消毒与灭菌的效果监测

消毒与灭菌效果监测检验科邵春红——《医疗机构消毒技术规范》解读消毒与灭菌的效果监测1/27医疗机构消毒技术规范1.消毒与灭菌基本标准；2.清洗与清洁，消毒与灭菌方法；3.清洁、消毒与灭菌效果监测。消毒与灭菌的效果监测2/27院感相关标本压力蒸汽灭菌消毒与灭菌的效果监测3/27空气样本采集采样要求提出选择室内消毒后或医疗活动之间进行空气标本采样，或怀疑与医院感染暴发相关时采样，使用普通营养琼脂平板采样。（注意：采样前，关闭门、窗，在无人走动情况下，静止10min后采样。）采样高度（沉降法）平板置距地面垂直高度0.8m～1.5m处。消毒与灭菌的效果监测4/27空气样本采集布点方法室内面积≥30㎡，设一条对角线上取3点采样，即中心一点，两端各距离墙1m处各取一点；室内面积＞30㎡，设东、南、西、北、中5点采样，其中东、南、西、北点距离墙1m。采样方法将直径9cm普通营养琼脂平板放置各采样点，将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露5min后盖上平皿盖及时送检。消毒与灭菌的效果监测5/27空气样本检测与汇报检测培养将送检平皿置36℃±1℃恒温箱培养48h,计数菌落数，若怀疑与医院感染暴发相关时，进行目标微生物判定。结果处理计算全部平板菌落数，按公式换算结果。如临床科室要求培养致病菌，则挑取可疑菌落进行判定。计算公式：每个房间全部平板菌落总数/采样点/（皿．暴露时间）汇报:沉降法按平均每皿菌落数汇报：cfu/（皿．暴露时间）比如：2cfu/(5min·直径9cm平皿)。消毒与灭菌的效果监测6/27空气样本结果判定

１.洁净手术部（室）和其它洁净场所，空气中细菌菌落总数要求应遵照ＧＢ50333．消毒与灭菌的效果监测7/27２.非洁净手术部（室）、非洁净骨髓移植病房、产房、导管室、新生儿室、器官移植病房、烧伤病房、重症监护病房、血液病病区空气中细菌菌落总数≤４cfu／（１５ｍｉｎ·直径９ｃｍ平皿）。３.儿科病房、母婴同室、妇产科检验室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供给中心、血液透析中心（室）、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊及其病房空气中细菌菌落总数≤

4cfu/(5min·直径9cm平皿)。消毒与灭菌的效果监测8/27物体表面标本采集采样时间在消毒处理后或怀疑与医院感染暴发相关时进行采样。消毒与灭菌的效果监测9/27物体表面标本采集采样方法用5cmx5cm灭菌规格板放在被检物体表面，用浸有没有菌生理盐水棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样4个规格板面积，被采表面＜100cm2，取全部表面；被采表面≥100cm2，取100cm2。剪去手接触部分，将拭子放入装有10ml物表采样液试管中送检。门把手等小型物体则利用棉拭子直接涂抹物体表面采样。采样物体表面有消毒剂残留时，采样液应含对应中和剂。消毒与灭菌的效果监测10/27物体表面标本检测与汇报检测方法：充分震荡采样管后，取洗脱液1.0ml接种平皿，将冷至40℃-45℃熔化营养琼脂培养基每皿倾注15ml-20ml，37℃恒温箱培养48h,计数菌落数，怀疑与医院感染暴发相关时，进行目标微生物检测。计算公式：物体表面细菌菌落数总数（cfu/cm2）=平板上菌落数×采样液稀释倍数/采样面积。汇报方式：菌落数cfu/cm2

小型物体表面结果用cfu/件表示消毒与灭菌的效果监测11/27物体表面标本结果判定1.洁净手术部、其它洁净场所，非洁净手术部（室）、非洁净骨髓移植病房、产房、导管室、新生儿室、器官移植病房、烧伤病房、重症监护病房、血液病病区等；物体表面细菌菌落总数≤5cfu/cm2。2.儿科病房、母婴同室、妇产科检验室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供给室、血液透析中心（室）、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊及其病房等，物体表面细菌菌落总数≥10cfu/cm2消毒与灭菌的效果监测12/27压力蒸汽灭菌效果监测标准指示菌株：嗜热脂肪杆菌芽孢采样方法：将指示剂放置于标准试验包中，置于压力蒸汽灭菌器内最难灭菌位置处，执行正常灭菌过程，完成后将指示剂送检。消毒与灭菌的效果监测13/27压力蒸汽灭菌效果监测检测方法：将指示菌片捏碎，放入56℃培养箱培养48h，观察结果。如指示菌片颜色为紫色，说明无嗜热脂肪杆菌生长；如指示剂颜色为黄色则说明有嗜热脂肪杆菌生长。汇报方式：“检出/未检出嗜热脂肪杆菌”。结果判定：阳性对照组培养阳性，试验组培养阴性，判定为灭菌合格。阳性对照组培养阳性，试验组培养阳性，则灭菌不合格；同时应深入判定试验组阳性细菌是否为指示菌或是污染所致。消毒与灭菌的效果监测14/27皮肤表面标本采集采样时间按照产品使用说明要求作用时间，到达消毒效果后及时采样。采样方法同物体表面标本，不规则皮肤可用棉拭子直接涂擦采样。消毒与灭菌的效果监测15/27医护人员手表面标本采样采样时间在接触病人或从事医疗活动前进行采样。消毒与灭菌的效果监测16/27医护人员手表面标本采样采样面积及方法被检人五指并拢，用浸有没有菌生理盐水无菌拭子在双手指曲面从指根到指端往返涂擦各两次，并随之转动采样棉拭子（一只手涂抹面积30cm2），剪去手接触部位，将拭子放入装有10ml物表采样液试管中送检。消毒与灭菌的效果监测17/27皮肤表面标本检测方法计算公式同物体表面汇报方式计算公式：物体表面细菌菌落数总数（cfu/cm2）=平板上菌落数×采样液稀释倍数/采样面积。

消毒与灭菌的效果监测18/27皮肤表面标本结果判断结果判定：皮肤消毒效果判定标准遵照WS/T313中外科手消毒卫生标准。a)卫生手消毒，监测细菌菌落总数应≤10cfu/cm2。b)外科手消毒，监测细菌菌落总数应≤5cfu/cm2。消毒与灭菌的效果监测19/27消毒液送检采样要求采集使用中消毒剂。采集方法用无菌注射器抽取1ml被检样液，加入9ml消毒中和液，混匀。消毒与灭菌的效果监测20/27消毒液培养与汇报培养方法：同物体表面标本计算公式：消毒液染菌量（CFU/mL）=平均每皿菌落数×10×稀释倍数汇报方式：菌落数CFU/mL。结果判断：

使用中灭菌用消毒液：无菌生长；

使用中皮肤黏膜消毒液染菌量≤10CFU/mL；

其它使用中消毒液染菌量≤

100CFU/mL。消毒与灭菌的效果监测21/27清洁用具采样采样时间

消毒后、使用前进行采样。采样方法

布巾、地巾等物品可用无菌方法剪取1cm×3cm，直接投入10ml含对应中和剂无菌生理盐水中，及时送检。消毒与灭菌的效果监测22/27清洁用具汇报与结果判断检测方法：将采样管在混匀器上振荡20s或用力振打80次，取采样液检测致病菌。汇报方式：检出/未检出细菌或真菌，汇报为“检出××菌”。结果判定：

未检出致病菌为消毒合格。消毒与灭菌的效果监测23/27其它标本内镜样本采样用10ml中和液重复冲洗镜后取回收液于试管中送检。透析液采样用灭菌试管无菌操作采集透析液5ml送检。消毒与灭菌的效果监测24/27内镜标本检测与汇报培养方法：同物体表面标本，若临床要求培养致病菌，则收到标本后，取0.1ml均匀接种于普通琼脂培养基表面，放入35℃培养