《DNA的粗提取与鉴定》试题库2

《DNA的粗提取与鉴定》试题库题组1一、提取DNA的方法1．提取生物大分子的基本思路(1)选用一定的________或________方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。(2)DNA的粗提取就是利用DNA与________、________和________等在物理或化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。2．提取DNA分子的基本原理(1)利用DNA的溶解性①DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，利用这一点，选择适当浓度的NaCl溶液就能使DNA溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离的目的。DNA与蛋白质在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同。溶解规律2mol/LNaClmol/LNaClDNA在NaCl溶液中，浓度为________mol/L时溶解度________溶解析出蛋白质NaCl浓度从2mol/L降低过程中，溶解度逐渐增大部分发生盐析溶解由上表可以看出，在NaCl为2mol/L时DNA________，而部分蛋白质发生盐析而生成________，通过过滤可除去部分________；NaCl为mol/L时DNA________，过滤可除去溶解的部分________。②DNA不____酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则____酒精。利用这一原理，可将DNA与蛋白质进一步分离。(2)利用DNA和蛋白质对酶、________和________的耐受性不同①蛋白酶能水解蛋白质，但对________没有影响。②大多数蛋白质不能忍受________的高温，而DNA在80℃以上才会变性。③洗涤剂能够溶解________，但对________没有影响。(3)DNA的鉴定：DNA在沸水浴的条件下，遇________会染成________。二、提取DNA及鉴定DNA的实验流程1．实验材料的选取实验材料的选择原则是选用________含量高的生物组织。有些材料不宜选用，如有些哺乳动物的成熟红细胞无细胞核，无法提取DNA。实验中一般选用________或________作为实验材料。2．破碎细胞，获取含DNA的滤液(1)动物细胞一般采用____________破碎的方法。(2)植物细胞需要先用__________溶解细胞膜，再加入一定量________，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集________。归纳总结动、植物细胞在获取DNA滤液方面的比较原理方法动物细胞(鸡血细胞)在低渗溶液中会吸水涨破在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液植物细胞(洋葱)洗涤剂能够溶解细胞膜在切碎的洋葱中加入一定量的洗涤剂和食盐，充分搅拌和研磨，过滤后收集研磨液3.去除滤液中的杂质释放出的核物质是DNA、RNA和蛋白质等的混合物，根据不同的方案，可采用以下三种去除滤液中杂质的方案。原理方法方案一DNA在不同浓度的________溶液中溶解度不同①在滤液中加入NaCl，使其溶液浓度为2mol/L，过滤除去不溶的杂质②调节滤液中的NaCl溶液浓度为mol/L，析出DNA，过滤去除溶液中溶解的杂质方案二DNA对酶的耐受性直接在滤液中加入________，____________中的________________能够分解蛋白质，反应10～15min方案三DNA对高温的耐受性将滤液放在________的恒温水浴箱中保温10～15min，注意严格控制温度范围，使______沉淀，而________分子还未变性，可以将DNA与蛋白质分开的析出(1)原理：DNA不溶于________，但细胞中的某些蛋白质则能溶于酒精。(2)方法①将过滤得到的含DNA的黏稠物溶于________的NaCl溶液，再过滤得到含DNA的滤液。②向滤液中加入与滤液体积相等的、冷却的、体积分数为______的酒精溶液，静置2～3min，溶液中会出现________丝状物，它就是粗提取的DNA。③用玻璃棒沿同一方向搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸去上面的水分。(3)目的①析出DNA；②去除溶于酒精的杂质。5．DNA的鉴定(1)鉴定原理：DNA＋________eq\o(→,\s\up7(),\s\do5(5min))________(2)步骤项目两支20mL的试管1号2号实验步骤加入2mol/L的NaCl溶液5mL5mL加入丝状物(DNA)√用玻璃棒搅拌________溶解加入二苯胺试剂4mL4mL沸水浴加热5min5min观察现象________变蓝提醒(1)甲基绿可将DNA染成绿色，且不需水浴加热。二苯胺鉴定DNA属于颜色反应，需要水浴加热5min，可使DNA呈蓝色。(2)二苯胺试剂要现配现用，否则二苯胺会变成浅蓝色，影响鉴定效果。6．对实验结果作出分析与评价(1)鉴别提取的DNA观察你提取的DNA颜色，如果不是________________，说明DNA中的杂质较多；二苯胺鉴定出现蓝色说明实验基本成功，如果不呈现________，可能所提取的DNA含量低，或是实验操作中出现错误，需要重新提取。(2)分析DNA中的杂质本实验提取的DNA粗制品有可能仍然含有核蛋白、多糖等杂质。(3)不同实验方法的比较对于不同的实验方法，本课题可以采用分组的方法进行研究。首先选取不同的实验材料，其次同种材料还可以采用不同方法，从多方面比较实验结果，如DNA的纯度、DNA的颜色、二苯胺显色的深浅等，看看哪种实验材料、哪种提取方法的效果更好。1．DNA的粗提取与鉴定实验，与下列哪项原理无关()A．DNA在mol/L的NaCl溶液中，溶解度最低B．DNA易被龙胆紫溶液染成紫色C．DNA溶液中加入二苯胺试剂，加热后产生蓝色D．加入95%的冷酒精，DNA会从溶液中析出2．下列图示中能正确反映DNA溶解度与NaCl溶液浓度之间关系的是()知识点二DNA的提取流程3．下图为“DNA的粗提取与鉴定”实验装置：(1)实验材料选用鸡血细胞液，而不用鸡全血，主要原因是鸡血细胞液中有较高含量的____________。(2)在图A所示的实验步骤中加蒸馏水的目的是________，通过图B所示的步骤取得滤液，再在溶液中加入2mol/L的NaCl溶液的目的是___________________________________；图C所示实验步骤中加蒸馏水的目的是________。4．将粗提取的DNA丝状物分别加入mol/LNaCl溶液、2mol/LNaCl溶液、体积分数为95%的酒精溶液中，然后用放有纱布的漏斗过滤，分别得到滤液P、Q、R以及存留在纱布上的黏稠物p、q、r，其中由于含DNA少可以丢弃的是()A．P、Q、R B．p、q、r C．P、q、R D．p、Q、r1．从鸡血细胞液中提取DNA所用的提取液是()A．NaCl溶液 B．酒精C．二苯胺 D．柠檬酸钠2．去除DNA杂质时，可直接在滤液中加入__________，反应10～15min()A．嫩肉粉 B．蒸馏水C．2mol·L－1NaCl溶液 D．酒精3．在“DNA的粗提取与鉴定”实验过程中，有两次DNA沉淀析出，其依据的原理是()①DNA在物质的量浓度为mol/L的NaCl溶液中溶解度最低②DNA在冷却的体积分数为95%的酒精中能沉淀析出A．两次都是①B．两次都是②C．第一次是①，第二次是②D．第一次是②，第二次是①4．在DNA的粗提取实验过程中，对DNA提取量影响较小的是()A．使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂，释放出DNA等核物质B．搅拌时要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动C．在析出DNA黏稠物时，要缓缓加入蒸馏水，直至黏稠物不再增多D．要用冷酒精沉淀DNA，甚至可将混合液再放入冰箱中冷却5．蛋白酶能使蛋白质水解而使染色质中的DNA分离出来，下列药品可达到上述同一目的的是()A．蒸馏水 B．NaCl溶液C．NaOH溶液 D．盐酸6．在采用鸡血为材料对DNA进行粗提取的实验中，若需进一步提取含杂质较少的DNA，可以依据的原理是()A．在物质的量浓度为mol/LNaCl溶液中DNA的溶解度最小B．DNA遇二苯胺在沸水浴的条件下会染成蓝色C．DNA不溶于酒精而细胞中的一些物质易溶于酒精D．质量浓度为0.1g/mL的柠檬酸钠溶液具有抗凝血作用7．若选择的实验材料为植物细胞，破碎细胞时要加入一定量的洗涤剂和食盐。加入食盐的目的是()A．有利于DNA的溶解B．分离DNA和蛋白质C．溶解细胞膜D．溶解蛋白质8．向溶解DNA的NaCl溶液中不断加入蒸馏水的目的是()A．加快溶解DNA的速度B．加快溶解杂质的速度C．降低DNA的溶解度，加快DNA的析出D．降低杂质的溶解度，加快杂质的析出9．在“DNA的粗提取与鉴定”实验中，为得到含DNA的黏稠物，某同学进行了如下操作，最后所得含DNA的黏稠物极少，导致下一步实验无法进行。请指出该同学实验操作上的错误并改正。①在新鲜鸡血中加入适量的柠檬酸钠，经离心后，除去血浆，留下血细胞备用。②取5～10mL血细胞放入50mL的塑料烧杯中，并立即注入20mLmol/L的氯化钠溶液，快速搅拌5min后经滤纸过滤，取得其滤液。③向滤液中加入40mL2mol/L的氯化钠溶液，并用玻璃棒沿一个方向快速搅拌1min。④向上述溶液中缓缓加入蒸馏水，同时用玻璃棒沿一个方向不停地边轻轻搅拌边加入蒸馏水，直到溶液中出现丝状物为止，再进行过滤得含DNA的黏稠物。实验结果：所得含DNA的黏稠物极少，导致下一步实验无法进行。(1)请指出并改正上述实验操作中的错误：___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)要进一步提取DNA时，需加入冷却的酒精，其作用是____________和__________________。(3)由于鸡血较难找到，某同学试图用人血代替，结果没有成功，其原因最可能是_____________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)鉴定实验中所得到的丝状物的主要成分为DNA，可滴加________试剂，沸水浴，如果出现________现象，则该丝状物的主要成分为DNA。10．实验中对DNA进行鉴定时，做如下操作：试管序号AB1加2mol/L的NaCl溶液5mL加2mol/L的NaCl溶液5mL2不加加入提取的DNA丝状物并搅拌3加4mL二苯胺，混匀加4mL二苯胺，混匀4沸水浴5分钟沸水浴5分钟实现现象实验结论(1)根据上图，完成表格空白处的实验内容。(2)对于B试管，完成1、2、3的操作后溶液颜色如何？________________________________________________________________________。(3)在沸水浴中加热的目的是_______________________________________________，同时说明DNA对高温有较强的__________。(4)A试管在实验中的作用是__________。(5)B试管中溶液颜色的变化程度主要与________________________________有关。第16课时DNA的粗提取与鉴定知识清单一、1.(1)物理化学(2)RNA蛋白质脂质2．(1)①最小溶解沉淀蛋白质析出蛋白质②溶于溶于(2)高温洗涤剂①DNA②60～80℃③细胞膜DNA(3)二苯胺蓝色二、鸡血菜花2．(1)加蒸馏水(2)洗涤剂食盐研磨液3．NaCl嫩肉粉嫩肉粉木瓜蛋白酶60～75℃蛋白质DNA4．(1)酒精(2)2mol/L②95%白色5．(1)二苯胺沸水浴蓝色(2)丝状物不变蓝6．(1)白色丝状物蓝色对点训练1．B[DNA在mol/L的NaCl溶液中溶解度最低。DNA鉴定选用的试剂为二苯胺试剂，加热后(沸水浴)产生蓝色。加入95%的冷却的酒精，由于DNA不溶于酒精，DNA会从溶液中析出。]规律链接“DNA粗提取与鉴定”实验材料选用鸡血细胞液，而不是鸡全血，主要原因是DNA主要贮存于细胞核内，而不在血浆内，使用鸡血细胞液提高材料中的细胞数量和DNA含量，从而可以保证实验能提取到足够的DNA。2．C[在mol/L的NaCl溶液中DNA的溶解度最小。]3．(1)DNA(2)使血细胞破裂使滤液中的DNA溶于浓NaCl溶液使DNA析出解析题图A、B、C所示为本实验的三个关键步骤。图A通过添加蒸馏水，血细胞与蒸馏水相混合而使血细胞处于极度低渗的环境之中，细胞因大量吸水而最终破裂。图B通过纱布过滤使血细胞释放出的DNA滤入收集的滤液中(将大量胶状物滤出)，再在滤液中加入2mol/L的NaCl溶液使DNA的溶解度增加。DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，如在mol/L的NaCl溶液中溶解度只有水中的1%，而在1mol/L的NaCl溶液中的溶解度为水中的2倍。即使DNA溶于NaCl溶液，图C在DNA浓盐溶液中加入蒸馏水(大量)，可使溶液的NaCl浓度降至较低，由于DNA在较低浓度的NaCl溶液中溶解度很低(在mol/L的NaCl溶液中溶解度最低，浓度再变小则DNA溶解度将增大)，使DNA低渗析出，经过滤等手段可以收集到DNA。规律链接1．DNA粗提取与鉴定实验中的数字总结(1)1次加入酒精：提取含杂质较少的DNADNA不溶于酒精，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。在含DNA的溶液中加入冷却的体积分数为95%的酒精，其目的是为了提取含杂质较少的DNA。(2)2次加入蒸馏水：目的不同第一次向鸡血细胞液中加入蒸馏水，是为了得到浓度低于血细胞内部浓度的溶液。这样水分子会大量渗入血细胞中，使血细胞吸水涨破而释放DNA。第二次向2mol/LNaCl溶液中加入蒸馏水，是为了使NaCl溶液的浓度降低到mol/L，从而使DNA分子从NaCl溶液中析出。(3)3次过滤：DNA存在的部分及所用的纱布层数不同第一次过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液，是为了得到含DNA的滤液，使用的纱布为1～2层。第二次过滤含有黏稠物的NaCl溶液，是为了得到从低浓度的NaCl溶液中析出的附着在纱布上的含DNA的黏稠物，所用的纱布为多层。第三次过滤溶解有DNA的NaCl溶液，目的是为了使DNA再溶解，所以只要用两层纱布即可。(4)4次调整NaCl溶液的浓度：目的不同、使用的NaCl溶液的浓度不同第一次在含DNA的滤液中，加入NaCl，调整NaCl溶液的物质的量浓度为2mol/L，必须充分混合均匀。目的是加速染色质中DNA与蛋白质的分离，使DNA充分游离并溶解在NaCl溶液中。第二次调整NaCl溶液的物质的量浓度为mol/L，此时DNA的溶解度最小，目的是析出DNA。第三次调整NaCl溶液的物质的量浓度为2mol/L，目的是使DNA再次溶解。第四次调整NaCl溶液的物质的量浓度为mol/L(或2mol/L)，目的还是为了溶解DNA。(5)6次用玻璃棒搅拌：目的不同第一次搅拌加蒸馏水的鸡血细胞液，目的是加速鸡血细胞的破裂。第二次搅拌2mol/L含DNA的NaCl溶液，目的是加速DNA的溶解。第三次搅拌加蒸馏水的NaCl溶液，目的是均匀稀释NaCl溶液至mol/L，以析出更多的DNA。第四次搅拌含DNA的2mol/L的NaCl溶液，目的是加速DNA的溶解。第五次搅拌体积分数为95%的含DNA的酒精，目的是提取含杂质较少的DNA。第六次搅拌mol/L(或2mol/L)含DNA的NaCl溶液，目的还是加速DNA的溶解。2．该实验成功的关键(1)破碎细胞应彻底充分。(2)对提取的含杂质较多的DNA进行提纯时，所用的酒精必须经过充分预冷后才能使用。(3)实验过程中，搅拌时玻璃棒不能直插烧杯底部，并且搅拌要轻缓，以便获得较完整的DNA分子。(4)由于玻璃表面带电荷，DNA中的磷酸基也带电荷而被吸附于玻璃表面，故实验中应尽量不使用或少使用玻璃器皿，这样可以提取到较多的DNA。(5)常温下，二苯胺试剂要现配现用，否则会影响鉴定的效果。4．C[DNA在mol/LNaCl溶液中溶解度最小，过滤后DNA在黏稠物p中，可以丢弃P；DNA在2mol/LNaCl溶液中溶解过滤后，DNA在滤液中，可以丢弃q；DNA不溶于体积分数为95%的酒精溶液，所以过滤后DNA在黏稠物r中，可以丢弃R。]联想DNA在mol/LNaCl溶液中溶解度最小，在高于或低于mol/L的NaCl溶液中溶解度变大，DNA不溶于酒精，但蛋白质能溶于酒精，所以用酒精溶液可以除去DNA中的部分蛋白质杂质。达标测试1．A[本题考查各试剂在“DNA的粗提取与鉴定”实验中的作用。NaCl溶液：溶解、析出DNA；酒精：溶解蛋白质，提纯DNA；二苯胺：鉴定DNA；柠檬酸钠：防止血液凝固。]2．A[嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能分解蛋白质。]3．C[考查DNA粗提取的原理，DNA的第一次析出是利用DNA的溶解度在mol/LNaCl溶液中最小而沉淀析出的。第二次析出是利用DNA不溶于冷却的95%的酒精，而蛋白质等杂质可溶解于冷却的95%的酒精这一原理，达到对第一次析出的DNA进一步分离提纯的目的。]4．B[A项的做法是为了充分释放出核中的DNA分子，使进入滤液中的DNA量尽量的多；C项是让DNA充分沉淀，保证DNA的量；D项的道理同C项；而B项的操作并不能使DNA增多或减少。]5．B[染色质中的主要成分是DNA和蛋白质，我们可以利用蛋白酶水解杂质蛋白质，从而使提取的DNA与蛋白质分开。也可以利用DNA在NaCl溶液中的溶解度不同，DNA在2mol/LNaCl溶液中溶解度高，而蛋白质不能溶解，通过过滤可除去不能溶解的杂质蛋白质，由此可看出两种方法虽然原理不同，但目的是一样的。]6．C[考查DNA粗提取实验中各药品的作用，DNA粗提取的原理有：DNA在mol/L的NaCl溶液中溶解度最小和DNA不溶于95%的冷酒精。进一步提取含杂质较少的DNA时用后者。B项用于DNA鉴定，D项中柠檬酸钠防止血液凝固。]7．A[在解答本题时，不少同学会受“加入一定量的洗涤剂和食盐”的干扰，做出错误的判断，误选C，而忽略本题所考查的是食盐的作用。]8．C[DNA分子在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，调节NaCl溶液的浓度可以使DNA溶解或析出，因此向溶解DNA的NaCl溶液中不断加入蒸馏水的目的是降低DNA的溶解度，加快DNA的析出。]9．(1)②中“20mLmol/L氯化钠溶液”错误，应改为“20mL蒸馏水”；②中“经滤纸过滤”错误，应改为“经纱布过滤”；④中“直到溶液中出现丝状物为止”错误，应改为“直到溶液中丝状物不再增加时为止”(2)凝集DNA溶解其他物质(3)人血成熟红细胞中没有细胞核(4)二苯胺蓝色10．(1)溶液不变蓝色溶液逐渐变蓝色DNA在沸水浴的情况下遇二苯胺会被染成蓝色(2)溶液颜色基本不变(不呈浅蓝色)(3)加快颜色反应速度耐受性(4)对照(5)加入试管中的DNA(丝状物)的多少解析本题主要考查DNA分子的鉴定。A、B两试管形成对照，B试管中含DNA丝状物，A试管中不含，起对照作用，其他条件均完全相同。本实验强调反应条件是沸水浴加热5min，这样可加快颜色反应的速度，观察对比两试管的颜色时要等到冷却以后。题组21．在采用鸡血材料对DNA进行粗提取的实验中，若需进一步提取杂质较少的DNA，可依据的原理是()A．在物质的量浓度为mol/L的NaCl溶液中DNA的溶解度最小B．DNA遇二苯胺在沸水浴的条件下会染成蓝色C．DNA不溶于酒精而细胞中的一些物质易溶于酒精D．质量浓度为0.1解析：对DNA进一步提纯应用的原理是DNA不溶于冷酒精中，而蛋白质等物质易溶于酒精，从而使DNA与杂质分离。答案：C2．在研究DNA的样本前，采集来的血样需要用蛋白水解酶处理，然后用有机溶剂处理除去蛋白质，用蛋白水解酶处理血样的目的是()A．除去血浆中的蛋白质B．除去染色体上的蛋白质C．除去血细胞表面的蛋白质D．除去血细胞中所有蛋白质，使DNA释放后提纯解析：蛋白酶能催化蛋白质这一类物质的水解，用蛋白酶处理血样，能去除血细胞中所有蛋白质。答案：D3．DNA的粗提取中，加入与滤液体积相等的、冷却的A溶液，静置2～3min，溶液中会出现白色丝状物。上面的A溶液是指()A．%的NaCl溶液B．mol/L的NaCl溶液C．质量分数为15%的HClD．体积分数为95%的酒精溶液解析：DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质却溶于酒精溶液，故滤液与体积分数为95%的冷却的酒精溶液混合后，就会得到白色丝状物。答案：D4．洗涤剂对DNA没有影响，但能够溶解()A．细胞壁 B．细胞膜C．细胞核 D．细胞质解析：洗涤剂能够溶解细胞膜，有利于DNA的释放，但对DNA没有影响。答案：B5．下列操作中，对DNA的提取量影响较小的是()A．使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂，放出DNA等核物质B．搅拌时，要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅拌C．在析出DNA黏稠物时，要缓缓加蒸馏水，直至溶液中黏稠物不再增加D．用酒精沉淀DNA时，要使用冷酒精，甚至再将混合液放入冰箱中冷却解析：在B项所述的操作中，可以保证DNA分子的完整性，但不影响提取量。答案：B6.对“DNA的粗提取和鉴定”实验的叙述，正确的是()A．利用DNA能溶于酒精溶液，而蛋白质不溶于酒精溶液，可将DNA与蛋白质分离B．利用高温能使蛋白质变性，却对DNA没有影响的特性，可将DNA与蛋白质分离C．在溶有DNA的2mol/L氯化钠溶液中缓缓加入蒸馏水，轻轻搅拌后过滤，取滤液进行以后的实验D．在DNA滤液中加入嫩肉粉，通过木瓜蛋白酶的作用，可将DNA与蛋白质分离解析：利用DNA不溶于酒精溶液，蛋白质溶于酒精溶液的特点，可将DNA与蛋白质分离；高温能使蛋白质、DNA变性，蛋白质在60～80℃可变性，而DNA在80℃以上才变性，所以高温对DNA有影响；在溶有DNA的2mol/L氯化钠溶液中缓缓加入蒸馏水，轻轻搅拌后过滤，得到DNA黏稠物，用来进行以后的实验；在DNA滤液中加入嫩肉粉，通过木瓜蛋白酶的专一性作用，可将DNA与蛋白质分离。答案：D7．(10分)下图是“DNA粗提取与鉴定”相关实验步骤，请据图分析回答：(1从鸡血细胞中释放出核物质的处理方法是________________________。(2)图a表示释放核物质后进行过滤的过程，过滤后取________________________进行下一步实验。(3)图b表示的相关操作过程中，加入2mol/LNaCl溶液的作用是__________________。(4)图c表示在滤液中加入冷却的体积分数为95%的酒精，其目的是_______________。解析：图a表示释放核物质后进行过滤的过程，上面的过滤物主要是细胞膜、核膜的碎片等杂质，而DNA存在于下面的滤液中，所以过滤后应取滤液。DNA不溶于冷却的酒精，而其他一些物质可以，从而可进一步提纯DNA。答案：(1)向鸡血细胞中加入蒸馏水，并搅拌(2)滤液(3)溶解DNA分子(4)提取杂质更少的DNA(或去除脂溶性杂质)8．(16分)(2010·江苏高考)某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动，具体步骤如下：材料处理：称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份，每份10g剪碎后分成两组，一组置于20℃、另一组置于－20℃条件下保存24h。DNA粗提取：第一步：将上述材料分别放入研钵中，各加入15mL研磨液，充分研磨。用两层纱布过滤，取滤液备用。第二步：先向6只小烧杯中分别注入10mL滤液，再加入20mL体积分数为95%的冷酒精溶液，然后用玻璃棒缓缓地沿一个方向搅拌，使絮状物缠绕在玻璃棒上。第三步：取6支试管，分别加入等量的2mol/LNaCl溶液溶解上述絮状物。DNA检测：在上述试管中各加入4mL二苯胺试剂，混合均匀后，置于沸水中加热5min，待试管冷却后比较溶液的颜色深浅，结果如下表。材料保存温度花菜辣椒蒜黄20℃＋＋＋＋＋＋－20℃＋＋＋＋＋＋＋＋＋注：“＋”越多表示蓝色越深。分析上述实验过程，回答下列问题：(1)该探究性实验的课题名称是______________________________________________。(2)第二步中“缓缓地”搅拌，这是为了减少__________________________________。(3)根据实验结果，得出结论并分析①结论1：与20℃相比，相同实验材料在－20℃条件下保存，DNA的提取量较多。结论2：__________________________________________________________________。②针对结论1，请提出合理的解释：_________________________________________。(4)氯仿密度大于水，能使蛋白质变性沉淀，与水和DNA均不相溶，且对DNA影响极小。为了进一步提高DNA纯度，依据氯仿的特性，在DNA粗提取第三步的基础上继续操作的步骤是：___________________________________________________________________，然后用体积分数为95%的冷酒精溶液使DNA析出。解析：(1)从表格可以看出，该实验有两个自变量：材料和温度。所以该探究性实验课题名称为探究不同材料和不同温度对DNA提取量的影响。低温抑制了相关酶的活性，DNA降解速度慢，提取的DNA较多。(2)第二步中用玻璃棒搅拌的目的是获取DNA絮状物，若速度快，易造成DNA断裂。(3)本实验的结论可从两个方面来考虑：①相同材料在不同温度下的结论；②不同材料在相同温度下的结论。(4)氯仿能使蛋白质变性，而对DNA影响极小，所以可将第三步获得的溶液与氯仿混合，又因氯仿密度大于水，所以蛋白质沉淀位于溶液下部，DNA位于上清液中。答案：(1)探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响(2)DNA断裂(3)①等质量的不同实验材料，在相同的保存温度下，从蒜黄提取的DNA量最多②低温抑制了相关酶的活性，DNA降解速度慢(4)将第三步获得的溶液与等量的氯仿充分混合，静置一段时间，吸取上清液题组31．在“DNA的粗提取与鉴定”实验中，不是其依据原理的是()。A．DNA在NaCl溶液中的溶解度随NaCl溶液浓度的不同而不同B．利用DNA不溶于酒精的性质，可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNAC．DNA是大分子有机物，不溶于水而易溶于某些有机溶剂D．在沸水中DNA遇二苯胺会出现蓝色反应解析利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度的不同可以提取DNA；DNA不溶于酒精，而其他杂质往往溶于酒精，所以可用酒精提纯DNA；DNA＋二苯胺eq\o(――→,\s\up17(沸水浴),\s\do15(5min))蓝色，故可用二苯胺对DNA进行鉴定。答案C2．如果在除去杂质时选择方案三，为什么要将滤液放在60～75℃的恒温水浴箱中保温10～15min()。A．使DNA变性 B．使蛋白质变性C．使DNA和蛋白质变性 D．分解蛋白质解析大多数蛋白质不能忍受60～80℃的高温，而DNA在80℃以上才变性。在60～75℃的恒温水浴箱中保温10～15min，目的是使蛋白质变性，然后分离得到DNA。答案B3．若选择的实验材料为植物细胞，破碎细胞时要加入一定量的洗涤剂和食盐。加入洗涤剂的目的是()。A．利于DNA的溶解 B．溶解细胞膜C．分离DNA和蛋白质 D．溶解蛋白质解析洗涤剂是一种离子去污剂，能溶解细胞膜，有利于DNA的释放；食盐的主要成分是NaCl，有利于DNA的溶解。答案B4．下列图示中能正确反映DNA溶解度与NaCl溶液浓度之间关系的是()。解析在质量浓度为mol/L的NaCl溶液中DNA的溶解度最小。答案C5．下列有关“DNA的粗提取和鉴定”实验的叙述，正确的是()。A．该实验先后两次加入的蒸馏水其作用完全相同B．质量浓度为0.1g/mL的柠檬酸钠溶液具有促凝血作用C．利用DNA不溶于酒精而蛋白质能溶于酒精的性质，可将DNA与蛋白质分离D．在溶有DNA的质量浓度为2mol/L的NaCl溶液中加入二苯胺后呈蓝色解析该实验中第一次加蒸馏水的目的是使红细胞破裂释放出DNA，第二次加水的目的是使NaCl溶液浓度降低，使DNA析出；质量浓度为0.1g/mL的柠檬酸钠具有防止凝血的作用；最后鉴定DNA要溶解在质量浓度为2mol/L的NaCl溶液中且需沸水加热。答案C6．(10分)下图为该实验过程中的一些重要操作示意图。①正确的操作顺序是________。②上图C、E步骤都加入蒸馏水，但其目的不同，分别是________和________。③上图A步骤中所用酒精必须是经过________的才能使用，该步骤的目的是____________________________。④为鉴定A中所得到的丝状物的主要成分为DNA，可滴加________试剂后沸水浴，如果出现________则证明该丝状物的主要成分为DNA。解析C、E步骤加入蒸馏水的目的不同，C为加速细胞破裂，E为降低NaCl溶液浓度使DNA析出，用于进一步析出DNA的酒精宜先预冷，以增加DNA析出量。答案①C→B→E→D→A②加速细胞的破裂降低NaCl溶液的浓度，使DNA析出③充分预冷提取含杂质较少(或较纯净)的DNA④二苯胺蓝色7．(10分)实验中对DNA进行鉴定时，做如下操作(见下表)：试管序号AB1加质量浓度为2mol/LNaCl溶液5mL加质量浓度为2mol/LNaCl溶液5mL2不加加入提取的DNA丝状物并搅拌3加4mL二苯胺，混匀加入4mL二苯胺，混匀4沸水浴5min沸水浴5min实现现象实验结论(1)根据如图，完成表格空白处的实验内容。(2)对B试管，完成1、2、3的操作后溶液颜色如何？____________________________________________________________。(3)在沸水中加热的目的是________，同时说明DNA对高温有较强的________。(4)A试管在实验中的作用是__________。(5)B试管中溶液颜色的变化程度主要与________________有关。解析本题主要考查DNA分子的鉴定。A、B两试管形成对照，B试管中含DNA丝状物，A试管中不含，起对照作用，其他条件均完全相同。本实验强调反应条件是沸水浴加热5min，加快颜色反应的速度，观察对比两试管的颜色时要等到冷却以后。答案(1)实验现象：A.溶液不变蓝色B．溶液逐渐变蓝色实验结论：DNA在沸水浴的情况下遇二苯胺会被染成蓝色(2)溶液颜色基本不变(不呈浅蓝色)(3)加快颜色反应速度耐受性(4)对照(5)加入试管中的DNA(丝状物)的多少8．(10分)(2011·江苏生物)某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动，具体步骤如下。材料处理：称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份，每份10g。剪碎后分成两组，一组置于20℃、另一组置于－20℃条件下保存24h。DNA粗提取第一步：将上述材料分别放入研钵中，各加入15mL研磨液，充分研磨。用两层纱布过滤，取滤液备用。第二步：先向6只小烧杯中分别注入10mL滤液，再加入20mL体积分数为95%的冷酒精溶液，然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌，使絮状物缠绕在玻璃棒上。第三步：取6支试管，分别加入等量的质量浓度为2mol/LNaCl溶液溶解上述絮状物。DNA检测：在上述试管中各加入4mL二苯胺试剂，混合均匀后，置于沸水中加热5min，待试管冷却后比较溶液的颜色深浅，结果(如下表)。材料保存温度花菜辣椒蒜黄20℃＋＋＋＋＋＋－20℃＋＋＋＋＋＋＋＋＋注：(“＋”越多表示蓝色越深)分析上述实验过程，回答下面的问题。(1)该探究性实验的课题名称是：__________________________________。(2)第二步中“缓缓地”搅拌，这是为了减少____________。(3)根据实验结果，得出结论并分析。①结论1：与20℃相比，相同实验材料在－20℃条件下保存，DNA的提取量较多。结论2：__________________________________________________________。②针对结论1，请提出合理的解释：________________________________________________________________。(4)氯仿密度大于水，能使蛋白质变性沉淀，与水和DNA均不相溶，且对DNA影响极小。为了进一步提高DNA纯度，依据氯仿的特性，在DNA粗提取第三步的基础上继续操作的步骤是：________________________，然后用体积分数为95%的冷酒精溶液使DNA析出。解析本题主要考查DNA粗提取的相关知识，意在考查考生的实验与探究能力。如果DNA断裂，就不容易被提取出来；温度主要是通过影响酶的活性来影响生理过程；粗提取得到的DNA中含有少量的蛋白质，可以通过氯仿的特殊功能来去除蛋白质，提高DNA纯度。答案(1)探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响(2)DNA断裂(3)①等质量的不同实验材料，在相同的保存温度下，从蒜黄提取的DNA量最多②低温抑制了相关酶的活性，DNA降解速度慢(4)将第三步获得的溶液与等量的氯仿充分混合，静置一段时间，吸取上清液题组41．下列关于“DNA的粗提取和鉴定”实验的叙述中，正确的是()。A．用鸡血作为材料，原因是鸡血红细胞有细胞核，其他动物红细胞没有细胞核B．用不同浓度的NaCl溶液进行DNA粗提取，原因是DNA在其中溶解度不同C．用酒精进行提纯，原因是DNA溶于酒精，蛋白质不溶于酒精D．用二苯胺试剂进行鉴定，原因是DNA溶液中加入二苯胺试剂即呈蓝色解析只有哺乳动物的成熟红细胞没有细胞核，A选项错误；DNA不溶于酒精，蛋白质溶于酒精，所以可用冷却的酒精来对DNA进行提纯，C选项错误；DNA溶液中加入二苯胺试剂后要在水浴加热的情况下才能出现蓝色，D选项错误。答案B2．在DNA的粗提取与鉴定实验中有三次过滤(1)过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液(2)过滤含黏稠物的质量浓度为mol/L的NaCl溶液(3)过滤溶解有DNA的质量浓度为2mol/L的NaCl溶液以上三次过滤分别为了获得()。A．含核物质的滤液、纱布上的黏稠物、含DNA的滤液B．含核物质的滤液、滤液中DNA黏稠物、含DNA滤液C．含核物质的滤液、滤液中DNA黏稠物、纱布上的DNAD．含较纯DNA滤液、纱布上黏稠物、含DNA滤液解析过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液应取滤液(其内含DNA)；过滤含黏稠物的质量浓度为mol/L的NaCl溶液应取黏稠物(因其内含析出的DNA)；DNA易溶于质量浓度为2mol/L的NaCl溶液，故过滤该溶液时应取滤液(其内溶有DNA)。答案A3．在DNA的粗提取和鉴定实验中，有两次DNA的沉淀析出，其依据的原理是()。①DNA在NaCl溶液质量浓度为mol/L时溶解度最低②DNA在冷却的体积分数为95%的酒精溶液中能沉淀析出A．两次都是①B．两次都是②C．第一次是①，第二次是②D．第一次是②，第二次是①解析第一次沉淀析出是利用浓NaCl溶液溶解核内DNA之后，加蒸馏水稀释NaCl溶液至质量浓度为mol/L，使DNA溶解度最低而析出；第二次沉淀是用冷酒精溶液使DNA凝集并溶解非DNA物质，达到提纯DNA的目的。答案C4．下图所示为DNA的粗提取与鉴定实验的实验步骤，请据图回答下列问题。(1)请写出①②③④的实验步骤名称①_____________________________________________________________；②__________________________________________________________；③____________________________________________________________；④_______________________________________________________________(2)A、B两支试管中，________试管中含有DNA，________试管起对照作用。解析在解答本题时，一定要先将图中的每一步操作都看清楚，然后根据图中的有关文字提示判断每一步实验操作的名称。答案(1)①提取细胞核物质②析出DNA的黏稠物③将DNA沉淀出来④DNA的鉴定(2)BA课堂小结题组51.在研究DNA的基因样本前，采集来的血样需要蛋白水解酶处理，然后用有机溶剂除去蛋白质。用蛋白水解酶处理血样的目的是（D）A.除去血浆中的蛋白质B.除去染色体上的蛋白质C.除去血细胞表面的蛋白质D.除去血细胞中的所有的蛋白质，使DNA释放，便于进一步提纯2．与析出DNA粘稠物有关的叙述，不正确的是（C）A.操作时缓缓滴加蒸馏水，降低DNA的溶解度B.在操作A时，用玻璃棒轻缓搅拌，以保证DNA分子完整C.加蒸馏水可同时降低DNA和蛋白质的溶解度，两者均可析出D.当丝状粘稠物不再增加时，此时NaCl的浓度相当于L3．洗涤剂能够瓦解（B），但对DNA没有影响。A.细胞壁B.细胞膜C.细胞核D.细胞质4．在沸水浴的条件下，DNA遇（D）会被染成蓝色。A.斐林试剂B.苏丹Ⅲ染液C.双缩脲试剂D.二苯胺5．在DNA提取过程中，最好使用塑料试管和烧杯，目的是（B）A.不易破碎B.减少提取过程中DNA的损失C.增加DNA的含量D.容易洗刷6．下列操作中，对DNA的提取量影响最小的是（B）A.使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂，放出DNA等核物质B.搅拌时，要使用玻璃棒沿一个方向轻缓搅拌C.在“析出DNA粘稠物”时，要缓缓加蒸馏水，直至溶液中粘稠物不再增加D.在用酒精沉淀DNA时，要使用冷酒精，甚至再将混合液放入冰箱中冷却E在DNA的溶解和再溶解时，要充分搅拌7．DNA的粗提取中，将与滤液体积相等的、冷却的（D），静置2—3min，溶液中会出现白色丝状物。．9%的NaCl的NaCl溶液C.质量分数15%的HClD.体积分数为95%的酒精溶液8.以血液为实验材料时，需要向血液中加入（C），防止血液凝固。A.醋酸钠B.龙胆紫C.柠檬酸钠D.醋酸洋红9.在向溶解DNA的NaCl溶液中，不断加入蒸馏水的目的是（C）A.加快溶解DNA的速度B.加快溶解杂质的速度C.减少DNA的溶解度，加快DNA析出D.减小杂质的溶解度，加快杂质的析出10.去除滤液中的杂质时，直接在滤液中加入嫩肉粉，利用嫩肉粉中的（C）分解蛋白质。A.胃蛋白酶B.胰蛋白酶C.木瓜蛋白酶D.肠肽酶1．提取鸡血中DNA时，要除去血液中的上清液，这是因为什么？答案：因为上清液是血浆，不含有血细胞，DNA存在于沉郁试管底部的鸡血细胞的细胞核中，所以提取鸡血中的DNA时，要除去血液中的上清液。2．填写本实验完成下列实验操作时所用试剂。⑴提取鸡血细胞中核物质⑵溶解核内DNA：⑶析出2mol/LNaCl溶液中的DNA⑷DNA粘稠物的再溶解⑸提取杂质较少的DNA白色乳状丝状物⑹DNA的鉴定答案：⑴蒸馏水⑵2mol/LNaCl溶液⑶蒸馏水⑷2mol/LNaCl溶液⑸冷却的95%的酒精⑹二苯胺3.关于DNA粗提取的实验材料的选择，也经过了多次实验效果的比较，最终选择鸡血做实验材料的原因是什么？请回答下列问题：⑴鸡血细胞中红细胞，家鸡属于鸟类，新陈代谢旺盛，因而血液中细胞树木较多，可以提供丰富的。⑵实验前由老师制备血细胞液供同学们做实验材料，而不用鸡全血，主要原因是。⑶生活在牧区的人们，采集牛、羊和马血比较方便，若他们按实验要求完成实验步骤后，结果是，这是因为这些动物和人一样，成熟的红细胞中，但若改用动物肝脏做实验材料，实验能顺利进行。这是因为。⑷若选用动物肝脏做实验材料，在提取之前，最好增加程序，使组织细胞更易分离。答案：⑴含细胞核；红；DNA⑵鸡血细胞液中DNA相对含量⑶很难提取到DNA；无细胞核；肝细胞有细胞核⑷研磨题组61．在“DNA的粗提取与鉴定”实验中，实验原理是利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同来提取的，DNA的溶解度与如图所示曲线的对应点相符合的是()A．a点浓度最适合析出DNAB．b点浓度最适合析出DNAC．c点浓度最适合析出DNAD．d点浓度最适合析出DNA解析：选B。由图可知，DNA在mol/LNaCl溶液中的溶解度最小，故这一浓度最适合析出DNA，随着NaCl溶液浓度的增大或减小，DNA溶解度逐渐增大。2．在DNA粗提取与鉴定实验中，将第三次过滤获得的纱布上含有的DNA的黏稠物(含有较多杂质)分别处理如下：序号操作过程①放入2mol/L的NaCl溶液，搅拌后过滤②再加mol/L的NaCl溶液，搅拌后过滤③再加入冷却的、同体积的95%酒精溶液，用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物上述操作过程正确的是()A．①② B．①②③C．①③ D．②③解析：选C。第三次过滤后纱布上的是粗提取的DNA，此DNA还含有杂质，因此将其溶于2mol/L的NaCl溶液中，再进行过滤，以除去不溶于2mol/L的NaCl溶液的杂质。然后向滤液中加入同体积的、冷却的95%酒精即可析出DNA。然后挑出DNA进行鉴定。3．(2011年聊城高二检测)与析出DNA黏稠物有关的叙述，不正确的是()A．操作时缓缓滴加蒸馏水，降低DNA的溶解度B．在操作时，用玻璃棒轻缓搅拌，以保证DNA分子完整C．加蒸馏水可同时降低DNA和蛋白质的溶解度，两者均可析出D．当丝状黏稠物不再增加时，此时NaCl溶液的浓度相当于mol/L解析：选C。向含有DNA的溶液中加入蒸馏水后，NaCl溶液的浓度会变小，当NaCl溶液的浓度为mol/L时，DNA的溶解度最小而析出。4．(2011年江苏启东中学高二检测)下列DNA粗提取的实验操作中，经过离心或过滤后，取上清液或滤液的有(多选)()A．在新鲜鸡血中加入适量的柠檬酸钠，混合均匀后离心B．在盛有血细胞的塑料烧杯中加蒸馏水，快速搅拌后过滤C．在2mol/L的氯化钠溶液中放入丝状物，轻轻搅拌后过滤D．在溶有DNA的氯化钠溶液中缓缓加入蒸馏水，轻轻搅拌后过滤解析：选BC。柠檬酸钠能够防止血液凝固，新鲜鸡血经过离心后，上清液中血细胞较少，则A项错误。在血细胞中加入蒸馏水，细胞吸水而涨破，DNA在滤液中，则B项正确。含有DNA的丝状物溶于2mol/L的氯化钠溶液中，则DNA在滤液中，C项正确。当氯化钠溶液浓度为mol/L时，DNA溶解度最低而析出，杂质在滤液中，则D项错误。5．(2011年高考江苏卷)在利用鸡血进行“DNA的粗提取与鉴定”的实验中，相关叙述正确的是()A．用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至mol/L，滤去析出物B．调节NaCl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分杂质C．将丝状物溶解在2mol/LNaCl溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色D．用菜花替代鸡血作为实验材料，其实验操作步骤相同解析：选B。在物质的量浓度为mol/L的NaCl溶液中，DNA的溶解度最低，DNA存在于析出物中，故不能滤去析出物，A项错误；利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，进行相应操作，可在实验中去除部分杂质，B项正确；进行DNA鉴定时，加入二苯胺试剂后再经沸水浴才能出现蓝色，C项错误；用菜花作为实验材料时，要加入一定的洗涤剂和食盐，进行充分搅拌和研磨，过滤后收集研磨液，D项错误。6．如图所示，完成关于DNA的粗提取与鉴定实验的步骤图并回答问题：(1)请写出①②③④的实验名称：①________________________________________________________________②________________________________________________________________③________________________________________________________________④________________________________________________________________(2)A、B两支试管中，________试管中含有DNA，________试管起对照作用。答案：(1)①提取细胞核物质②析出DNA的黏稠物③将DNA沉淀出来④DNA鉴定(2)BA1．为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂？(教材P55)答案：蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种低渗液体，水分可以大量进入血细胞内，使血细胞涨裂，再加上搅拌的机械作用，就加速了鸡血细胞的破裂(细胞膜和核膜的破裂)，从而释放出DNA。2．加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么？(教材P55)答案：洗涤剂是一些离子去污剂，能溶解细胞膜，有利于DNA的释放；食盐的主要成分是NaCl，有利于DNA的溶解。3．如果研磨不充分，会对实验结果产生怎样的影响？(教材P55)答案：研磨不充分会使细胞核内的DNA释放不完全，提取的DNA量变少，影响实验结果，导致看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等。4．方案二与方案三的原理有什么不同？(教材P56)答案：方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白，从而使提取的DNA与蛋白质分开；方案三利用的是DNA和蛋白质对高温耐受性的不同，从而使蛋白质变性，与DNA分离。1．做DNA的粗提取与鉴定实验时，实验材料用鸡血而不用猪血的原因是()A．鸡血价格比猪血低B．猪的红细胞没有细胞核，不易提取到DNAC．鸡血不凝固，猪血凝固快D．用鸡血提取DNA比猪血提取操作简便解析：选B。DNA主要存在于细胞核中，猪属于哺乳动物，而哺乳动物成熟的红细胞中没有细胞核，故不宜作为提取DNA的实验材料；鸡属于鸟类，红细胞中有细胞核，可以用来提取DNA。2．在采用鸡血为材料对DNA进行粗提取的实验中，若需进一步提取杂质较少的DNA，可以依据的原理是()A．在物质的量浓度为mol/L的氯化钠溶液中DNA的溶解度最小B．DNA遇二苯胺在沸水浴的条件下会染成蓝色C．DNA不溶于酒精而细胞中的一些物质易溶于酒精D．质量浓度为0.1g/mL的柠檬酸钠溶液具有抗凝血作用解析：选C。利用mol/L的氯化钠溶液，可以析出DNA；DNA遇二苯胺在沸水浴的条件下染成蓝色，可以鉴定DNA；利用0.1g/mL的柠檬酸钠溶液可以得到澄清的鸡血细胞液。它们都不能成为进一步提纯DNA的理由。3．从鸡血细胞中获取DNA所用的提取液是()A．NaCl溶液 B．冷却的酒精C．柠檬酸纳 D．蒸馏水解析：选A。实验中可以通过向鸡血细胞液中加蒸馏水并搅拌的方法使鸡血细胞核中的DNA释放出来，然后加入NaCl溶液使DNA溶解在其中，因此提取鸡血细胞中DNA的提取液是NaCl溶液。不要与实验过程中用冷却的酒精析出DNA或用加蒸馏水使DNA析出这两步混淆。4．在DNA的粗提取过程中，初步析出DNA和提取较纯净的DNA所用的药品分别是()①0.1g/mL的柠檬酸钠溶液②mol/L的NaCl溶液③mol/L的NaCl溶液④体积分数为95%的冷酒精溶液A．①③ B．②③C．②④ D．③④解析：选D。在物质的量浓度为mol/L的NaCl溶液中，DNA析出而蛋白质溶解；冷却的体积分数为95%的酒精溶液能使DNA析出。5．在DNA粗提取过程中涉及到三次过滤：(1)过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液；(2)过滤含黏稠物的mol/L的NaCl溶液；(3)过滤溶解有DNA的2mol/L的NaCl溶液。以上三次过滤的目的是分别为了得到()A．含核物质的滤液、纱布上的黏稠物、含DNA的滤液B．含核物质的滤液、滤液中的DNA黏稠物、含DNA的滤液C．含核物质的滤液、滤液中的DNA黏稠物、纱布上的DNAD．含较纯的DNA滤液、纱布上的黏稠物、含DNA的滤液答案：A6．(2011年聊城高二检测)DNA的粗提取中，加入与滤液体积相等的、冷却的A溶液，静置2min～3min，溶液中会出现白色丝状物。上面的A溶液是指()A．%的NaCl溶液B．mol/L的NaCl溶液C．质量分数15%的HClD．体积分数为95%的酒精溶液解析：选D。DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质则溶于酒精溶液，故滤液与体积分数为95%的冷却的酒精溶液混合后，就会得到白色的丝状物。7．甲、乙两图为“DNA的粗提取与鉴定”实验中涉及的两个操作装置图。相关叙述正确的是()A．图甲的烧杯和图乙的试管中所用溶剂都为NaCl溶液，但两者浓度不同B．图乙试管经稍稍加热后即可观察到一支试管中的溶液明显变蓝，另一支试管中的溶液不变蓝C．图甲操作需用玻璃棒迅速搅拌以使DNA析出，并缠绕在玻璃棒上D．图乙操作中所用的二苯胺需现配现用以达到较好的鉴定效果解析：选D。如图甲烧杯中为酒精溶液，乙试管中为NaCl溶液，则A错误。如图乙试管需要在沸水中加热5min，则B错误。如图甲用玻璃棒沿一个方向轻轻搅拌，卷起丝状物，则C错误。如图乙操作中所用的二苯胺最好现配现用，否则二苯胺会变成浅蓝色，则D正确。8．在DNA析出与鉴定实验中加入酒精的目的是()A．溶解DNAB．除去DNA中所含的杂质C．析出蛋白质D．稀释溶液，降低浓度解析：选B。本题考查的主要是酒精的作用，即DNA不溶于体积分数为95%的酒精溶液而蛋白质等其他杂质可溶，从而把杂质和DNA分开。9．向溶有DNA的物质的量浓度为2mol/LNaCl溶液中不断加入蒸馏水，在这个过程中DNA和杂质蛋白质等的溶解度变化情况分别是()A．减小、减小 B．增大、增大C．先减小后增大、增大 D．减小、增大解析：选C。DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，在物质的量浓度为mol/L的NaCl溶液中DNA的溶解度最小，蛋白质随NaCl溶液浓度的降低而溶解度逐渐增大。10．下表是关于DNA的粗提取与鉴定实验中，所使用的材料、操作及其作用的表述，正确的是(多选)()试剂操作作用A柠檬酸钠溶液与鸡血混合防止血液凝固B蒸馏水与鸡血细胞混合保持细胞形状C蒸馏水加入到溶解有DNA的NaCl溶液中析出DNA丝状物D冷却的酒精加入到过滤后含DNA的NaCl溶液中产生特定的颜色反应解析：选AC。在“DNA的粗提取与鉴定”实验中，柠檬酸钠的作用是防止血液凝固。鸡血中加入蒸馏水的作用是使血细胞因吸水膨胀而破裂，释放DNA。DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，在NaCl溶液的物质的量浓度为mol/L时，DNA的溶解度最低，有利于DNA的析出。DNA不溶于酒精，但细胞中的某些其他物质可以溶于酒精，所以将冷却的酒精加入到过滤后含DNA的NaCl溶液中，可以获得较纯净的DNA。11．如图为“DNA的粗提取与鉴定”实验的相关操作。(1)图中实验材料A可以是________等，研磨前加入的B应该是______________________________________________________________________(2)通过上述所示步骤得到滤液C后，再向滤液中加入2mol/L的NaCl溶液的目的是______________________________________________________________________再过滤得到滤液D，向滤液D中加入蒸馏水的目的是______________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)在“DNA的粗提取与鉴定”实验中，将含有一定杂质的DNA丝状物分别放入体积为2mL的4种溶液中，经搅拌后过滤，获得如表所示的4种滤液，含DNA最少的是滤液________。1B液中研磨搅拌后过滤滤液E22mol/L的NaCl溶液搅拌后过滤滤液F3mol/L的NaCl溶液中搅拌后过滤滤液G4冷却的95%的酒精溶液中搅拌后过滤滤液H(4)DNA鉴定的原理是______________________________________________________________________________________________________________________________________________。解析：本题考查了“DNA的粗提取与鉴定”的原理及分析。(1)用洋葱、菜花等破碎细胞时，加入一定量的洗涤剂和食盐，洗涤剂可以溶解细胞膜，有利于DNA的释放，食盐主要成分是NaCl，有利于DNA的溶解。(2)在含有DNA的滤液中，加入2mol/L的NaCl溶液，可以使DNA溶解而杂质析出；在滤液D中加入蒸馏水，当NaCl浓度为mol/L时，DNA溶解度最小而析出。(3)在滤液E中，只是除去了部分杂质，则含DNA较多；在滤液F中，除去了较多的蛋白质等，则含DNA最多；在滤液G中，因DNA析出，则含DNA较少；在滤液H中，因DNA不溶于体积分数为95%的冷酒精，则含DNA最少。(4)DNA遇二苯胺(沸水浴)会被染成蓝色。答案：(1)洋葱(菜花等)洗涤剂和食盐(2)使DNA溶解使DNA(溶解度下降而沉淀)析出(3)H(4)在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色12．DNA在NaCl溶液中的溶解度有二重性，随着NaCl溶液浓度的变化而变化。(1)请在下列不同浓度的NaCl溶液中选出能使DNA析出最彻底的一种()和溶解度最高的一种()(在括号内填选项)A．mol/LB．2mol/LC．mol/LD．mol/L(2)DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些物质却可以溶于酒精溶液，利用这一原理可以________________，可以推测溶于酒精中的物质可能有________________。(3)利用DNA遇________呈蓝色的特性，将该物质作为鉴定________的试剂。其实验过程要点是向放有____________的试管中加入4mL的__________。混合均匀后，将试管置于________5min，待试管________，观察试管中溶液颜色的变化，这个实验也说明DNA耐________温。解析：根据实验原理可知DNA在mol/L的NaCl溶液中，溶解度最低，在高浓度2mol/LNaCl溶液中，溶解度最高。DNA存在于染色体上，为了把DNA与其他物质分开，采取DNA不溶于酒精的方法，目的是除去杂质；利用DNA遇二苯胺(沸水浴)呈蓝色的特性，可以鉴定提取的DNA。答案：(1)AB(2)除去杂质某些脂质、蛋白质、糖类或其他大分子物质(3)二苯胺DNADNA二苯胺试剂沸水中水浴加热冷却后高题组71．DNA的粗提取(1)基本思路：利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。(2)方法和原理：①DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，利用这一特点选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。②DNA不溶于酒精，但是某些蛋白质则可溶于其中。③蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA没有影响。④大多数蛋白质不能忍受60～80_℃的高温而发生变性，而DNA在80_℃以上才会变性。⑤洗涤剂能瓦解细胞膜，但对DNA无影响。2．DNA的鉴定在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。二、实验设计1．选取实验材料选用DNA含量较高的生物组织，成功的可能性更大。2．破碎细胞，获取含DNA的滤液动物细胞的破碎比较容易，例如，在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可。如果是植物细胞，需要先用洗涤剂溶解细胞膜。3．去除滤液中杂质(1)方案一：通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质。(2)方案二：直接向滤液中加入嫩肉粉，反应10～15min，嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质。(3)方案三：将滤液放在60～75_℃的恒温水浴箱中保温10～15min，注意严格控制温度范围，使蛋白质沉淀析出而DNA分子还未变性，可以将DNA与蛋白质分离。4．DNA的进一步提纯利用DNA不溶于冷却的%酒精这一原理，可从滤液中析出较纯净的DNA，此时DNA的状态为白色丝状物。5．DNA的析出与鉴定(1)DNA的析出：DNA的析出用的是与滤液体积相等的、冷却的酒精溶液。(2)DNA鉴定：鉴定DNA时在试管中先加入物质的量浓度为2_mol/L的NaCl溶液5mL。两支试管中其中一支加入DNA丝状物，各加入二苯胺4_mL。在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色，因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。三、操作提示(1)以血液为实验材料时，每100mL血液中需要加入3g柠檬酸钠，防止血液凝固。(2)加入洗涤剂后，动作要轻缓、柔和，否则容易产生大量的泡沫，不利于后续步骤的操作。加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓，以免加剧DNA分子的断裂，导致DNA分子不能形成絮状沉淀。(3)鉴定DNA用的染色剂二苯胺试剂要现配现用，否则会影响鉴定的效果。一、选择题1．由于鸡血没有找到，某同学尝试用猪的血液来代替，但结果没有成功，其最可能的原因是(B)A．操作方法不对B．猪血含DNA过少C．NaCl溶液浓度太高D．加二苯胺过少解析：猪的血液中主要是红细胞，但猪的成熟红细胞中无细胞核，所以猪血细胞中DNA含量低。2．DNA在下列浓度的NaCl溶液中，溶解度最低的是(C)A．2mol·L－1B．mol·L－1C．mol·L－1D．5mol·L－13．DNA的粗提取与鉴定实验，与下列哪项原理无关(B)A．DNA在mol/L的NaCl溶液中，溶解度最低B．DNA易被龙胆紫溶液染成紫色C．DNA溶液中加入二苯胺试剂，加热后产生蓝色D．加入95%的冷酒精，DNA会从溶液中析出解析：DNA在mol/L的NaCl溶液中溶解度最低。DNA鉴定选用的试剂为二苯胺试剂，加热后(沸水浴)产生蓝色。加入95%的冷却的酒精，由于DNA不溶于酒精，DNA会从溶液中析出。4．在利用鸡血进行“DNA的粗提取与鉴定”的实验中，相关叙述正确的是(B)A．用蒸馏水将NaCl溶液的物质的量浓度调至mol/L，滤去析出物B．调节NaCl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分杂质C．将丝状物溶解在物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色D．用菜花替代鸡血作为实验材料，其实验操作步骤相同解析：用蒸馏水将NaCl溶液物质的量浓度调至mol/L，使DNA析出；调节NaCl溶液的物质的量浓度为2mol/L，过滤可除去不溶的杂质，木瓜蛋白酶能够分解蛋白质；在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺试剂会被染成蓝色；如果实验材料是植物细胞，需要先用洗涤剂瓦解细胞膜。5．在DNA析出与鉴定实验中加入酒精的目的是(B)A．溶解DNAB．除去DNA中所含的杂质C．析出蛋白质D．稀释溶液，降低浓度解析：DNA不溶于体积分数为95%的酒精溶液而蛋白质可溶，从而把蛋白质和DNA分开。6．下列叙述中错误的是(A)A．改变NaCl溶液的浓度只能使DNA溶解而不能使其析出B．在沸水浴中，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色C．加盐和加酒都能抑制微生物的生长D．密封瓶口前最好将瓶口通过火焰以防杂菌污染解析：当NaCl溶液的浓度低于mol/L时，随浓度的升高，DNA的溶解度降低；当NaCl溶液的浓度高于mol/L时，随浓度的升高，DNA的溶解度升高；NaCl溶液的浓度为mol/L时，DNA的溶解度最低；因此，改变NaCl溶液的浓度可以使其析出。7．下列关于“DNA粗提取与鉴定实验”的叙述，正确的是(C)A．洗涤剂能瓦解细胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度B．将DNA丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝C．常温下菜花匀浆中有些酶类会影响DNA的提取D．用玻棒缓慢搅拌滤液会导致DNA获得量减少解析：洗涤剂可瓦解植物细胞膜，有利于释放DNA，但不能增加DNA在NaCl溶液中的溶解度，A项错误；含DNA的丝状物应先溶解在物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液中，再用二苯胺试剂在沸水浴条件下检测，冷却后变成蓝色，B项错误；常温下菜花匀浆中某些酶如DNA水解酶，其活性较高，会影响DNA的提取，C项正确；用玻棒缓慢搅拌滤液可防止DNA分子断裂，但不影响DNA的提取量，D项错误。8．下列操作中，对DNA的提取量影响最小的是(B)A．使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂，放出DNA等核物质B．搅拌时，要使用玻璃棒沿一个方向轻缓搅拌C．在“析出DNA黏稠物”时，要缓缓加蒸馏水，直至溶液中黏稠物不再增加D．在用酒精沉淀DNA时，要使用冷酒精，甚至再将混合液放入冰箱中冷却解析：DNA存在于细胞核中，B选项中的操作对DNA几乎没有影响，而其他3项的操作对象直接是DNA，自然相比起来B的影响最小。9．DNA粗提取的实验材料中有三次过滤：(1)过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液；(2)过滤含黏稠物的mol/LNaCl溶液；(3)过滤溶解有DNA的2mol/LNaCl溶液。以上三次过滤分别为了获得(A)A．含核物质的滤液、纱布上的黏稠物、含DNA的滤液B．含核物质的滤液、滤液中DNA黏稠物、含DNA的滤液C．含核物质的滤液、滤液中DNA黏稠物、纱布上的DNAD．含较纯的DNA滤液、纱布上的黏稠物、含DNA的滤液解析：用蒸馏水稀释鸡血细胞液，使血细胞的细胞膜、核膜破裂，释放出核物质，此时过滤只能得到含DNA和其他物质如蛋白质的滤液，这种滤液必须经过实验中其他步骤得相继处理，方能得到较纯的DNA。DNA在mol/LNaCl溶液中溶解度最低，成丝状黏稠物，可经过滤留在纱布上。10．若从植物细胞中提取DNA，发现实验效果不好，如看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定时不显示颜色反应等。其不可能的原因是(A)A．植物细胞中DNA含量低B．研磨不充分C．过滤不充分D．95%冷酒精的量过少解析：研磨不充分会使细胞核内的DNA释放不完全，提取的DNA量变少；过滤不充分，也会导致提取的DNA量过少；若用于沉淀DNA的酒精量过少，也会导致DNA的沉淀量少。DNA量过少，则实验效果就差。11．下图为“DNA的粗提取与鉴定”实验装置：(1)实验材料选用鸡血细胞液，而不用鸡全血，主要原因是鸡血细胞液中有较高含量的________。(2)在图A所示的实验步骤中加蒸馏水的目的是____________________，通过图B所示的步骤取得滤液，再在溶液中加入2mol/L的NaCl溶液的目的是____________________；图C所示实验步骤中加蒸馏水的目的是____________________________________________________________________________________________。解析：图A、B、C所示为本实验的三个关键步骤。图A通过添加蒸馏水，使血细胞大量吸水而致最终破裂，并释放出胞内物。图B通过纱布过滤使血细胞释