《分子生物学实验》实验教学大纲

第页《分子生物学实验》实验教学大纲课程名称：分子生物学实验

课程类别：

专业主干课适用专业：生物科学

所属实验室：分子生物学实验室

实验学时、学分：32学时

1学分一、实验教学目的分子生物学是在分子水平上研究生命规律、揭示生命本质的科学。分子生物学实验是生物科学、生物技术专业的必修基础课程之一。分子生物学实验技术，特别是基因克隆重组技术已经成为现代生物技术的核心，已经渗透到生命科学的各个领域，并促进了一批新学科的兴起和发展。本实验课程在本专业人才培养中具有重要的作用，它是培养学生将来从事教学、科研及技术开发工作能力的不可缺少的实验教学环节。本课程以分子生物学基础实验技术为主，开设验证、综合和设计三个类型实验项目。通过本实验课程，使学生掌握分子生物学基础实验技术的基本原理和操作，培养学生观察、思考、分析问题和解决问题的能力，以及实事求是、严肃认真的科学态度，为今后的学习和工作奠定基础。二、实验教学要求开设分子生物学实验，旨在使学生掌握分子生物学实验的基本知识、原理、常用技术和操作技能。培养学生分析问题、解决问题的能力和实事求是、严肃认真的科学态度，为今后的学习深造或开展相关的研究、教学等工作奠定基础。三、对学生的指导和要求（一）在实验教学过程中，要求学生实验前认真预习实验讲义（二）实验中亲自动手操作，善于观察，作好实验记录（三）实验结束后详细整理、统计、分析实验结果，写出规范的实验报告四、实验考核方式考查70%平时（包括习惯、结果、操作、实验报告）+20%笔试+10%开放实验室五、实验教学内容实验项目(一)

分子生物学预备实验（4学时）：(1)

项目类别：必做■

选做□(2)

项目性质：演示性■

验证性■设计性□

综合性□(3)

项目主要目的要求：①实验要求通过介绍实验室规则，规范学生在实验室的行为；讲解个相关仪器的名称，用途，简单原理和使用方法，让学生学会对它们的操作方法。②实验内容学习实验室规则；学习离心机的使用方法；学习PCR仪的使用方法；学习电泳仪的使用方法；学习紫外透射仪的使用方法；学习微量加样器的使用方法；学习紫外分光光度计的使用方法；学习恒温摇床的使用方法；学习电子天平的使用方法；学习凝胶成像分析系统的使用方法。(4)

主要仪器：离心机、PCR仪、电泳仪、紫外透射仪、凝胶成像分析系统、微量加样器、紫外分光光度计、电子天平、制冰机、烧杯、量筒、容量瓶、三角瓶、试剂瓶、高压灭菌锅。实验项目(二)

基因组DNA提取（4学时）：(1)

项目类别：必做■

选做□(2)

项目性质：演示性■

验证性■

设计性□

综合性□(3)

项目主要目的要求：①实验要求通过本实验了解并掌握提取基因组DNA的原理和步骤，以及相对分子量较大的DNA的琼脂糖凝胶电泳技术。②实验内容匀浆；酶解细胞过夜。酚/氯仿/异戊醇抽提；无水乙醇抽提冷乙醇洗涤；缓冲液溶解；电泳；观察分析DNA。(4)

主要仪器：玻璃匀浆器、台式离心机、高压灭菌锅、恒温水浴锅、旋涡振荡器、低温冰箱普通冰箱、琼脂糖凝胶电泳系统、紫外线透射仪。实验项目(二)

聚合酶链式反应扩增（4学时）：(1)

项目类别：必做■

选做□(2)

项目性质：演示性■

验证性■

设计性□

综合性□(3)

项目主要目的要求：①实验要求学会PCR反应的基本原理与实验技术。②实验内容配制反应体系及设置PCR仪的各项参数；利用特定引物，扩增目的DNA片段（MTHFR667位点）；琼脂糖凝胶电泳检测分析。(4)

主要仪器：超净工作台（间）、高压灭菌锅、PCR仪、微量加样器、琼脂糖凝胶电泳系统、紫外线透射仪。

说明：1.

以上项目为基本实验项目，实际授课过程中选做其中30学时。2.

有些实验在下表分配的学时内可能不能完成，需酌情而定。3.

因学科的发展或其他原因，实际所上内容必定有所变动。实验项目(三)

质粒DNA的提取（4学时）：(1)

项目类别：必做■选做□(2)

项目性质：演示性■

验证性■

设计性□

综合性□(3)

项目主要目的要求：①实验要求通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒。②实验内容提取质粒；溶解保存；酶切；电泳、染色、检测质粒DNA。(4)

主要仪器：台式离心机、高压灭菌锅、恒温水浴锅、旋涡振荡器、电冰箱、微量加样器、琼脂糖凝胶电泳系统、紫外线透射仪。

实验项目(五)

琼脂糖凝胶电泳检测DNA（4学时）：(1)

项目类别：必做■

选做□(2)

项目性质：演示性■

验证性■

设计性□

综合性□(3)

项目主要目的要求：①实验要求通过实验掌握琼脂糖凝胶电泳检测DNA的方法和技术。②实验内容胶板的制备；加样；电泳；观察分析DNA。(4)

主要仪器：琼脂糖凝胶电泳系统、紫外线透射仪、微量加样器、台式离心机、高压灭菌锅、恒温水浴锅、旋涡振荡器、电冰箱、微量加样器、琼脂糖凝胶电泳系统、紫外线透射仪。实验项目(六)

重组质粒的构建（4学时）：(1)

项目类别：必做■

选做□(2)

项目性质：演示性■

验证性■

设计性□

综合性□(3)

项目主要目的要求：①实验要求通过实验掌握重组DNA连接的方法。②实验内容制备重组DNA；

(4)

主要仪器：台式离心机、低温离心机、高压灭菌锅、恒温水浴锅、旋涡振荡器、电冰箱、微量加样器、恒温培养箱、恒温摇床。实验项目(七)大肠杆菌的遗传转化及筛选（4学时）：(1)

项目类别：必做■

选做□(2)

项目性质：演示性□

验证性□

设计性□

综合性■(3)

项目主要目的要求：①实验要求通过实验掌握遗传转化及筛选重组子的方法。②实验内容重组质粒的转化(4)

主要仪器：台式离心机、低温离心机、高压灭菌锅、恒温水浴锅、旋涡振荡器、电冰箱、微量加样器、恒温培养箱、恒温摇床。实验项目(八)

生物大分子遗传信息分析（4学时）：(1)

项目类别：必做■

选做□(2)

项目性质：演示性□

验证性□

设计性■

综合性■六、实验学时分配序号实验名称实验类型课时1分子生物学预备实验验证42基因组DNA的提取验证43聚合酶