VB注射液鉴别实验教学

1维生素B12注射液的定性鉴别及定量分析

1、导入新课

先强调维生素B12的重要性——常用于治疗贫血症，还可对神经炎有一定的疗效。那么我们如何检测某种药物含有维生素B12？若有，含量是多少呢？这节课我们就利用紫外-可见分光光度计对维生素B12注射液进行定性鉴别和定量分析。实验原理

定性鉴别定量分析3、课堂小结注意事项结果讨论⑴

掌握定性鉴别的方法和吸光系数法的定量方法。⑵

熟悉紫外-可见分光光度计的操作方法。⑶了解含量测定、标示量的百分含量的计算方法。一、实验目的二、实验原理结构特点：含钴的卟啉类化合物临床用途：控制贫血、辅助治疗神经炎二、实验原理361nm550nm278nm维生素B12的水溶液在278±1nm、361±1nm与550±1nm三波长处有吸收峰。A361

/A550=3.15~3.45A361/A278=1.70~1.88吸光系数法1、以蒸馏水作为空白参比，测定待测溶液的吸光度Ax；2、计算待测溶液的吸收系数；3、计算标示量（含量）二、实验原理【仪器与试剂】

1.仪器：

紫外-可见分光光度计

2.试剂：

40ug/ml维生素B12溶液三、实验过程1、维生素B12样品溶液的配制：2、以蒸馏水为参比，测定样品溶液的吸光度3、计算样品标示量紫外-可见分光光度计基本结构光源单色器吸收池检测器信号显示系统按材料可分为玻璃吸收池和石英吸收池，前者不能用于紫外区。可见光区常用光源是钨灯或碘钨灯，波长范围是350-1000nm。紫外区常为氢灯或氘灯，波长范围是180-360nm。UV-2000紫外-可见分光光度计的使用方法1.接通电源，开机预热30分钟UV-2000紫外-可见分光光度计的使用2.调节波长UV-2000紫外-可见分光光度计的使用注意：手拿比色皿毛面，高度为比色皿的2/3。3.比色皿加样，依次放入比色槽中UV-2000紫外-可见分光光度计的使用4.调“100%”：光标调到T,将参比溶液对准光路，按“100%”，仪器自动校正；完毕后显示“100.0”，即T=100%。UV-2000紫外-可见分光光度计的使用UV-2000紫外-可见分光光度计的使用5.测定吸光度：将样品溶液对准光路，仪器数值变动；完毕后显示即样品溶液的吸光度。1、每调整一次波长均需要用空白重新调整100%透光率。2、调整波长时，最好朝一个方向旋转。3、开关比色皿暗箱时，动作要轻。4、若吸光度值大于0.8，需把待测试液稀释，使吸光度值在0.2~0.7范围内。5、比色皿的光面只可能用擦镜纸擦拭，并只能顺一个方向擦拭。6、不要在仪器上方倾倒测试样品，以免样品污染仪器表面，损坏仪器。7、一定要将比色皿外部所沾样品擦干净，才能放进比色皿架进行测定。注意事项波长（nm）A峰32770.4212780.4232790.403峰23600.7613610.7783620.756峰15490.2455500.2465510.2431、定性鉴别A361

/A550=3.15~3.45A361/A278=1.70~1.88数据记录2、定量分析样品名称检验日期所用仪器型号检测波长测定序号123吸光度A吸光度平均值结果：含量=计算样品标示量（含量）

对照样品标示量%=90%-110%，合格数据处理结果讨