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文档简介
第4课时微生物的实验室培育(一)[学习导航]1.阅读教材P“(一)培育基”,掌握培育基的作用、分类及营养成分。2.阅14读教材P15“(二)无菌技术”,划分消毒和灭菌,掌握不一样物件的灭菌方法。[重难点击]1.认识培育基的基本知识。2.学会无菌操作的基本知识。一、培育基观点:人们依照微生物对营养物质的不一样需求,配制出供其生长生殖的营养基质。液体培育基2.种类↓加入凝结剂固体培育基成分主要成分:水、碳源、氮源、无机盐。其余成分:还需要知足微生物生长对pH、特别营养物质以及氧气的要求。填表达成牛肉膏蛋白胨培育基的营养构成培育基组分供给的主要营养牛肉膏碳源、氮源、磷酸盐和维生素蛋白胨碳源、氮源和维生素NaCl无机盐H2O氢元素、氧元素某些微生物生长还需要特别的条件,填表达成培育以下微生物时所需要的特别条件培育的微生物需要知足的其余要求乳酸杆菌培育基中增添维生素霉菌将pH调至酸性细菌将pH调至中性或微碱性厌氧微生物需要供给无氧条件培育基的成分与作用试依据微生物的同化作用种类将微生物进行分类。答案分为自养型微生物和异养型微生物。试从碳源和氮源的角度剖析不一样种类的微生物所需的培育基成分的特色。自养型微生物异养型微生物碳源CO2、NaHCO3等无机物糖类等有机物氮源NH3、硝酸盐等无机物尿素、蛋白质等有机物牛肉膏蛋白胨培育基牛肉膏蛋白胨培育基中供给碳源和氮源的物质各是什么?答案牛肉膏和蛋白胨都能够为微生物供给碳源和氮源。牛肉膏蛋白胨培育基中主要供给碳源和主要供给氮源的物质各是什么?答案主要供给碳源的是牛肉膏,主要供给氮源的是蛋白胨。概括总结培育基的成分及功能营养因素含义作用主要根源凡能供给所需碳构成生物体细胞的物质无机碳源:CO2、NaHCO3等;碳源和一些代谢产物,有些有机碳源:糖类、脂肪酸、元素的物质是异养生物的能源物质花生饼粉、石油等无机氮源:NH、铵盐、硝酸3凡能供给所需氮合成蛋白质、核酸以及盐等;氮源元素的物质含氮的代谢产物有机氮源:尿素、牛肉膏、蛋白胨等生长因子(特生长必不行少的酶和核酸的构成成分维生素、氨基酸、碱基等殊营养物质)微量有机物在生物体内含量不单是优秀的溶剂,而水很高,在低等生物且可保持生物大分子结培育基、大气、代谢产物等体内含量更高构的稳固为微生物供给除细胞内的构成成分;生碳、氮元素之外的理调理物质;某些化能无机盐各样重要元素,包自养菌的能源;酶的激培育基、大气等环境括某些大批元素活剂1.以下对于培育基的说法正确的选项是( )培育基是为微生物的生长生殖供给营养的基质培育基只有两类:液体培育基和固体培育基除水之外的无机物只好供给无机盐无机氮源不行能供给能量答案A分析依据培育基的物理性质,可分为液体培育基、半固体培育基和固体培育基,在液体培养基中加入不一样量的凝结剂如琼脂可形成半固体或固体培育基;除水之外的无机物如NH4HCO3,既能够是碳源,也能够是氮源,不不过供给无机盐;无机氮源有时也能供给能量,如NH3能够为硝化细菌供给能量。方法链接培育基的种类分类标准培育基种类培育基特色固体培育基外观固态容器放倒不致流出,激烈
作用微生物的分别、计数等物理性质
半固体培育基
察看微生物的运动、判定菌种等液体培育基选择培育基
振动则破散呈液态同意特定种类的微生物生长,同时克制或阻挡其他微生物生长
常用于工业生产选择、分别功能依据微生物的代谢特色,鉴识培育基在培育基中加入某种指示剂或化学药品成分天然培育基化学成分还不清楚根源合成培育基化学成分完整认识2.以下培育基配方中能作为选择培育基、鉴识培育基的挨次是原料①②蛋白胨/g1010乳糖/g55蔗糖/g55
判定工业上大规模的微生物发酵生产在实验室用来对微生物剖析( )③④10105555KH2PO4/g
2
2
2
2伊红/g
0.4美蓝/g
0.065琼脂/g
10
20NaCl/g
20蒸馏水
/mL
1000
1000
1000
1000A.①③B.②①C.②④D.③①答案D分析在培育基中加入伊红和美蓝,能够用来鉴识能否存在大肠杆菌,有伊红和美蓝的培育基为鉴识培育基。高浓度的食盐能够克制多种细菌的生长,但不影响金黄色葡萄球菌的生长,进而能够将金黄色葡萄球菌分别出来,有高浓度食盐的培育基为选择培育基。一题多变表格中的蛋白胨主要为微生物供给何种营养成分?答案主要为微生物供给碳源、氮源和维生素。乳糖和蔗糖在培育基中的作用是什么?答案能够为微生物供给碳源和能源。假如用培育基培育某种自养微生物,则该配方中的哪一种物质能够去除?答案乳糖和蔗糖。题后总结有关培育基营养物质的四点提示培育不一样的微生物所需要的营养物质可能不一样。①自养型微生物的培育基主要以无机营养为主。②异养型微生物的培育基主要以有机营养为主。对异养微生物来说,含C、H、O、N的化合物既是碳源,又是氮源、能源。微生物需要增补生长因子,是因为缺乏合成这些物质所需要的酶或合成能力有限。微生物需要量最大的是碳源。能合成含碳有机物的是自养型,反之则为异养型。二、无菌技术目的:获取纯净培育物。重点:防备外来杂菌的入侵。两种无菌技术的比较比较项目消毒作用强度较为平和的理化因素作用程度杀死物体表面或内部的部分微生物芽孢和孢子一般不可以杀灭
灭菌激烈的理化因素杀死物体内外的所有的微生物能杀灭操作空间、活体生物资料、操作者衣合用对象
操作工具、玻璃器皿、培育基等着和双手常用方法
煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂
灼烧灭菌法、干热灭菌法、高压蒸消毒法、紫外线消毒法汽灭菌法“无菌操作”与人们的生活休戚有关,无时无处不在。在平时生活、生产实践、自己健康防备中,有哪些“无菌操作”的例子?答案平时生活、生产实践、自己健康防备中“无菌操作”的例子分别有:(1)被褥、鞋袜要常晒;肉制品储藏时用盐腌等。(2)牲畜阉割后,要在其伤口处涂抹一些酒精或白酒;初冬杨树树干涂刷生石灰水等。(3)打针时,注射部位要用酒精棉球擦洗,一般要在其伤口处涂抹一些碘酒。消毒和灭菌的原理是什么?消毒和灭菌都能杀死所有的微生物吗?能否合用于所有的生物和物件?答案(1)都是使微生物的蛋白质变性,借此杀死微生物。灭菌可杀死办理资猜中的所有微生物(包含芽孢和孢子),而消毒仅能杀死物体表面或内部的部分微生物(一般不包含芽孢和孢子)。(3)不是,无菌技术既要考虑成效,又要考虑操作对象的承受能力。比如,活体生物资料、操作者的双手等只好消毒,而不可以灭菌。无菌技术除了用来防备实验室的培育物被其余外来微生物污染外,还有什么目的?答案还可以有效防止污染环境以及操作者自己被微生物感染。不论是接种微生物仍是制备培育基中的倒平板,都要在酒精灯火焰邻近进行,请简述原由。答案在酒精灯火焰邻近进行接种或倒平板,目的是造成一个无菌环境,防止操作过程中遇到杂菌的污染。3.高温灭菌的原理是( )每种微生物生长的最适温度是必定的微生物对于高温环境不适应高温损坏了微生物细胞内的蛋白质、核酸,影响其生命活动高温降低了环境中氧的浓度答案C分析高温的致死作用主假如使微生物的蛋白质和核酸等重要生物大分子物质发生不行逆转的变性。培育基、培育皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采纳的灭菌或消毒方法挨次是( )①化学消毒②灼烧灭菌③干热灭菌④紫外线消毒⑤高压蒸汽灭菌⑥巴氏消毒法A.⑤③②①④⑥B.①②③④⑤⑥C.⑥②③④①⑤D.③④②①⑥⑤答案A分析培育基用高压蒸汽灭菌;培育皿能耐高温,需用干热灭菌;接种环可用灼烧灭菌达到快速完全的灭菌成效;实验操作者的双手可用化学药剂进行消毒,如用酒精擦抹双手;对空气可用紫外线消毒;为了不损坏牛奶的营养成分,可采纳巴氏消毒法对其进行消毒。一题多变接种环灼烧灭菌后为何不可以立刻接触菌液?答案因为刚才灼烧后的接种环温度较高,立刻接触菌液会将菌种杀死。选择无菌操作方法的依照除了无菌操作的目的外还有什么?答案还要依照无菌操作的对象。特别提示(1)酒精消毒液中酒精浓度对成效的影响:70%的酒精杀菌成效最好。原由是浓度过高,菌体表面蛋白质变性过快而凝结成一层保护膜,酒精不可以浸透此中;浓度过低,杀菌能力减弱。无菌技术举措的选择原则①考虑成效:灭菌的成效比消毒要好。②考虑操作对象的承受能力:活体生物资料、操作者的手等只好采纳消毒的方法,而不可以采纳灭菌的方法。1.不一样的微生物对营养物质的需求各不同样。以下对一种以CO2为独一碳源的自养型微生物营养的描绘中,不正确的选项是( )氮源物质为该微生物供给必需的氮元素碳源物质也是该微生物的能源物质无机盐是该微生物不行缺乏的营养物质水是该微生物的营养因素之一答案B分析该微生物以CO2为独一碳源,但CO2不可认为微生物供给能量,不属于能源物质。2.自养微生物与异养微生物的培育基的主要差异是( )A.碳源B.氮源C.无机盐D.生长因子答案A分析自养微生物能够利用二氧化碳和水合成有机物,不利用现成的含碳有机物;而异养微生物只好利用现成的含碳有机物,所以它们的主要差异是碳源不一样。3.以下对于灭菌和消毒的理解,不正确的选项是( )灭菌是指杀灭环境中的全部微生物的细胞、芽孢和孢子消毒和灭菌实质是同样的接种环用灼烧法灭菌常用的灭菌方法有加热法、过滤法、紫外线法、化学药品法答案
B分析
灭菌与消毒是两个观点。
灭菌的原理是使蛋白质凝结变性,
含水分许多者,其凝结所需温度较低。灭菌时要依据不一样的资料采纳不一样的灭菌方法,
如接种环用火焰灼烧法,
培育基用高压蒸汽灭菌法,还有加热法、过滤法、紫外线法、化学药品法等。消毒是指派用较为平和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物(不包含芽孢和孢子)。不一样的微生物对营养物质的需求各不同样,但一般都需要水、碳源、氮源和无机盐。以下有关微生物所需营养物质的描绘,正确的选项是( )氮源物质只好为该微生物供给必需的氮元素有些碳源也能够给微生物的生长供给能源无机盐是微生物不行缺乏的营养物质,所以无机盐越多越好固体培育基中不含水分答案B分析含氮的有机物既可给微生物供给氮元素,也可给微生物供给能源。含碳的有机物既可给微生物供给碳元素,也可给微生物供给能源。微生物生长需要无机盐,但不是越多越好,过多会致使培育基浸透压过高,使微生物因失水过多而不可以生计。固体培育基中也含有水分,因为含有凝结剂琼脂,所以呈固态。5.以下实验资料和器具的无菌操作中,的是。①培育基②外植体③操作者双手
适合使用消毒方法的是④锥形瓶⑤接种环
⑥牛奶
,适合使用灭菌方法⑦工作台⑧培育皿答案②③⑥⑦①④⑤⑧课时作业[学考达标]1.对于微生物的营养,以下说法正确的选项是( )同一种物质不行能既作碳源又作氮源凡是碳源都能供给能量除水之外的无机物仅供给无机盐无机氮源也可能供给能量答案D分析对一些微生物来说,含C、H、O、N的化合物既是碳源,又是氮源。CO2是光能自养细菌的碳源,但不可以供给能量。CO2和N2是无机物,也是微生物的碳源和氮源。硝化细菌所利用的氮源是无机氮源氨,同时氨也为硝化细菌供给用以化能合成作用的能源。2.以下对于培育基的说法,正确的选项是( )为微生物的生长生殖供给营养基质的是固体培育基培育基只有两类:液体培育基和半固体培育基固体培育基中加入少许水即可制成液体培育基微生物在固体培育基上生长时,能够形成肉眼可见的菌落答案D分析培育基是微生物生长生殖的营养基质,依据培育基的物理性质不一样,可将培育基分红固体培育基、液体培育基和半固体培育基;液体培育基不加凝结剂。3.下表是对四种生物的能源、碳源、氮源、新陈代谢种类的描绘,正确的一组是()选项项目硝化细菌乳酸菌根瘤菌衣藻A能源NH3乳酸N2光能B碳源CO糖类等糖类等CO22C氮源NH3N2N2-NO3D代谢种类自养需氧型异养厌氧型自养需氧型自养需氧型答案B分析从能源来看,乳酸菌需糖类等有机物供能;从氮源来看,乳酸菌需要+-;从NH4、NO3代谢种类来看,根瘤菌为异养需氧型;从碳源来看,硝化细菌与衣藻需CO2,乳酸菌和根瘤菌需糖类等有机物。4.以下选项中不含有微生物的是( )A.洗洁净的脸上B.洗完澡后的皮肤C.刷完牙后的口腔D.灼烧以后的接种环答案D分析用清水洗脸、沐浴、刷牙不过起洁净作用,达不到灭菌成效,只有灼烧过的接种环才是真实无菌的。5.将配制好的培育基进行灭菌,应用的是( )A.灼烧灭菌B.高压蒸汽灭菌C.干热灭菌D.煮沸灭菌答案B细菌培育过程中分别采纳了高压蒸汽灭菌、酒精擦抹、火焰灼烧等几种不一样的办理方法,这些方法挨次用于杀死哪些部位的杂菌( )A.接种环、手、培育基B.高压锅、手、接种环C.培育基、手、接种环D.接种环、手、高压锅答案C分析高压蒸汽灭菌锅是灭菌的一个设施,往常用于培育基的灭菌;用酒精擦抹双手是消毒的一种方法;火焰灼烧,能够快速完全地灭菌,合用于微生物的接种工具,如接种环。[高考提能]7.在微生物的实验室培育中,以下各项操作不需要在无菌条件下进行的是( )A.配制培育基B.倒平板C.接种D.培育答案A分析配制培育基时不需要无菌操作,因为配制好的培育基需要进行高压蒸汽灭菌。甲、乙、丙为三种微生物,下表中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ是用来培育微生物的三种培育基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生长生殖;甲能在Ⅰ中正常生长生殖,而乙和丙都不可以;乙能在Ⅱ中正常生长生殖,甲、丙都不可以。以下说法正确的选项是( )培育粉状硫KHPO4FeSO0蔗糖HOMgSO924424基10gg.5g10g(NH4)2SO40.4g100mL.25gCaCl20.5gⅠ++++-+++Ⅱ+++-++++Ⅲ++++++++注:“+”表示培育基中加入了这类物质,“-”表示培育基中没有加入这类物质。甲、乙、丙都是异养微生物甲、乙都是自养微生物,丙是异养微生物甲是异养微生物,乙是固氮微生物,丙是自养微生物甲是固氮微生物,乙是自养微生物,丙是异养微生物答案D分析Ⅰ是无氮培育基,只有能固氮的微生物才能在其上生殖;Ⅱ是不含有机碳源的培育基,只有自养微生物才能在其上生殖。牛肉膏蛋白胨培育基中加入琼脂这一理想的凝结剂,以下对于琼脂的说法不正确的选项是( )不被所培育的微生物分解利用,对所培育的微生物无迫害作用在微生物生长温度范围内保持固体状态琼脂凝结点低,利于微生物的生长琼脂在灭菌过程中不会被损坏,透明度好,凝结力强答案
C分析琼脂作为一种理想的凝结剂,是由其性质决定的,琼脂不会被微生物利用且对微生物无迫害作用,在灭菌过程中不会被损坏,透明度好,凝结力强。琼脂在98℃以上可溶解于水,在45℃以下凝结,所以在微生物生长温度范围内保持固体状态。10.以下对于无菌操作的表达,错误的选项是( )对实验操作的空间、操作者的穿着和手进行灭菌将用于微生物培育的培育器皿、接种器具和培育基等进行灭菌为防止四周环境中微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰邻近进行实验操作时应防止已经灭菌办理的资料器具与四周物件相接触答案A分析对实验操作的空间、操作者的穿着和手进行洁净和消毒而不是灭菌。请你判断以下资料或器具能否需要消毒或灭菌。假如需要,请选择适合的方法:培育细菌用的培育基;玻璃棒、试管、烧瓶和吸管;实验操作者的双手。判断:(1);(2);(3)。答案(1)需要灭菌;用高压蒸汽灭菌锅灭菌(2)需要灭菌;干热灭菌箱灭菌(3)需要消毒;用75%酒精擦抹双手12.为了检测饮用水中能否含有某种细菌,
配制的培育基的配方以下,
请剖析回答以下问题:蛋白胨
乳糖
蔗糖
K2HPO4
伊红
美蓝
蒸馏水10g
5g
5g
2g
0.4g
0.065g
1000mL将培育基pH调至7.2(1)该培育基所含碳源有,其功能是。(2)该培育基所含氮源有,其功能是。(3)该培育基除含碳源、氮源外,还有微生物需要的营养物质是。(4)该细菌在同化作用上的代谢种类是型。(5)该培育基可用来鉴识哪一种细菌()A.霉菌B.酵母菌C.大肠杆菌D.乳酸菌答案(1)乳糖、蔗糖、蛋白胨主要用于构成微生物的细胞物质和一些代谢产物(2)蛋白胨主要用于合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物水、无机盐(或K2HPO4)异养(5)C分析依据培育基的配方,该培育基培育异养微生物,含C、H、O、N的蛋白胨既是碳源,又是氮源。培育微生物需碳源、氮源、水、无机盐、生长因子等营养物质。伊红美蓝培育基可用来判定能否含有大肠杆菌。剖析有关微生物的资料,回答以下问题。1982年澳大利亚学者从胃活检组织中分别出幽门螺杆菌。(1)幽门螺杆菌的遗传物质集中散布的地区称为。(2)上图4支试管分别代表4种微生物在半固体培育基(琼脂含量3.5g/L)中的生长状态,此中②号试管代表幽门螺杆菌的生长状态,由图判断,该菌在的条件下不可以生长。产甲烷细菌的生长状态最可能由试管代表。下表是某培育基的配方。成分
葡萄糖
KH2PO4
MgSO4
NaCl
CaSO4
CaCO3
琼脂
蒸馏水含量
10g
0.2g
0.2g
0.2g
0.2g
5g
3.5g
1L将幽门螺杆菌接种到
pH适合的该培育基中,置于
37℃下培育一段时间后,在该培育基中幽门螺杆菌的数目比刚接种时
,主要原由是
。幽门螺杆菌形态以以下图所示,该菌在人体中可惹起胃溃疡等胃部疾病。幽门螺杆菌生长的最适pH为6~7,人体胃腔内pH在1~2之间,但胃黏膜的粘液层凑近上皮细胞侧pH为7.4左右。若幽门螺杆菌随食品进入胃腔,联合其构造特色以及能致使胃溃疡的特征,推断该菌在胃内怎样存活?。答案(1)拟核(核区)(2)氧气浓度过高或过低③少缺乏氮源(缺乏氮源和生长因子)幽门螺杆
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