标准解读
《GB/T 33410-2016 生化试剂中蛋白酶K活性检测方法》是一项国家标准,旨在为生化试剂中的蛋白酶K活性提供统一的测定方法。该标准适用于以牛胰腺或微生物发酵法生产的蛋白酶K活性测定。
根据此标准,蛋白酶K活性的测定基于其对特定底物(如酪蛋白)的水解能力来评估。具体步骤包括准备一系列不同浓度的蛋白酶K溶液,并将其与固定量的底物混合,在一定条件下进行反应。之后,通过测量产物量或者未被分解的底物量来计算酶活性单位。活性单位通常定义为在指定条件下每分钟内能够催化一定量底物转化所需的酶量。
标准还详细规定了实验所需的各种条件,比如pH值、温度、反应时间等参数的选择依据,以及如何准确地配制样品和对照组。此外,对于数据处理部分也有明确指导,包括如何使用标准曲线法确定未知样本的酶活性值,以及误差分析的方法。
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....
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- 现行
- 正在执行有效
- 2016-12-30 颁布
- 2017-07-01 实施
文档简介
ICS7104030
G66..
中华人民共和国国家标准
GB/T33410—2016
生化试剂中蛋白酶K活性检测方法
DeterminationoftheactivityofproteaseKinbiochemicalreagents
2016-12-30发布2017-07-01实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布
中国国家标准化管理委员会
GB/T33410—2016
前言
本标准按照给出的规则起草
GB/T1.1—2009。
本标准由全国生化检测标准化技术委员会提出并归口
(SAC/TC387)。
本标准起草单位深圳市计量质量检测研究院中国测试技术研究院中国标准化研究院
:、、。
本标准主要起草人林霖周李华赖心田兰全学马爱进陈国培李淅潘兰芳杨国武
:、、、、、、、、。
Ⅰ
GB/T33410—2016
生化试剂中蛋白酶K活性检测方法
1范围
本标准规定了生化试剂中蛋白酶活性检测方法
K。
本标准适用于分子生物学实验中使用的蛋白酶活性的测定
K。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文
。,
件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件
。,()。
分析实验室用水规格和试验方法
GB/T6682
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件
。
31
.
蛋白酶K活性单位proteaseKactivityunit
在时内水解酪蛋白产生酪氨酸为一个酶活性单位
55℃,pH8.0,1min1μgL-。
注活性单位为或
:U/mg、U/gU/mL。
4原理
蛋白酶是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶可催化含有较多的丝氨酸位点的酪蛋白水解
K,α-。
本方法中采用酪蛋白为反应底物经蛋白酶催化水解为酪氨酸在处测定吸光度值再
α-,KL-,275nm。
通过测量各个浓度的酪氨酸标准溶液在处的吸光度值并构建标准曲线得出线性回归方程
L-275nm,,
以外标法定量计算蛋白酶的酶活性
。K。
5仪器设备及器具
51恒温水浴锅控温精度
.:±0.2℃。
52计精确至
.pH:0.01pH。
53紫外可见分光光度计吸光度值精确至
.-:0.001。
54石英比色皿
.1cm。
55电子天平感量
.:0.0001g。
6试剂
除非另有规定本方法所用试剂均为分析纯水为规定的
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