WHO第五人类精液及精子宫颈粘液相互作用之精液分析的改变演示文稿

WHO第五版人类精液及精子宫颈粘液相(Xiang)互作用之精液分析的改变演示文稿第一页，共三十四页。WHO第五版人类精液(Ye)及精子宫颈粘液(Ye)相互作用之精液(Ye)分析的改变第二页，共三十四页。背(Bei)景1980年出版第一版“人类精液及精子—宫颈精液实验实检验手册”（生育调节）1987年出版第二版（生育调节、不育症的诊治）1992年出版第三版（生育调节、不育症的诊治、环境污染）1999年出版第四版（辅助生育技术-ICSI、环境污染）第三页，共三十四页。背(Bei)景以往精液分析存在问题：检测方法不一结果带有主观性、不客观、不真实精确度低、重复性差对男性生育力的评估、临床诊断应用价值很有限因此，需要一个标准化的手册第四页，共三十四页。2010年出版第五版随着近年来男科学和生殖医学的快速发展，基于循证医学的证据，不少原有的概念和诊疗建议需要修订；为此(Ci)，WHO组织成立了专门的委员会来负责这项工作，编写制订了新一版的手册，以期达到更好的标准化，提高精液分析的质量。第五页，共三十四页。修改WHO人类精液检(Jian)查手册的目的提高精液分析各参数的准确性简化方法，提高可操作性提供质控结果不良时的应对提示及细节利于实验室间的标准化提高精液分析各参数的临床应用价值（结果判断评述）提高疗效评估的准确性第六页，共三十四页。第5版《手册(Ce)》提纲一、精液分析标准程序：常规分析、抗体包被精子、非精子成分；可供选择的试验：精子多发性缺陷指数、白细胞免疫细胞化学染色、精子宫颈粘液相互作用、精浆生化、CASA；研究试验：活性氧、顶体反应、精子卵细胞相互作用作用、精子透明带结合、去透明带仓鼠卵穿透试验、精子染色质检测等。第七页，共三十四页。“精液分析”部分的修订主要(Yao)涉及：精子浓度和精子总数的测定；精子活动力分级；精子形态学评估；精液参考值范围。第八页，共三十四页。精液(Ye)采集和体积测定根据重量间接计算精液体积，假定精液比重为1g/ml（实际为1.014g/ml)来计算。（首选方法）1.秤取容器的重量，2.秤取装有精液的容器的重量，3.计算重量之差（g=ml)精确测量精液体积（精度为0.1mL）第九页，共三十四页。精液(Ye)采集和体积测定不推荐方法（在收集管中的转移）第十页，共三十四页。精子浓度和(He)精子总数的测定简化精液稀释方法及增加计数池的面积，每份标本均采用两次取样、两次稀释和两次计数，每次计数至少200个精子，且两次计数在95%可信区间内。一次射精中的精子总数能够提供反映睾丸功能的更为精确的信息，因此，新版手册强调必须精确地测定精液体积。第十一页，共三十四页。精子浓度(Du)和精子总数的测定弃用精子密度的概念，改为精子浓度精子浓度：每毫升精液中的精子数参考值下限：精子浓度（106/L）：15原因：浓度：指一定体积的精液中所含的精子数目密度：单位体积所具有的精子质量第十二页，共三十四页。精子(Zi)浓度和精子(Zi)总数的测定强调一次射精的总精子数—更能反映睾丸的生精功能。精子总数：每次射出精液中的精子总数（精子浓度*精液量）参考值下限：精子总数（106/次射精）：39第十三页，共三十四页。精子浓度(Du)和精子总数的测定年轻人老年人差异精子浓度（106/mL）7364NS精液量（mL）3.21.8P＜0.05精子数量（106/ejac）20674P＜0.052004年临床意义：总精子数：反映睾丸精子产出量的直接指标精子浓度：受精囊腺和前列腺分泌液量的影响第十四页，共三十四页。精子(Zi)浓度和精子(Zi)总数的测定显微镜的要求：精子浓度和活力必须用相差显微镜无论是手工方法还是CASA都要求使用原因：相差显微镜下：精子头部呈亮色普通显微镜下：精子头部呈灰色发亮的精子头部容易与灰色的杂质区分第十五页，共三十四页。精子(Zi)浓度和精子(Zi)总数的测定20倍正相差物镜下精子图像第十六页，共三十四页。精子(Zi)浓度和精子(Zi)总数的测定精子计数的质控要求：每份标本重复取样2次，各自计数200个精子；且两次计数在95%可信区间内。结果可以接受（取两次的均值）；超过误差范围的必须重新取样重复计数2次。第十七页，共三十四页。检查注(Zhu)意事项1、禁欲时间：第3-7天2、环境：单独取精室，安静，舒适3、取精方式：手淫或取精器4、不要太劳累5、询问：是否排出全部精液是否收集全部精液第十八页，共三十四页。精子活动力(Li)检测精子前向运动的情况与受孕具有密切的关联；新版手册中一个重要的修订是精子活动力的分类方法。精子活动力的分类前向运动精子（PR)——a+b

非前向运动精子（NP)——c

不运动精子（IM)——d参考值下限：前向运动精子（PR，%）：32第十九页，共三十四页。每份标本制备双份涂片进行重复分析每张图片至少分析200个精子且两次结果差异在95%可信区间内。结果可以接受（取两次的均值）；超过误差范围的必须重新读片（不(Bu)必重新制片）。参考值下限：正常精子形态（%）：4精子形态学：第二十页，共三十四页。WHO不同版本精子形(Xing)态学相关内容的比较版本篇幅染色方法观察方法参考值第一版10页改良勃-利氏染色；巴氏染色40倍物镜观察80.5±19.4%第二版13页吉姆萨染色；改良巴氏染色；勃-利氏染色40倍相差显微镜100倍油镜50%第三版13页湿片法吉姆萨染色；改良巴氏染色；勃-利氏染色；Shorr染色100倍明场物镜下观察30%第四版15页改良巴氏染色；Shorr染色；Diff-Quick染色100倍油镜及至少10倍目镜15%第五版49页改良巴氏染色；Shorr染色；Diff-Quick染色100倍油镜及至少10倍目镜4%第二十一页，共三十四页。精子形态学：染色(Se)方法推荐采用Papanicolaou、Shorr或Diff-Quik染色法使用光学显微镜观察，精子头部顶体区为浅蓝色，顶体后区为深蓝色，中段略呈红色，尾部为蓝色或红色。残余的胞浆小滴染成粉红色或橙红色。第二十二页，共三十四页。精子畸形：

①头部畸形：锥形头，梨形头，圆形头（无顶体，小），无定形头，空泡样头，顶体区域小的等。②颈和中段畸形：不对称、中断和头部连接(Jie)点粗、细③尾部畸形：短尾，成角弯折，卷尾④过多的胞浆残余体：＞精子头部大小的1/3精子形态学：第二十三页，共三十四页。精子(Zi)形态学：第二十四页，共三十四页。精液的参考(Kao)值范围新版手册对正常生育男性额精液参考值范围进行了修订。为了制订参考值范围，采纳了3大洲8个国家的400～1900分最近使女方生育的男性的精液标本的原始数据。在数据统计方面，由于各项精液参数的高值都不太可能对生育产生危害，所以采用单侧参考值区间，并以第5百分位数作为参考值下限对于精液常规分析参数来说更为合适，而不需要像一般的统计学分析那样采用双侧参考值区间和第2.5百分位数。第二十五页，共三十四页。新版手册制定(Ding)的参考值范围WHO版本2345

年1987199219992010

参考值正常正常参考下限精液量.（ml)2.02.02.0

1.5总数（m)

404040

39精子深度（M/ml)202020

15前向运动（%）505050

32存活（%）507575

58正常形态（%）5030（15）4

第二十六页，共三十四页。新版手册制订的参考值(Zhi)范围参数参考值下限精液体积（ml)1.5（1.+1.7）精子总数(106/次射精）39（33-46）精子深度(106/ml)15（12-16）总活动率（PR+NP,%)40（38-42）前向活动率(PR,%)32（31-34）存活率（存活精子。%）58（55-63）精子形态学（正常形态，%）4（3.0-4.0）其它参数PH≧7.2过氧化物酶阳性白细胞（106/ml)<1.0MAR试验（附着粒上的活动精子，%）<50免疫珠试验（附着珠上的活动精子，%）<50精浆锌（∪mol/射精）≧2.4精浆果糖（∪mol/射精）≧13精浆中性葡糖苷本酶（mU射精）≧20第二十七页，共三十四页。常见的(De)精液异常少精子症的分类精子浓度轻度少精子症≧10，<20(15)×106/ml中度少精子症≧5，<10×106/ml严重少精子症≧1，<5×106/ml极度少精子症<1×106/ml引用WHO指南第二十八页，共三十四页。常见的精(Jing)液异常弱精子症的分类精子活力（a+b)轻度弱精子症≧30(20)%<50(32)%中度弱精子症≧10%,<30(20)%严重弱精子症≧1，<10%极度弱精子症<1%或死精子症引用WHO指南第二十九页，共三十四页。常见的精液(Ye)异常畸形精子症的分类精子正常形态率轻度畸形精子症≧10(3)%<5(4)%中度畸形精子症≧5（2）%,<10(3)%严重畸形精子症≧1，<5（2）%极度畸形精子症<1%引用WHO指南第三十页，共三十四页。无精子症：精液内无精子（2次或(Huo)以上精液分析）处理：离心力3000时间：15min鉴别：隐匿性无精子症：可以看到精子无精子症：始终未见精子常见的精液异常第三十一页，共三十四页。丈夫精(Jing)液人工授精(Jing)适应症1、男方因少精、弱精、精液液化异常、性功能障碍、生殖功能器畸形，逆行射精等原因引起的不育；2、免疫性不育。辅助生殖——男方适应症第三十二页，共三十四页。体外授精及胚胎移植