胰岛素也能口服澳洲WEHI分析所与礼来合作-发现稳定性高、能够激活胰岛素受体的胰岛素替代分子

胰岛素也能口服澳洲WEHI分析所与礼来合作_发现稳定性高、能够激活胰岛素受体的胰岛素替代分子在糖尿病分析领域，科学家长期致力于寻求一种能够替代胰岛素的分子，想要以此制造出口服的胰岛素药物，从而取代注射胰岛素。制备口服胰岛素的阻碍主要是由于胰岛素是一种典型的蛋白质，而动物的消化道内充斥着胃蛋白酶、胰蛋白酶、蛋白水解酶等各种酶类。因此经口服的胰岛素会在消化道内被消化吸收，完全起不到降糖的作用。“自从一百年前胰岛素被发现以来，开发胰岛素药丸一直是糖尿病分析人员的梦想，然而经过数十年的尝试，人们在该分析道路上一直收效甚微。”来自澳大利亚WEHI医学分析所（以下简称“WEHI”）的高级分析员NicholasKirk介绍道。不过，随着冷冻电子显微镜（cryoEM）的发展，对于胰岛素替代分子的分析或将得到显著加速。日前，在一项由WEHI的NicholasKirk与MichaelLawrence教授领导的最新分析中，分析团队使用冷冻电镜展示了一些胰岛素模拟分子作用于胰岛素受体的3D图像。该分析证实，使用胰岛素的替代分子可以激活胰岛素受体从而吸收葡萄糖，完全绕过了对于胰岛素的需求。该分析同时与美国制药公司礼来的部分分析人员合作，论文Activationofthehumaninsulinreceptorbynon-insulin-relatedpeptides已发布于NatureCommunications期刊。（来源：NatureCommunications）总体而言，该项分析通过图像精确地获知了胰岛素模拟分子如何激活胰岛素受体从而调节血糖水平，该进展为开发用于替代1型糖尿病患者的注射胰岛素药物开辟了新途径。一用“简单的分子”模拟胰岛素在人体代谢方面，人胰岛素受体（hIR）在调节葡萄糖稳态方面起到关键作用。人胰岛素受体属于受体酪氨酸激酶类，其能够由胰岛素、类胰岛素一号生长因子（IGF-I）、类胰岛素二号生长因子（IGF-II）等激活。长期以来，众多分析人员致力于寻找更多种能够激活胰岛素受体通路的分子。2002年，一项发布于MechanismsofSignalTransduction的论文表明，一些非胰岛素相关的肽家族在动物模型中既可以激活胰岛素受体通路，又可以降低血糖水平。这一发现为胰岛素替代药物的挖掘点燃了希望。早期的分析者将胰岛素和胰岛素受体之间的结合进一步拆解成为蛋白质之间的相互作用，并且针对胰岛素受体表面的关键作用位点展开探索。其中，一种特殊的融合肽（同时具有site1和site2结构）被认为是IR激动剂。然而，由于缺乏对该类融合肽如何结合并激活hIR实际构象的了解，分析人员很难对这些肽家族展开进一步的开发工作。在最新分析中，分析团队展示了两种IR激动剂，即IM459和IM172与胰岛素受体相互作用的高分辨率视图。基于单粒子冷冻电子显微镜图像表明，IM459能够将hIR结构域L1与hIR结构域FnIII-1'交联，而IM172的Site2组分（“IM172N22”）则能够与hIR胞外域复合。总之，这些数据阐明了开发可用于治疗糖尿病的新型hIR激动剂的途径。▲图丨胰岛素模拟分子（紫色）与部分胰岛素受体（灰色）相互作用的3D图像。一旦受体被激活，当身体的糖水平过高时，受体就会引导细胞吸收葡萄糖（来源：WEHI）具体到两种分子上看，对于IM459复合胰岛素受体的图像分析是基于肽和被称为hIR-Aecto的受体结合域构建图像。该图像中呈现出两个管状密度特征，夹在结构域L1和FnIII-1'之间。其中，首个管状密度特征经分析认为是IM459的site1组件，域FnIII-1'上的第二个管状密度特征被暂时解释为IM459的site2组件，其结构可能呈螺旋构象。▲图丨IM459结合hIR-Aecto的冷冻电镜图（来源：NatureCommunications）对于IM172而言，分析团队未能获得与其site2结构IM172N22复合的IR胞外域图像。不过，在将IM172N22绑定到与胰岛素和单克隆抗体83-7的可变结构域进行预复合后发现，其与IR上多个位点发生相互作用，并且与结构域FnIII-1的相互作用十分稳定，其螺旋二级结构保持完整。总体而言，这些分子能够与胰岛素受体相互作用，并将其保持在“活性”位置。“我们使用的肽能够成对地激活胰岛素受体，就像一只手将钳子夹在一起。”Kirk对此介绍道。从生化角度来看，IM459与IM172对于hIR的亲和力与生物合成的人胰岛素具有相当的水平，但它们的结构中包含能够降低蛋白水解敏感性的突变，这就使得其在稳定性方面具有优势。二多种1型糖尿病的简便疗法获得快速进展“事实证明，胰岛素与受体之间的相互作用比人们预测的要复杂得多，胰岛素及其受体在合作时会发生巨大的形状变化。”Kirk表示，“借助冷冻电镜，我们现在可以直接比较包括胰岛素在内的不同分子如何与胰岛素受体发生作用。”尽管该项分析成果距离落地转化与治疗还很遥远，但其发现或将为1型糖尿病口服药物的分析打开大门，从而减少糖尿病患者对注射的需求。多年以来，科学家始终致力于为1型糖尿病患者带来更加便捷的治疗方式。今年11月，澳大利亚政府向Garvan医学分析所提供了数亿美金，以支持1型糖尿病基因疗法分析。据悉，该项分析是全球首次将工程化胰岛细胞移植到人类体内以治疗1型糖尿病的临床试验，旨在通过GARV-AAV2-A20病毒递送系统，将制造A20的基因转运到供体胰岛细胞中，然后移植到患者体内以达到治疗目的。▲图丨胰腺β细胞产生调节血糖水平的胰岛素（来源：Garvan分析所）Garvan分析所移植免疫学实验室负责人、首席分析员ShaneGrey及其团队发现，一种名为A20的蛋白质参与自身免疫性疾病的发生，并对人体免疫系统具有调节作用。Grey教授因此指出，可以通过A20抑制机体免疫系统，从而阻止其对胰岛细胞的损害并治疗1型糖尿病。虽然该基因疗法有望减少患者对于胰岛素的依赖，然而移植的胰岛细胞的有效性通常会在五年内消退。此外，还需要免疫抑制剂来帮助减少排异的风险，但这会使患者容易受到严重的副作用，包括感染和肾脏损伤。除了基因疗法之外，通过药物延缓1型糖尿病的发作成为了另一种治疗策略。同样在11月，纳斯达克上市公司ProventionBioInc.（Nasdaq：PRVB，以下简称为“ProventionBio”）旗下药物TZIELD（teplizumab）获得了FDA批准，成为了首个也是唯一一个用于延缓儿童和成人1型糖尿病（T1D）病程的免疫调节剂。（来源：ProventionBio官网）TZIELD是一种靶向CD3的抗体药物，通过静脉内注射给药，可通过使已对胰腺β细胞发生自身反应的淋巴细胞失活来延缓T1DIII期症状的发作。据ProventionBio联合创始人兼首席执行官AshleighPalmer介绍，TZIELD是通过阻止自身免疫疾病过程和潜在的β细胞破坏，在症状出现之前延缓了疾病的发生。这种治疗实质上是重新启动免疫系统，保留了β细胞功能。根据官方资料，TZIELD注射液是无菌、无防腐剂、透明无色溶液，装在2mg/2mL（1mg/mL）单剂量小瓶中，应通过静脉输注（至少30分钟以上），每天一次，持续14天。目前，每瓶TZIELD的售价为13,850美元，14瓶的定价是193,900美元。显然，该价格令部分潜在患者望而生畏。近期，部分针对1型糖尿病的分析表明，同一疾病在不同患者之间存在疾病生理学的异质性。因此，患者将更加需要那些能够适应个性化方案的治疗策略，而口服用药或将成为其中一项有力的解决途径。相关分析者指出，“我们需要制定多种策略来针对血糖、血糖波动、低血糖并调整胰岛素剂量，这些策略可以根据1型患者的异质生理学和患者偏好进行调整。”参考资料：1./10.1038/s41467-022-33315-82./10.1074/jbc.M2021192003..a