第九章种子健康检验

第九章

种子健康检验张园莉郑军丽张瑞珍姚天茏庄泽龙主讲：张丽第九章种子健康检验第九章种子健康检验第九章种子健康检验第九章种子健康检验由于种子带病的类型和病原物的不同，其病害检验的方法也不相同主要有以下几种：

第三节种子病原物的检验方法

一、肉眼检验

1.适用范围

1）混杂在种子间的较大病原体

2）污染大量病菌孢子的种子

3）种子带明显病症的病粒

2.检验方法

将检验样品分出一半放在白纸或白色搪瓷盘中，检出线虫瘿,麦角菌,黑粉菌球,菌核及病粒,称其重量,计算病害感染率。3.注意

1)无病症的种子不一定是无病的种子;2)不同的病害可以表现类似的症状;3)同一病害也可表现不同症状。

二、过筛检验

1.适用范围

1)检查混杂在种子内较大的病原体如菟丝子,菌核,线虫瘿和杂草种子等。2)利用病原体与种子的小的不同,通过一定的筛孔将病原体筛出来,然后进行分类称重。

2.检验方法将送验样品分出一半作为试样,用规定孔径的筛子过筛；各层样品倒入白瓷盘内检查,最下层的杂志倒入黑玻璃盘中用肉眼或放大镜检查。

三、洗涤检验

1.适用范围

种子表面带病而肉眼看不见的种子病害。（附着在种子表面的病菌孢子）

2.检验方法样品制备：取样（5g）2份于100ml三角瓶内，加蒸馏水10ml,振荡５～10min。显微计数：悬浮液1000～1500r/min离心3～5min,吸去上清液，留1ML沉淀部分，滴于5个载玻片，加盖玻片镜检，每片检查十个视野，并计算每个视野平均孢子数。

四、漏斗分离检验

1.适用范围

检验种子外部所携带的线虫。

检验原理:种传线虫在水中和有空气的条件下会活化，具有趋水性和向地性，钻出种子游进水中，用显微镜检查水中的线虫。

2.检验方法将种子用2层纱布包好，放入备好的漏斗内，漏斗需10～15cm口径，下口接约10cm长的橡皮管一根，用弹簧夹夹住；加水使种子浸没，放在20～25℃的环境中浸10～24h；用离心管接取浸出液，再放在2000r/min的离心机中离心5min,取下部沉淀液置于载玻片上检查线虫。

五、萌芽实验

1.适用范围

种子携带的病菌，无论是在种子表面，还是潜伏在种子内部，只要在种子萌发阶段开始为害或长出病菌的，都可用此种方法进行检验。

2.检验方法

1）吸水纸法

2）砂床法

六、分离培养检验1.适用范围

主要用于发育较慢的致病真菌、潜伏在种子内部的、表面的病原菌，也可用来确定病菌潜伏的部位。2.检验方法1）数取试样400粒；2）预处理:

检验种子内部的病原菌时，可用乙醇、0.1%的升汞，或0.1%的次氯酸钠作表面消毒后，用无菌水洗涤；3）培养:

每个培养皿播10粒种子于培养皿表面，20～22℃黑暗条件下培养5～7d检查；

马铃薯葡萄糖琼脂培养基常用于培养真菌，牛肉汁培养基常用于培养细菌。

七、噬菌体检验

1.适用范围

细菌性病害。噬菌体能造成寄主细菌的破裂和溶解，所以在固体培养基上造成许多透亮的无菌空斑（噬菌斑）。

2.检验方法样品的制备：称一定重量的种子，根据其传播方式，取其带病的部位进行，加入一定量的灭菌水，浸泡0.5～1h，并不断搅拌，滤纸过滤，取滤液1ml3个重复，分别放入3个培养皿中；测定：加入1ml指示菌液（大于9亿个菌/ml)混匀，3～5min后加入10ml溶化并冷却至45～50℃的固体平板培养基，放入25～28℃的恒温箱中培养10～12h,观察噬菌斑数。

八、接种指示植物法

利用喷雾接种、针刺接种，汁液摩擦接种等适宜的方法接种到指示植物（寄主）。观察指示植物接种后的病斑或幼叶的系统症状，判读是否有病毒病。九、血清学检验

采用特制的抗血清，利用血清学反应检查细菌、病毒、类菌原体的一类方法。