血小板功能检测

抗血栓诊疗系列：——PL多参数血小板功效分析仪杜颖检验科年2月血小板功能检测1/53内容概要1.背景介绍2.产品介绍23.临床意义和利用血小板功能检测2/53内容概要1.背景介绍2.产品介绍33.临床意义和利用血小板功能检测3/53首先是受损血管壁发生收缩，然后血液中血小板粘附于受损血管处，释放活性物质并聚集，形成早期血栓。血栓形成机制静止粘附聚集释放血小板血管壁许文荣，王建中，《临床血液学与检验》第4版，人民卫生出版社纤维蛋白原在凝血酶作用下，形成纤维蛋白，加固早期血栓，最终形成凝块。血小板功能检测4/53

抗动脉血栓治疗药品治疗介入治疗药品治疗

包含抗凝药品、溶拴药品和抗血小板药品介入治疗以冠状动脉介入手术为主（如PCI）,术后需要服用六个月至一年抗血小板药品血小板功能检测5/53血小板活化聚集依据血小板活化路径不一样，抗血小板药品多样化血小板功能检测6/531：血栓烷A2（TXA2）抑制剂：花生四烯酸（AA）

阿司匹林（拜阿斯匹林、巴米尔、益络平）2：

ADP受体拮抗剂：二磷酸腺苷（ADP）

氯吡格雷（波立维、泰嘉）、普拉格雷、替格瑞洛（倍林达）3：磷酸二酯酶抑制剂：AA/ADP/Col(胶原)/EPI(肾上腺素)

双嘧达莫（潘生丁）、西洛他唑（培达）4：GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂：AA/ADP/Col(胶原)/EPI肾上腺素

替罗非班（艾卡特、欣维宁）、阿昔单抗、依替巴肽按抑制不一样活化路径分类惯用抗血小板药品血小板功能检测7/531.背景介绍：约有30%个体用药无效（发生血栓）；另有约10%个体用药出现副作用（出血等）。患者反抗血小板药品存在较大个体差异，当前标准化用药造成：血小板功能检测8/53P2Y12基因多态性GPIa基因多态性GPIIIa基因多态性COX-1基因多态性COX-1抑制不充分血小板更新加速CYP3A代谢活性降低P2Y12/P2Y1旁路上调依从性差剂量不足药物相互作用糖尿病、肥胖等1.背景介绍：遗传原因细胞原因临床原因阿司匹林用药后，用药无效发生率在0.4-65%氯吡格雷用药后，用药无效发生率在4-30%抗血小板药品治疗反应多样性临床检测和处理中国教授提议.中华心血管病杂志;42:986-991CYP基因多态性血小板功能检测9/53应对差异策略BhattDL,ScheimanJ,AbrahamNS,etal.Circulation.;118(18):1894-909.抗血小板药品消化道损伤预防和治疗中国教授共识.中华内科杂志.:48(7):607-11.HammCW,BassandJP,AgewallS,etal.EurHeartJ.;32(23):2999-3054.对于心脑血管事件高危患者，如ACS、近期行PCI者，提议继续双抗治疗过早停用抗血小板药品者临床结局更差出血及出血造成血流动力学异常也会增加血栓风险抗血小板药品调整平衡策略缺血出血对于联合使用各种抗栓药品者，如发生严重出血，应考虑降低药品种类和剂量急性、严重出血威胁生命时，可能需暂时停药对小出血者，可在监测下继续服用抗栓药品有没有一个直观，简便，快速检测伎俩帮助临床医生更加好使用抗血小板药品？血小板功能检测10/53应对差异检测伎俩血小板聚集功效检测聚集功效是血小板主要生理特征指血小板与血小板之间黏附，显示活化血小板相互作用成团特征，是血小板参加止血和血栓形成过程主要原因之一血小板聚集功效测定对于临床上诊疗血栓前状态和血栓性疾病含有主要意义。血小板“质量”血小板功能检测11/531.背景介绍：血小板聚集功效检测血小板功效检测直接反应患者用药状态血小板功效检测适合用于全部抗血小板药品血小板功效检测适合用于绝大部分患者血小板生命周期为10天，影响血小板功能原因较多，所以能够定时检测评定血小板功能检测12/53内容概要1.背景介绍2.产品介绍133.临床意义和利用血小板功能检测13/53PL多参数血小板功效分析仪采取连续血小板计数检测法，对全血样本中诱聚剂诱导聚集前和聚集后血小板计数分析主要检测汇报参数——原始血小板数量（PLT-0）原始血小板体积（MPV-0）最大聚集率（MAR）最大抑制率（INH）血小板聚集曲线图（PAC）各次检测血小板数量（PLT）各次检测血小板体积（MPV）。。。血小板功能检测14/53PL多参数血小板功效分析仪连续血小板计数检测数学模型检测原理

血小板未聚集血样检测结果血小板聚集血样检测结果血小板功能检测15/53PL多参数血小板功效分析仪——特点快捷

5

分钟出结果方便

只需1

步，全自动操作，可实现床旁检测

灵活4

种诱聚剂（ADP、AA、Col、EPI）可供选择（配套试剂，有注册证）准确

完善质控体系（有注册证），有校准系统，检测线性优，准确度、精密度满足临床要求

1.将样品放入载样台2.按检测键3.自动完成检测出汇报血小板功能检测16/53PL血小板功效分析仪——可监测药品种类和参考范围抗血小板药品对应诱聚剂正常人群血小板聚集率参考范围氯吡格雷（波立维、泰嘉）、普拉格雷、替格瑞洛（倍林达）

等ADP30%~70%阿司匹林（拜阿斯匹林、巴米尔、益络平）等AA40%~80%西洛他唑，双嘧达莫，替罗非班等Col30%~70%普萘洛尔，替罗非班，双嘧达莫等EPI30%~69%该参考范围按照美国临床和试验室标准协会（CLSI）指南建立，仅供参考各试验室应建立自己参考范围血小板功能检测17/53PL多参数血小板功效分析仪-结果准确*资料起源于解放军总院吴小莉、李建、王成斌等，《临床检验》年6月第2卷第2期血小板功能检测18/53PL多参数血小板功效分析仪-结果准确*资料起源于解放军总院吴小莉、李建、王成斌等，《临床检验》年6月第2卷第2期血小板功能检测19/53PL多参数血小板功效分析仪-结果准确血小板功能检测20/53PL多参数血小板功效分析仪-结果准确资料由解放军总院邓新立教授提供。血小板功能检测21/53PL多参数血小板功效分析仪-结果准确血小板功能检测22/53检测注意事项（同其它血小板检测方法）采血管要求：3.8%枸橼酸钠真空双层采血管；采血时间：空腹或餐后2小时以上；温度：采血温度和样本保留温度均为室温，防止冷藏和高温；检测时间：采血后待血样稳定10min，再上机检测，采血后尽快完成检测(2小时最正确，4小时内结果可接收)；采血次序：防止使用第一管血（可先采集血常规等其它测试所需血样），第二管血样用于血小板功效检测，以降低针头刺激、组织液渗透血管对检测结果造成影响；血样采集后应上下颠倒5-10次，使血样与抗凝剂充分均匀，但不易长时间震荡。血小板功能检测23/53PL“金标准”光学比浊法VerifyNow血栓弹力图样本全血无需处理制备富血小板和贫血小板共2管血浆全血无需处理全血，耗血量大，需要2管血操作全自动手工操作步骤繁琐全自动手工操作步骤繁琐时间5分钟多于30分钟5分钟多于30分钟价格廉价廉价非常昂贵非常昂贵PL血小板功效分析仪——同类产品比较血小板功能检测24/53——历史悠久、广泛应用方法

光学法在血小板功效研究历史中有主要贡献，功不可没。但因为其显而易见不足（操作繁琐、检测结果不稳定、耗时长、用血量大等），当前在美国、欧洲临床已很少采取。“金标准”光学比浊法（LTA）

因为LTA法价格低廉，在国内依然有部分医院在使用，不过配套试剂已经停产，使用其它起源未注册试剂存在一定风险。血小板功能检测25/53血栓弹力图（TEG）原理：直接测量血样凝固强度、速度。优点：适合对血液全方面凝血功效水平评价。问题：1）较难区分血液中各因子在血样整体凝固过程中独立贡献，结果误差较大；2）检测用血量较大、且同时需要枸橼酸抗凝血和肝素抗凝血，增加采血复杂性；3）操作耗时长，检测时间>30m/T。血小板功能检测26/53PFA-100/200原理：在体外利用血液动力学原理，检测血小板完全阻塞膜孔时间（CT）问题：1）采取该方法进行临床研究（发表于JAMA上）表明其无法预测血栓风险；2）仅有诱聚剂EPI、ADP试剂盒，理论上无法实现对阿司匹林进行药效评定；3）检测需孵育，耗时长。优点：对先天性血小板功效障碍有卓越敏感性血小板功能检测27/53PL血小板功效分析仪国外类似产品—PlateletworksPlateletworks与PL仪原理相同，均采取库尔特原理对聚集前后血小板进行计数，得到血小板聚集率。采取该方法进行临床研究（发表于JAMA上）表明，Plateletworks检测性能很好。相比较于Plateletworks，PL血小板功效分析仪有以下优势：准确控制诱聚时间；在诱聚过程中进行连续性检测，找到最大聚集点；使检测更自动化、标准化。血小板功能检测28/53PL血小板功效分析仪国外类似产品—PlateletworksBreetNJ,etal.,JAMA.Feb24;303(8):754-62.(30.011分)Comparisonofplateletfunctiontestsinpredictingclinicaloutcomeinpatientsundergoingcoronarystentimplantation.各种血小板功效检测在预测接收冠状动脉支架植入术患者临床结果比较研究试验目标：比较各种血小板功效检测在预测接收冠状动脉支架植入术患者临床结果。研究设计：前瞻性、观察、单中心队列研究。入组择期行冠状动脉支架植入术服用氯吡格雷1069例患者。经过光学比浊法、VerifyNowP2Y12、Plateletworks分析方法、IMPACT-R和PFA-100患者血小板反应性。首要终点：多因死亡、非致死性急性心肌梗塞、支架栓塞和缺血性卒中。

主要安全重点：TIMI标志定义大出血和小出血。血小板功能检测29/53光学比浊法、VerifyNowP2Y12、Plateletworks分析方法检测出血小板高反应患者，一年内主要终点发生率显著提升。PL血小板功效分析仪国外类似产品—Plateletworks试验结果：主要结论：光学比浊法、VerifyNowP2Y12、Plateletworks分析方法有能力预测首要不良风险。BreetNJ,etal.,JAMA.Feb24;303(8):754-62.(30.011分)血小板功能检测30/53内容概要1.背景介绍2.产品介绍313.临床意义和利用血小板功能检测31/53PL多参数血小板功效分析仪-临床意义对应诱聚剂正常人群血小板聚集率参考范围ADP30%~70%AA40%~80%Col30%~70%EPI30%~69%1.血栓/出血风险预判参考范围按照CLSI指南文件建立，仅供参考。允许各试验室经过试验做出适当修正血小板功能检测32/53抗血小板药品药效评定参考提议2.抗血小板药品药效评价：服药后：MAR下降≥30%用药显著服药后：MAR下降在15%-30%范围内用药有效服药后：MAR下降≤15%以下用药无效参考范围按照CLSI指南文件建立，仅供参考。允许各试验室经过试验做出适当修正血小板功能检测33/53临床利用：抗血小板治疗反应多样性患者接收抗血小板药品治疗时对药物反应性差异较大，呈连续、正态（或靠近正态）分布。研究发觉，个体反抗血小板治疗反应性差异与血栓、出血等不良事件显著相关。544例患者接收氯吡格治疗后，光学比浊法测定5μmol/LADP诱导血小板聚集率

缺血事件出血事件血小板高反应性(HRP)血小板低反应性(LRP)Variabilityinplateletresponsivenesstoelopidogrelamong544individuals.JAmCoilCardiol

,45,246-251血小板功能检测34/53临床利用：抗血小板治疗反应多样性抗血小板治疗反应多样性（variabilityofplateletresponse,VPR）：通常指同一个抗血小板药品在不一样患者所产生不一样抗血小板效应血小板高反应性（highon-treatmentplateletreactivity，HPR）：经抗血小板药品治疗后，残余血小板反应性仍较高，即血小板聚集抑制不足。血小板低反应性（lowon-treatmentplateletreactivity，LPR）：经抗血小板药品治疗后，残余血小板反应性较低，即血小板聚集抑制率过多。抗血小板药品治疗反应多样性临床检测和处理中国教授提议.中华心血管病杂志;42:986-991血小板功能检测35/53文件服用药品HPR发生率DunneE.etal.1阿司匹林38%KinsellaJA.etal.2阿司匹林8%YiX,etal.3阿司匹林20.4%MijajlovicMD,etal.4阿司匹林28%KinsellaJA.etal.2氯吡格雷44%FeherG.etal.5氯吡格雷22%MijajlovicMD,etal.4氯吡格雷5%-30%中华医学会心血管病学分会6抗血小板药品20%-40%临床利用：抗血小板治疗反应多样性DunneE,EganK,McFaddenS,etal.ClinChemLabMed.Nov12.KinsellaJA,TobinWO,CoxD,etal.JStrokeCerebrovascDis.Oct;22(7):e84-92.YiX,ZhouQ,LinJ,etal.IntJStroke.Oct;8(7):535-9.MijajlovicMD,ShulgaO,BlochS,etal.ActaNeurolScand.Oct;128(4):213-9.FeherG,KoltaiK,AlkonyiB,etal.IntJCardiol.Aug21;120(2):188-92.抗血小板药品治疗反应多样性临床检测和处理中国教授提议,中华心血管病杂志,Dec,Vol.42,No.12血小板功能检测36/53心内科：PlateletReactivityandClinicalOutcomesAfterCoronaryArteryImplantationofDrug-ElutingStents(ADAPT-DES):AProspectiveMulticentreRegistryStudy.Lancet

,382,614-623血小板高反应性血小板低反应性是一项前瞻性、多中心研究，入组8582名接收PCI患者，评定服用抗血小板药品患者血小板高反应性与PCI术后缺血/出血事件发生相关性。结果显示，服用氯吡格雷患者血小板高反应性与支架栓塞、心梗正相关，与出血反相关。ADAPT-DES研究：HPR与支架栓塞正相关HPR与出血事件反相关血小板功能检测37/53Siller-MatulaJM,etal.IntJCardiol.Sep1;167(5):-23.(4.036分)Personalizedantiplatelettreatmentafterpercutaneouscoronaryintervention:TheMADONNAstudyPCIs术后个体化抗血小板药品治疗：MADONNA研究试验目标：意在评定个体化氯吡格雷抗血小板治疗是否是一个安全、有限策略研究设计：本研究是前瞻性、非随机、非双盲临床对比研究(调整组和非调整组治疗)，随访1个月。监测798例服用氯吡格雷后患者血小板反应性。调整组(n=403)，服用氯吡格雷后患者血小板高反应患者给予高剂量氯吡格雷或普拉格雷治疗，非调整组(n=395)，接收标准治疗不做任何调整。优化抗血小板治疗研究-1血小板功能检测38/531：调整组支架栓塞发生率显著低于非调整组(0.2%VS1.9%，p=0.027)。回归分析显示，非调整组发生支架栓塞风险是调整组7.9倍。2：调整组急性冠脉综合征发生率显著低于非调整组(0%VS2.5%，p=0.001)。3.：心因死亡(2%vs.1.3%;p=0.422和大出血(1%vs.0.3%;p=0.186)发生率，两组无显著差异试验结果：主要结论：基于血小板功效检测行个体化抗血小板药品治疗相比标准治疗方案，是一个同等安全且愈加有效治疗方式。Siller-MatulaJM,etal.IntJCardiol.Sep1;167(5):-23.(4.036分)优化抗血小板治疗研究-1血小板功能检测39/53JAmCollCardiol.Mar25;63(11):1061-70.(16.503分)OptimizingP2Y12ReceptorInhibitioninPatientsWithAcuteCoronarySyndromeontheBasisofPlateletFunctionTesting基于血小板功效检测对急性冠脉综合征患者行P2Y12受体抑制剂优化治疗试验目标：本研究意在评定基于血小板功效检测对PCI术后急性冠脉综合征患者行普拉格雷和大剂量氯吡格雷治疗临床效果。研究设计：入组741例已成功行PCI手术并预先接收氯吡格雷治疗ACS患者。PCI术后12至36h行血小板功效测定。HPR患者(>46U)转向普拉格雷或高剂量氯吡格雷治疗，非HPR患者继续服用75毫克氯吡格雷治疗。首要终点：1年全因死亡风险、心肌梗塞、支架栓塞、中风等不良事件中优化抗血小板治疗研究-2血小板功能检测40/53741例患者中有219例血小板高反应患者（发生率29.5%）。优化抗血小板治疗研究-2JAmCollCardiol.Mar25;63(11):1061-70.(16.503分)血小板功能检测41/53接收普拉格雷治疗患者比高剂量氯吡格雷治疗能更显著降低血小板反应性（p<0.0001）优化抗血小板治疗研究-2JAmCollCardiol.Mar25;63(11):1061-70.(16.503分)血小板功能检测42/53接收普拉格雷治疗HPR患者，在主要血栓不良风险和出血事件降低至与非HPR患者类似。接收高剂量氯吡格雷治疗HPR患者，主要血栓不良风险和出血事件未显著降低。优化抗血小板治疗研究-2JAmCollCardiol.Mar25;63(11):1061-70.(16.503分)血小板功能检测43/53优化抗血小板治疗研究（OPT研究）-33316例已接收PCIACS患者血小板高反应性患者（n=840）标准治疗组氯吡格雷75mg/d＋ASA300mg/d（n=280）按1:2随机化第3天重新评定血小板反应性血小板反应性正常（n=304）血小板高反应性（n=256）方案A:西洛他唑50mg,bid＋氯吡格雷150mg,qd

方案B:西洛他唑100mg,bid＋氯吡格雷75mg,qdHPR

cutoff：LTA≥55%优化治疗组氯吡格雷150mg/d＋ASA300mg/d（n=560）维持原治疗方案优化治疗方案A（n=128）优化治疗方案B（n=128）韩雅玲等EuropeanHeartJournal()34(AbstractSupplement),824随访2年（研究人员在用药30天之后对全部患者进行血小板功效监测，今后全部患者将接收标准用药方案（氯吡格雷75mg/d＋阿司匹林100mg/d）治疗11个月血小板功能检测44/5330d后，优化治疗组（optimal）血小板聚集率显著低于标准治疗组（standard）优化抗血小板治疗研究（OPT研究）