GMP质量体系复方丹参片中间产品检验操作规程

目的：为检验复方丹参片中间产品规定一个标准的程序,以便获得准确的实验数据.范围：适用于复方丹参片中间产品的检验。职责：检验员，检验室主任对本规程实施负责。规程：性状：本品为糖衣片，除去包衣后显褐色；气芳香，味微苦。鉴别2.1试剂与仪器2.1.1丹参酮ⅡA对照品 2.l.2冰片对照品2.1.3乙醚 2.1.4醋酸乙酯2.1.5苯-醋酸乙酯(19:1) 2.1.61%香草醛硫酸溶液2.1.7甲醇 2.1.8正丁醇2.1.9氨试液 2.1.10三七皂苷R1对照品2.1.11人参皂苷Rb1对照品 2.1.12人参皂苷Rg1对照品2.1.13氯仿-甲醇-水(13:7:2) 2.1.14硫酸乙醇溶液(1→10)2.1.15硅胶G薄层板 2.1.16研钵2.1.17超声波清洗器 2.1.18容量瓶(10ml)2.1.19电子天平(十万分之一克) 2.1.20烧杯、量筒2.1.21电炉 2.1.22烘箱2.1.23球形冷凝管 2.1.24铁架台2.1.25层析缸 2.1.26微量进样器2.1.27移液管(2ml,1ml) 2.1.28喷雾器2.1.29漏斗漏斗架2.2项目与步骤2.2.1取本品5片，除去糖衣，研碎，加乙醚10ml，超声波处理5分钟，滤过，药渣备用，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯2ml使溶解，作为供试品溶液，另取丹参酮ⅡA、、冰片对照品，分别称取0.50mg置10ml量瓶中，各加入醋酸乙酯溶解稀释至刻度，作为对照溶液，照薄层色谱法(SOP-QC-306-00)试验，吸取上述三种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯(19:1)为展开剂，展开，取出晾干。供试品色谱中，在与丹参酮ⅡA对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；喷以1%香草醛硫酸溶液，在110℃加热数分钟，在与冰片对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点为符合规定。2.2.2取[鉴别]2.2.1项下的药渣，加甲醇25ml，加热回流15分钟，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水25ml，微热使溶解，加水饱和的正丁醇25ml，振摇提取，取正丁醇提取液，用氨试液25ml洗涤弃去氨试液，再用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次25ml，正丁醇液浓缩至干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取三七皂苷R1对照品及人参皂苷Rb1，Rg1对照品，分别精密称取10mg置10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，作为对照品溶液。照薄层色谱法(SOP-QC-304-00)试验，吸取上述四种溶液各1ml，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水（13：7：2）放置分层的下层溶液为展开剂，展开，取出晾干，喷以硫酸乙醇溶液（1→10）立即于110—120℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，为符合规定。3检查3.1试剂与仪器3.1.1崩解仪3.2项目与步骤3.2.1崩解时限:取本品6片,按崩解时限检查法(SOP-QC-330-00)检查,应在1小时内全部崩解,为符合规定。4含量测定4.1试剂与仪器4.1.1C18硅胶色谱柱4.1.2丹参一酮ⅡA对照品4.1.3甲醇4.1.4注射器(10ml)过滤器、滤膜4.1.5电子天平(十万分之一克)4.1.6高效液相色谱仪4.2检验步骤按高效液相色谱法(SOP-QC-306-00)检测4.2.1色谱条件与系统适用性试验:用C18硅胶色谱柱，流动相为甲醇-水(73：27)，流速为每分钟0.9ml，检测波长为270nm，量取丹参酮ⅡA对照溶液[*]10ul注入液相色谱仪中，理论板数按丹参酮ⅡA峰计算应不低于2000。4.2.2丹参酮ⅡA对照溶液与样品溶液的制备以及测定[*]丹参酮ⅡA对照溶液制备:精密称取丹参酮ⅡA对照品10mg，置50ml棕色量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置25ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为对照溶液。样品溶液的制备以及测定:取本品10片，除去糖衣，精密称定，研细，取1g精密称定，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理15分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，取续滤液量取10ul，注入液相色谱仪,将对照溶液按同法测定，按下式计算本每片含丹参酮ⅡA(C19H18O3)计,不得少于0.2mg为符合规定。CW:样品每片含丹参酮ⅡA的含量(mg)；A1:样品溶液中含丹参酮ⅡA的峰面积；A