GB/T 5009.158-2003蔬菜中维生素K1的测定

ICS67.040C53中华人民共和国国家标准GB/T5009.158-2003蔬菜中维生素K，的测定DeterminationofvitaminK,invegetables2003-08-11发布2004-01-01实施中华人民共和国卫生部发布中国国家标准化管理委员会

中华人民共和国国国家标准菜中维生素K,的测定GB/T5009.158-2003中中国标准出版社出版发行北京西城区复兴门外三里河北街16号邮邮政编码：100045电话：63787337、637874472004年8月第一版2004年11月电子版制作书号：155066·1-21574版权专有侵权必究举报电话：（010)68533533

GB/T5009.158-2003前本标准对应于AOAC.45维生素和营养素部分食物中维生素D的测定(1995年英文版),本标准与AOAC.45的一致性程度为非等效。本本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口本标准起草单位：中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所本标准主要起草人：王竹、王光亚、周瑞华、王国栋、杨月欣。

GB/T5009.158-2003本标准参考AOAC.45维生素和营养素部分食物中维生素D的测定(1995年版)的前处理过程,以磷酸盐处理过的氧化铝为色谱柱.应用高效液相色谱反相柱对蔬菜中维生素K，进行定性及定量分析

GB/T5009.158—2003蔬菜中维生素K，的测定范围本标准规定了蔬菜中维生素K，的测定方法本标准适用于各类蔬菜、绿色植物及其干制品中维生素K，的测定本标准方法出限为0.5g，线性范围为1Pg/mL～100g/mL.原理蔬菜中的维生素K，经石油醚提取后,注入经磷酸盐处理的氧化铝色谱柱中进行色谱分离，除去干扰物。收集含维生素K，的淋洗液流分.浓缩定容后注入高效液相色谱柱，用紫外检测器,在248Dm处测定。以外标法计算试样中维生素K，的含量。武剂和材料色谱用水和有机溶剂使用前均需重新蒸。无无水硫酸钠：使用前需在150℃的烘箱内烘烤4h～8h,以去除水分。3.2.14mol/L硫酸钠溶液：称取20无水硫酸钠,用蒸留水溶解后定容至1L3.3丙酮3.4石油醚：沸程30C~60C、3.5乙醚：不含过氧化物3.5.1过氧化物的检查方法:用5mL乙醚加1ml.0.6mol/L碘化钾溶液，振摇1min,如有过氧化物则放出游离碘，水层呈黄色。或加4滴5g/L淀粉液，水层呈蓝色。则该乙醚含有过氧化物需处理后使用。3.5.2去除过氧化物的方法：重蒸时瓶中加一段纯铁丝·弃去首尾10%部分·收集留出的乙醚。再检查过氧化物·应符合要求。3.6洗脱液：石油醚+乙醚（97+3）37甲醇：优级纯。3.8正己烷：优级纯3.9中性氧化铝：层析用.100目～200目3.9.1氧化铝的处理：取250g中性氧化铝.20g磷酸氢二钠,1.6L水，放入容积为2L的锥形瓶中.置于沸水浴30min.不时摇动。冷却.倒掉上层液体(包括悬浮的细小颗粒).然后用布氏漏斗抽滤。将残留物转至平底玻璃血中.于150℃干燥箱中烘烤3h～5h至两次称量相差3g以下。烘烤过程中不时搅拌，以避免结块冷却后放入干燥器中保存。3.9.2失活:将磷酸盐处理的氧化铝(3.9.1).加入具塞锥形瓶中。按每100g氧化铝加9.0mL水的比例加入去离子水,盖紧瓶塞,蒸汽浴或80C干燥箱加热3min～5min,剧烈摇动锥形瓶，使氧化铝可以自由流动.无结块。冷却.静置30min使水分分布均勾。3.9.3氧化铝的检验：取标准使用液1.0mL.用氮气(3.11)吹干，再用石油醚(3.4)溶解定容至1.0mL.然后按装柱,将标准溶液加入柱上·按色谱分离步骠进行柱色谱,用旋转蒸发瓶(4.5.1)收集含有维生素K，的洗脱分,浓缩，氮气吹干,用正己烷(3.8)定容至1.0mL。进样HPLC测定,记录峰面积或峰