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文档简介

转基因动物的培育

青海省玉树县2010年4月14日晨发生两次地震,最高震级7.1级,地震震中位于县城附近。截至4月20日17时,玉树地震遇难人数为2064人,失踪175人,受伤12135人,其中重伤1434人。为表达全国各族人民对青海玉树地震遇难同胞的深切哀悼,2010年4月20日国务院决定,2010年4月21日举行全国哀悼活动,全国和驻外使领馆下半旗志哀,停止公共娱乐活动。人血白蛋白是从健康人的血液中提取的,可直接静脉注射到病人体内,主要用于失血创伤、烧伤引起的休克,脑水肿及损伤引起的颅压升高,肝硬化及肾病引起的水肿或腹水,癌症术后恢复等方面的治疗,是临床急救的一种特殊药品。因其主要用于危重病人及大手术患者的术后康复,素有“救命药”之称。我国人血清白蛋白每年临床需要110-120吨,目前血浆供应不足,市场缺口高达60吨至80吨。我国每年临床和疫苗辅料需要150—170吨人血白蛋白,完全从血浆中提取,相当于要2亿人年均献血100毫升。

我国首例转基因试管牛“滔滔”。中国工程院院士、课题组负责人曾溢滔教授(左)

1999年2月,上海遗传研究所宣布转基因试管牛“滔滔”诞生,其体内被检测到带有人的血清白蛋白基因,这项成果被评为当年“中国十大科技进展”之一。据曾溢滔教授介绍:将人血清白蛋白(hALB)基因通过显微注射将其导入经过体外受精(IVF)的奶牛受精卵中,体外培养到桑椹胚后期,将整合胚移植于受体母牛,足月分娩产下1头含有人血清白蛋白基因整合的转基因试管牛“滔滔”。转基因试管牛的培育过程含人血白蛋白基因的重组DNA转基因试管牛的培育过程B从甲雌牛卵巢中获得卵细胞从乙雄牛精巢中获得精子A注:1、2、3为胚胎发育时期;ABCD为生物操作技术DC受精卵23转基因牛“滔滔”卵裂1受精卵囊胚原肠胚转基因牛“滔滔”D转基因试管牛的培育过程C含人血白蛋白基因的重组DNAB从甲雌牛卵巢中获得卵细胞从乙雄牛精巢中获得精子A卵裂桑椹胚注:1、2、3为胚胎发育时期;ABCD为生物操作技术①人工化学方法合成目的基因,或用聚合酶链式反应(PCR)技术扩增目的基因(目的基因的序列已知)②从基因文库中获取目的基因(目的基因的序列未知)获取目的基因的方法有哪些?想一想资料:含人血白蛋白基因的重组DNA:曾溢滔教授的课题组构建了含人血清白蛋白(hALB)基因的cDNA全序列、内含子1以及山羊β-酪蛋白基因启动子和5′端上游调控序列在内的乳腺表达载体pcDNA3.1-CALBm思考:1、在构建含人血白蛋白基因的重组DNA的过程中需要借助哪些工具酶?大肠杆菌(E.coli)的一种限制酶能识别GAATTC序列,并在G和A之间切开(水解DNA分子骨架的磷酸二酯键)。5‘5‘3‘3‘什么叫黏性末端?当限制酶从识别序列的中心轴线两侧切开时,被限制酶切开的DNA两条单链的切口,带有几个伸出的核苷酸的单链,他们之间正好互补配对,这样的切口叫黏性末端。磷酸二酯键DNA连接酶限制性核酸内切酶DNA聚合酶解旋酶氢键资料:含人血白蛋白基因的重组DNA:曾溢滔教授等人构建了含人血清白蛋白(hALB)基因的cDNA全序列、内含子1以及山羊β-酪蛋白基因启动子和5′端上游调控序列在内的乳腺表达载体pcDNA3.1-CALBm思考:1、在构建含人血白蛋白基因的重组DNA的过程中需要借助哪些工具酶?思考:2、在构建含人血白蛋白基因的重组DNA的过程中是否只有用同一种限制性核酸内切酶切割的黏性末端才能连接?形成相同且互补的黏性末端

GA

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G限制酶Ⅰ切割限制酶Ⅱ切割GC

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GA

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DNA连接酶动手试一试

1、基因工程中,需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒,便于重组和筛选。已知限制酶I的识别序列和切点是一G↓GATCC一,限制酶II的识别序列和切点是一↓GATC一。根据图示,判断下列操作正确的是()

A.质粒用限制酶I切割,目的基因用限制酶II切割

B.质粒用限制酶II切割,目的基因用限制酶I切割

C.目的基因和质粒均用限制酶I切割

D.目的基因和质粒均用限制酶II切割A课堂巩固转基因试管牛的培育过程含人血白蛋白基因的重组DNAB从甲雌牛卵巢中获得卵细胞从乙雄牛精巢中获得精子A显微注射DC注:1、2、3为胚胎发育时期;ABCD为生物操作技术体外受精胚胎体外培养胚胎移植受精卵囊胚原肠胚转基因牛“滔滔”卵裂桑椹胚大家来找茬体外受精胚胎移植从卵巢中获得卵母细胞新鲜或解冻的精液受精卵卵母细胞培养试管无需任何处理供体母牛受体母牛超数排卵供体公牛配种受精卵胚胎移植妊娠检查分娩(胚胎移植的犊牛)雌性激素获能处理促性腺激素早期胚胎胚胎体外培养……同期发情……未配种配种转基因试管牛的培育过程含人血白蛋白基因的重组DNA显微注射体外受精从甲雌牛卵巢中获得卵细胞从乙雄牛精巢中获得精子如果想要快速繁殖转基因牛,还可以辅以其他什么技术?胚胎移植胚胎体外培养受精卵囊胚原肠胚转基因牛“滔滔”卵裂桑椹胚基因表达的途径思考:如何检测转基因试管牛是否含有人血白蛋白基因和人血白蛋白基因是否表达?DNAmRNA蛋白质转录翻译(1)内容:①检测转基因生物的染色体DNA上是否含有目的基因(关键)②检测目的基因是否转录出了mRNA③检测目的基因是否翻译成蛋白质(2)常用的技术:①DNA分子杂交技术--DNA与DNA杂交②分子杂交技术--DNA与RNA杂交③蛋白质分子(抗原-抗体)间的杂交课堂巩固2、利用外源基因在受体细胞中表达,可生产人类所需要的产品。下列各项中能说明目的基因完成了在受体细胞中表达的是()A.棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫基因

B.大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及其mRNAC.山羊乳腺细胞中检测到人生长激素DNA序列

D.酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白D课堂巩固3、用限制酶切割一个DNA分子,获得一个目的基因时,被水解的磷酸二酯键有()

A.1个B.2个 C.3个D.4个D课堂巩固4、下列有关试管动物技术的叙述不正确的是()A.体外受精主要包括卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精B.胚胎移植之前需检查精卵细胞的受精状况和受精卵的发育能力C.早期胚胎发育的过程为:受精卵→桑椹胚→卵裂→囊胚→原肠胚D.移植入受体的供体胚胎的遗传特性,在孕育过程中不受影响C课堂巩固5、下图为胚胎移植的基本程序及早期胚胎发育过程,请据图回答:(1)超数排卵技术的处理措施是对供体母牛注射_____________。(2)从A到E中,适宜于牛的胚胎移植时期有_________________。(3)图中标号3为______________,它将来可发育为胎膜和胚盘。促性腺激素D、E滋养层转基因试管牛“滔滔”。武大专家首创稻米生产人血白蛋白技术

2009年11月17日,杨代常主持完成的国家“863”项目“水稻胚乳细胞生物反应器技术平台及其应用”通过专家鉴定,以中国农业大学李宁

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