标准解读

《GB/T 25165-2010 明胶中牛、羊、猪源性成分的定性检测方法 实时荧光PCR法》是一项国家标准，该标准详细规定了使用实时荧光PCR技术对明胶产品中的牛、羊、猪源性成分进行定性分析的方法。其主要目的是为了确保食品及药品安全，避免由于未标注或错误标注动物源性成分而引发的安全问题。

根据此标准，首先需要从待测样品（即含有或疑似含有牛、羊、猪源性成分的明胶制品）中提取DNA。然后通过设计针对特定物种线粒体DNA序列的高度特异性引物与探针组合来进行扩增反应。这里提到的“高度特异性”意味着这些引物和探针能够准确地识别并结合到目标物种特有的DNA片段上，从而保证检测结果的准确性。

在实际操作过程中，将准备好的样本加入到含有上述引物、探针以及必要酶和其他试剂的反应体系中，在特定条件下进行热循环扩增。随着每个循环的完成，如果存在相应的动物源性成分，则会产生荧光信号，并且这种信号强度会随扩增产物数量增加而增强。通过监测整个过程中荧光强度的变化情况，可以判断出样品中是否含有指定的动物源性成分及其相对含量。


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....

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  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2010-09-26 颁布
  • 2011-05-01 实施
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GB/T 25165-2010明胶中牛、羊、猪源性成分的定性检测方法实时荧光PCR法_第1页
GB/T 25165-2010明胶中牛、羊、猪源性成分的定性检测方法实时荧光PCR法_第2页
GB/T 25165-2010明胶中牛、羊、猪源性成分的定性检测方法实时荧光PCR法_第3页
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文档简介

ICS6502030

B43..

中华人民共和国国家标准

GB/T25165—2010

明胶中牛羊猪源性成分的定性检测方法

、、

实时荧光PCR法

Protocolofidentificationofbovinecarineovineandorcinederived

,p,p

materialsingelatin—RealtimePCRmethod

2010-09-26发布2011-05-01实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布

中国国家标准化管理委员会

中华人民共和国

国家标准

明胶中牛羊猪源性成分的定性检测方法

、、

实时荧光PCR法

GB/T25165—2010

*

中国标准出版社出版发行

北京复兴门外三里河北街号

16

邮政编码

:100045

网址

电话

:6852394668517548

中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷

各地新华书店经销

*

开本印张字数千字

880×12301/160.57

年月第一版年月第一次印刷

201011201011

*

书号

:155066·1-40627

如有印装差错由本社发行中心调换

版权专有侵权必究

举报电话01068533533

:()

GB/T25165—2010

前言

本标准由中华人民共和国农业部提出

。

本标准由全国畜牧业标准化技术委员会归口

。

本标准起草单位中国检验检疫科学研究院

:。

本标准主要起草人陈颖吴亚君袁飞王晶徐宝梁张舒亚杨海荣王斌赵勇胜

:、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T25165—2010

明胶中牛羊猪源性成分的定性检测方法

、、

实时荧光PCR法

1范围

本标准规定了明胶中牛羊猪源性成分的实时荧光检测方法

、、PCR。

本标准适用于明胶中牛羊猪源性成分的定性检测

、、。

该方法的检出限为

0.1%。

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款凡是注日期的引用文件其随后所有

。,

的修改单不包括勘误的内容或修订版均不适用于本标准然而鼓励根据本标准达成协议的各方研究

(),,

是否可使用这些文件的最新版本凡是不注日期的引用文件其最新版本适用于本标准

。,。

分析实验室用水规格和试验方法

GB/T6682

食品添加剂明胶

GB6783

饲料采样

GB/T14699.1

实验室质量控制规范食品分子生物学检测

GB/T27403—2008

3术语和定义

下列术语和定义适用于本标准

。

31

.

实时荧光PCRrealtimePCR

在反应体系中加入荧光基团利用荧光信号的积累实时监控整个扩增过程

PCR,PCR。

32

.

Ct值cyclethreshold

每个反应管内的荧光信号达到设定的阈值时所经历的循环数

。

4原理

利用实时荧光技术根据不同物种的特异性基因序列对牛羊猪源性成分进行鉴定利用裂

PCR,、、。

解液破碎细胞酚三氯甲烷抽提蛋白质异丙醇沉淀得到以提取的为模板进行内参照基

,、,DNA;DNA

因的实时荧光检测以确定样品的提取效率通过特异性引物和标记荧光物质探针进行牛

PCR,DNA;、

羊猪源性成分的实时荧光扩增根据扩增反应中每一个循环产物荧光信号的强弱判定实

、PCR,PCR,

现对明胶中牛羊猪源性成分的定性分析

、、

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