探究培养液中酵母菌种群数量的变化

探究培养液中酵母菌种群数量的变化一、实验目的

（一）通过探究培养液中酵母菌种群数量的变化，来研究一个种群的数量变化情况，尝试构建种群增长的数学模型。

（二）通过使用血球计数板掌握单细胞生物的计数方法。二、实验原理

（一）酵母菌可以用液体培养基来培养，培养液中的酵母菌种群的增长情况与培养液中的成分、空间、PH、温度等因素有关，我们可以根据培养液中的酵母菌数量和时间为坐标轴做曲线，从而掌握酵母菌种群数量的变化情况。二、实验原理

（二）利用血球计数板在显微镜下直接计数是一种常用的细胞计数法，这种方法可以直接测定样品中全部的细胞数目，所以一般用于单细胞微生物数量的测定，由于血球计数板上的计数室盖上盖玻片后的容积是一定的，所以可根据在显微镜下观察到的细胞数目来计算单位体积的细胞的总数目。三、探究问题

培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？四、作出假设

在有限的环境条件下，酵母菌种群的数量随时间呈__

_型增长变化。S五、材料用具

酵母菌菌种，无菌马铃薯培养液或肉汤培养液，无菌水，试管，棉塞，恒温培养箱，显微镜，无菌滴管，无菌移液管，小烧杯或小试管，血球计数板(2mm×2mm)、纱布、滤纸、镊子、盖玻片等。一、血球计数板1、血球计数板的结构

血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物数量的仪器，由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的玻片中有四条下凹的槽，构成三个平台。中间的平台较宽，其中间又被一短横槽隔为两半，每半边上面刻有一个方格网。大方格中方格小方格

方格网上刻有9个大方格，其中只有中间的一个大方格为计数室，供微生物计数用。

大方格的长和宽各为1mm，深度为0.1mm，即1mm×1mm×0.1mm，其容积为0.1mm3；大方格的长和宽各为2mm，深度为0.1mm，即2mm×2mm×0.1mm，其容积为0.4mm3计数室通常也有两种规格16×25型：即大方格内分为16中格，每一中格又分为25小格25×16型：即大方格内分为25中格，每一中格又分为16小格。

不管计数室是哪一种构造，其每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成。

2、计数16×25型：

一般取四角的四个中方格（100个小方格）计数25×16型：一般计数四个角和中央的五个中方格（80个小方格）的细胞数。

3、计算

以1mm×1mm×0.1mm型为例计数室容积为0.1mm3，则每个小方格的容积为1/4000mm3

。100个小方格细胞总数/100×400×10000×稀释倍数

酵母细胞个数／1mL=80个小方格细胞总数/80×400×10000×稀释倍数

例1通常用血球计数板对培养液中酵母菌进行计数，若计数室为1mm×1mm×0.1mm方格，由400个小方格组成。若多次重复计数后，算得每个小方格中平均有5个酵母菌，则10mL该培养液中酵母菌总数有

个。2×108例2检测员将1mL水样稀释10倍后，用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量；将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取少许培养液使其自行渗入计数室，并用滤纸吸去多余液体。已知每个计数室由25×16＝400个小格组成，容纳液体的总体积为0．1mm3。

现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e5个中格80个小格内共有蓝藻n个，则上述水样中约有蓝藻

个／mL。5n×1051.怎样进行酵母菌的计数。抽样检测培养液厚度为0.1mm，可算出10ml培养液中酵母菌总数的公式：2.5×104x(x为小方格内酵母菌数)2.从试管中吸出培养液进行计数之前，要将试管轻轻振荡几下，为什么？使酵母菌细胞分布均匀，减少实验误差。3.本实验需要设置对照？如果需要,请讨论对照组应怎样设计和操作，如果不需要，请说明理由。不需要，本实验旨在探究培养液中酵母菌在一定条件下的种群数量变化，不同的时间量已经起到相互对照。4.需要做重复实验吗？不用重复，只要分组重复实验获得平均值即可。

5.如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应当采取怎样的措施？

摇匀试管取1mL酵