2021版药典沉降菌检测操作规程

题目：洁净区（室）沉降菌监测标准操作规程编码：颁发部门：质量部起草：日期：2015年月日修订日期： 年月日审核：日期：2015年月日生效日期：2016年月日批准：日期：2015年月日发放份数：版次：第1版分发部门：质量部、中心化验室目的：论述干净室空气中沉降菌检测操作规程，保证药品质量，避免生产环境对产品的污染。范围：适用于本公司干净区（室）的沉降菌的监测。责任：沉降菌检测员。内容：大体概念：菌落:细菌培育后，由一个或几个细菌繁衍而形成的一细菌集落，简称CFU.通经常使用个数表示。沉降菌：用GB/T16292-2020提及的方式搜集空气中的活性微生物粒子，通过专门的培育基在适宜的生长条件下繁衍到可见的菌落数。沉降菌菌落数:规按时刻内每一个平板培育皿搜集到空气中沉降菌的数量，以个/皿表示。测试原理:本测试方式利用沉降法，即通过自然沉降原理搜集在空气中的生物粒子于培育基平皿，经假设干时刻，在适宜的条件下让其繁衍到可见的菌落数，以平板培育皿中的菌落数来评定干净环境内的活微生物数，并以此来评定干净区的干净度。测试方式：利用的仪器设备和培育基:高压消毒锅:利历时应严格依照操作规程进行。恒温培育箱:必需按期对培育箱的温度计进行检定。培育皿:一样采纳©90mmX15mm硼硅酸玻璃培育皿。利用前将培育皿置于121°C湿热灭菌20min。培育基:胰酪大豆胨琼脂培育基。将培育基加热熔化，冷却至约45°C在无菌操作条件下将培育基注入培育皿，每皿约15ml。待琼脂培育基凝固后，将培育基平皿放入32C恒温培育箱中培育72小时假设培育基平皿上确无菌落生长即可供采样用，制备好的培育基平皿应在2-8C的坏境中寄存。测试时刻:对单向流，如A级净化房间内及层流工作台，测试应在净化空调系统正常运行很多于10分钟后开始。对非单向流，如B级、C级、D级以上的净化房间，测试应在净化空调系统正常运行很多于30分钟开始。采样点数量及其布置:最少采样点数量:沉降菌的最少采样点数可按表1确信。在知足最少测点数的同时，不宜知足最少培育皿数，见表2表1最少采样点数量面积（m2）洁净度等级A、B级C级D级<102-322210-V20422±20-<40822±40-<1001642±100-<20040103注：表中的面积，对于单向流洁净室，指的是送风面积，对于非单向流洁净室,指的是房间面积。表2最少培育皿数洁净度等级所需©90mm培养皿数（以沉降4h计）A14除受干净区的设备限制外，取样点应在整个干净区均匀布置。在日常监控时，那些与产品相临近的区域，和可能与产品直接接触的空气及设备周围应考虑增加取样点和取样次数（与产品非接触区相较，这些区域应视为关键区）:人员活动频繁或人员较集中的区域也应视为关键区，需增强监控。取样点一股布置在趾离地面之间或操作平台的高度。取样时，取样没备会对气流产生干扰，取样时应幸免可能对气流组织的干扰。尽可能幸免在回风口周围取样（距离lm以上），且测试人员应在取样口的下风侧，并尽可能少走动。测试步骤：采样方式:用无菌容器（如不锈钢储槽）将预先培育的培育皿（无菌平皿）带至待测区，将培育皿掏出，放置在预先确信取样点，打开培育皿盖，使培育基表面暴露小时，再将培育皿盖上，盖后倒置。检测时记下培育皿打开的起始时刻和终止时间。培育：全数采样终止，将培育皿倒置于恒温培育箱中培育。32°C培育，时刻为72小时。每批培育基应有对如实验，检查培育大体身是不是污染，可每批选定三个培育皿做对照培育。菌落计数:用肉眼直接计数，然后用5-10倍放大镜检查，是不是有遗漏。假设培育皿上有2个或2个以上菌落重叠，可分辨时仍以2个或2个以上计数。注意事项：测试用具要做灭菌处置，以确保测试的靠得住性、正确性。采取一切方法避免人为对样本的污染。对培育基、培育条件及其他参数作详细的记录。由于细菌种类繁多，不同甚大，计数时一样用透射光于培育皿反面或正面认真观看，不要漏计培育皿边缘生长的菌落，必要时用显微镜辨别。采样前应认真检查每一个培育皿的质量，如发觉变质、破损或污染的应剔除。测试状态:沉降菌测试前，被测试干净区的温湿度须达到规定的要求，静压差必需操纵在规定值内。沉降菌测试前，被测试干净区己通过消毒。测试状态有静态和动态两种，在空调系统验流时、长期停产恢复活产前、设施设备大修复产前进行静态测试，在日常监测时进行动态监测。测试人员:测试人员必需穿着符合环境级别的工作服。静态测试时，室内测试人员不得多于2个人。结果计算:用计数方式得出各个培育皿的菌落数。平均菌落数的汁算见下式:计算公式：工MiM= n式中M为平均菌落数（CFU）Mi表示1,2,3,……n号平皿菌落数；n表示平皿总数。6．标准：洁净度级别沉降菌平均菌落数（CFU/皿）以4h计AV1B5C50D1007.结果评定:用平均菌落数判定干净室的空气中的微生物。干净区内的平均菌落数必需符合所选定的评定标准。假设某干净区的菌落数超过评定标准，那么必需对此区域先行消毒，然后从头测试两次，测试结果必需合格。8.误差纠正一旦发觉空气微生物监测结果超标，一样能够采取以