄增长逐渐消失，易感性增加。8个月初次免疫，1年后及学龄前加强免疫，接种减毒活疫苗是预防麻疹的最好方法。给有接触麻疹患儿病史的体弱易感儿注射丙种球蛋白或恢复期人血清，有预防发病或减轻症状的作用。二．腮腺炎病毒(mumpsviras)引起流行性腮腺炎，也可侵犯其他组织,如睾丸、卵巢、脑组织等。只有一个血清型，感染后可获得牢固持久免疫力。皮下接种减毒活疫苗用于特异性预防。三．呼吸道合胞病毒（respiratorysyncyticalvirus，RSV）引起6个月以下婴幼儿细支气管炎和细支气管肺炎；较大儿童及成人表现为上呼吸道感染。流行于冬季、早春，传染性强。致病主要为免疫病理损伤，有特异性Ab（IgE）时，再次感染症状加重。只有一个血清型。来自母体的抗体不能防止新生儿感染，免疫力不强。四、副流感病毒（parainfluenzavirus）可引起各年龄组人的上呼吸道感染，尤其是婴幼儿及儿童严重呼吸道疾病。婴幼儿可自母体获得抗体，但无保护作用；自然产生的SIgA对再感染有保护作用，但不持久，可发生再感染。

第三节冠状病毒*冠状病毒科冠状病毒属*对人致病的主要有普通冠状病毒和SARS冠状病毒（SARS-CoV）*包膜表面有多形性花冠状突起而命名一、生物学性状1.形态与结构

呈不规则型,有包膜,包膜表面有刺突,形如花冠。结构核心：+ssRNA衣壳（N蛋白）：螺旋对称包膜S蛋白（spikeprotein）：刺突糖蛋白，为病毒主要抗原。功能是与细胞受体结合，使细胞发生融合，是冠状病毒侵染细胞的关键蛋白。M蛋白（membraneprotein）：为跨膜蛋白，参与包膜形成。E蛋白

2.培养

在原代细胞增殖,CPE初期不明显；SARS病毒可在Vero-E6细胞及FRhK-4细胞内增殖引起CPE。3.抵抗力对乙醚等脂溶剂敏感。不耐热或酸。普通消毒剂(如丙酮、10%甲醛及75%乙醇等）5min内可杀死病毒。普通冠状病毒感染在世界各地普遍存在，可感染各年龄组人群，引起普通感冒和咽喉炎，某些毒株可引起成人腹泻或胃肠炎。多为自限性疾病。主要经飞沫传播，冬春季流行。病后免疫力不强，可发生再次感染。无特异性防治措施。二、致病性与免疫性

SARS冠状病毒（SARSCov）

是严重急性呼吸综合征（severeacuterespiratorysyndrome，SARS）的病原体，SARS又称为传染性非典型肺炎。是我国法定传染病之一。

2003年4月16日WHO正式宣布SARS的病原体是一种新的冠状病毒，称为SARS冠状病毒，但并不是已知人或动物冠状病毒的突变株。传染源：主要是SARS患者传播途径：以近距离飞沫传播为主，亦可通过病人呼吸道分泌物经口、鼻和眼传播，不排除粪—口途径传播。有家庭和医院明显聚集现象。流行：冬、春季流行。所致疾病：引起SARS。人类对其无天然免疫力，普遍易感。潜伏期为2～10d，一般为4～5d。死亡率很高。免疫性：机体感染病毒后，可产生有中和保护作用的特异性抗体，同时亦有细胞免疫。但也可产生免疫病理损伤，引起免疫功能极度低下。三、微生物学检查法病毒分离与鉴定SARSCoV必须在生物安全三级（BSL-3）实验室进行采取咽拭子、痰液、气管分泌物等接种Vero-E6细胞分离培养病毒。2.核酸检测是SARS-Cov快速诊断最好的方法。RT-PCR或巢式PCR检测病毒核酸；实时定量PCR检测病毒拷贝数。3.血清学检查检测抗SARS-Cov的特异性抗体(IgM、IgG）一般患病12d检出率高，用于早期诊断困难。免疫荧光、ELISA、胶体金免疫分析等。四、防治原则隔离病人切断传播途径提高机体免疫力疫苗研制预防治疗：支持疗法中东呼吸综合征（MERS）由一种新型冠状病毒即MERS-CoV引起。2012年4月在沙特出现首例病例。截止2015年5月25日，全球累计实验室确诊的感染MERS-CoV病例（简称MERS）共1139例，其中431例死亡（病死率37.8%）。这些病例来自24个国家和地区，病例最多国家为沙特阿拉伯，病例多集中在沙特阿拉伯、阿联酋等中东地区，该地区以外国家的确诊