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PAGEPAGE1第九单元生物技术实践第一卷一、选择题(此题包括10小题,每题2.5分,共25分,每题只有一个选项正确)1.(2022·慈溪中学期末测试)在别离土壤中分解尿素的细菌的实验操作中,对于获得纯化的尿素分解菌的单菌落影响最大的是()A.制备浸出液的土壤取自土壤的表层B.涂布前涂布器未在酒精灯外焰上灼烧灭菌C.牛肉膏蛋白胨培养基中添加尿素作为氮源D.接种操作者的双手未用酒精棉进行消毒答案C解析土壤的表层含有细菌较少,但仍含有分解尿素的细菌,经过培养可以得到尿素分解菌,A项错误;未灼烧灭菌的涂布器虽含有杂菌,但在以尿素为唯一氮源的培养基上不能生存,B项错误;别离土壤中分解尿素的细菌应以尿素为唯一氮源,牛肉膏蛋白胨培养基中含有氮源,用该培养基进行实验不能得到分解尿素细菌的单菌落,C项正确;未用酒精棉进行消毒的双手,可能将杂菌带入培养基,但杂菌在以尿素为唯一氮源的培养基上不能生存,D项错误。2.土壤中的细菌能分解尿素,是因为它们能合成一种()A.尿素酶B.脲酶C.蛋白酶D.肽酶答案B解析能够利用尿素的细菌,其细胞内含有脲酶,可以把尿素分解成氨,然后进一步利用。3.以下有关微生物培养的表达,正确的选项是()A.培养前均需要对培养基进行高压蒸汽灭菌B.均要确保培养基中含有所需的全部营养物质C.划线别离法或涂布别离法均可用于菌种鉴定D.均需要放在恒温培养箱中通入氧气培养答案C解析微生物接种前,要对培养基进行高压蒸汽灭菌,A项错误;培养基中只需要含有满足微生物生长需要的营养物质,B项错误;划线别离法或涂布别离法均可用于菌种鉴定,C项正确;有些微生物属于厌氧型,不需要通入氧气,D项错误。4.以下有关划线别离法的操作,错误的选项是()A.将接种环放在火焰上灼烧B.将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液C.蘸取菌液和划线要在火焰旁进行D.划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连答案D解析要将接种环在火焰上灼烧灭菌,A项正确;应将冷却的接种环伸入菌液蘸取,温度过高会杀死菌种,B项正确;蘸取菌液和划线都要在火焰旁进行,防止杂菌的污染,C项正确;划线时最后一区的划线与第一区的划线不能相连,D项错误。5.涂布别离法是微生物培养中的一种常用的接种方法。以下相关表达错误的选项是()A.操作中需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释B.需将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基外表C.不同浓度的菌液均可在培养基外表形成单个的菌落D.操作过程中对培养基和涂布器等均需进行严格灭菌处理答案C解析涂布别离法包括系列稀释和涂布平板两个过程,涂布平板之前需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释,A项正确;涂布平板时,需要将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基外表,B项正确;只有稀释度足够大的菌液才能在培养基外表形成单个的菌落,C项错误;操作过程中对培养基和涂布器等均需进行严格灭菌处理,以防止杂菌污染,D项正确。6.蒸熟的苹果具有很好的止泻作用,这是因为苹果中果胶的“立场〞不太坚决,未经加热的生果胶可软化大便,与膳食纤维共同起着通便的作用,而煮过的果胶那么摇身一变,不仅具有吸收细菌和毒素的作用,而且还有收敛、止泻的成效。以下有关果胶的表达,不正确的选项是()A.果胶是植物细胞壁的主要成分之一B.酵母菌可产生果胶酶,是因为酵母菌的细胞壁中也含有果胶C.果胶酶能够分解果胶D.果胶影响出汁率答案B解析果胶是植物细胞壁的组成成分。细菌、真菌等虽然有细胞壁,但其细胞壁中不含果胶。7.如图表示某研究小组在探究果胶酶的用量时的实验结果。以下有关说法不正确的选项是()A.在ab段限制反响速率的主要因素是酶的用量B.在ac段增加反响物浓度,可以明显加快反响速率C.在bc段限制反响速率的因素可能是温度、pH、反响物浓度D.在该实验给定条件下,果胶酶的最正确用量是b点对应的值答案B解析由曲线图可以看出,在ab段,随着酶的用量的增大,酶促反响速率加快,说明此阶段限制反响速率的主要因素是酶的用量;此时增加反响物浓度,反响速率不会明显加快。在bc段,随着酶的用量的增大,酶促反响速率不再加快,此时反响物浓度成为限制反响速率的因素之一,增加反响物浓度,反响速率会加快。8.以下关于植物组织培养中灭菌操作的表达,错误的选项是()A.外植体可以用酒精消毒B.镊子等器械需用酒精消毒C.操作前手需用酒精消毒D.培养基需高压蒸汽灭菌答案B解析植物组织培养需进行严格的无菌操作:培养基需高压蒸汽灭菌;操作前手需用酒精消毒;外植体应浸泡在酒精中杀菌;整个操作过程在酒精灯火焰旁进行,同时对镊子等器械灼烧灭菌。9.制作四川泡菜时要用特殊的坛子,坛子需加水密封。密封坛口的目的是()A.隔绝空气,抑制细菌繁殖B.阻止尘埃,防止污染C.造成缺氧环境,有利于乳酸菌发酵D.防止污染,利于醋化醋杆菌发酵答案C解析密封坛口的目的是造成缺氧环境,有利于乳酸菌进行厌氧发酵,C项正确。10.以下关于果酒、果醋制作过程的表达,正确的选项是()A.发酵使用的菌种均为原核生物B.发酵的原材料均需高温、高压灭菌C.发酵过程中发酵液的pH均会降低D.发酵过程中都需要密闭的发酵罐答案C解析果酒的制作利用的是酵母菌,果醋的制作利用的是醋化醋杆菌,酵母菌是真核生物,A项错误;发酵原料不能用高温、高压灭菌,因为这会将菌种杀死,B项错误;发酵过程中会产生CO2和醋酸,使发酵液的pH降低,C项正确;果酒发酵后期需要密闭环境,果醋发酵需通气,D项错误。第二卷二、非选择题(此题包括6小题,共75分)11.(14分)人参果果实有淡雅的清香,果肉清爽多汁,风味独特。具有高蛋白、低糖、低脂,还富含维生素C,以及多种人体所必需的微量元素,尤其是硒、钙的含量大大地高于其他的果实和蔬菜。某兴趣小组将人参果制成果酒,并尝试将其口感欠佳的叶子制作泡菜。请答复以下相关问题:(1)以下图为人参果果酒生产工艺流程简图,据图答复以下问题:选料→“?〞→粉碎→灭菌→接种→发酵→“?〞→果酒①流程中“?〞处的内容依次应为________、________。②制作果酒时,温度应该控制在____________________,果酒酿造过程中如果果汁灭菌不合格,含有醋化醋杆菌,在酒精发酵旺盛时,醋化醋杆菌能否将果汁中的糖发酵为醋酸?说明理由。________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。③果酒制作离不开酵母菌,与醋化醋杆菌相比,酵母菌在结构上的主要特点是________________________________________________________________________。④人参果果酒制作过程中,接种完成后要先向发酵罐中通入一段时间的无菌空气,目的是________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)以下图是人参果叶子的腌制及亚硝酸盐含量测定的实验流程示意图,请据图答复:①制作泡菜宜选用新鲜的蔬菜或其他原料,原因是___________________________________________________________________________________________________________。泡菜腌制过程中起主要作用的菌种是____________________________________________________________________。②在制作泡菜的过程中,因为操作不当,造成泡菜腐烂。以下原因中正确的选项是()A.罐口密闭缺氧,抑制了乳酸菌和需氧腐生细菌的生长繁殖B.罐口密闭不严,氧气使乳酸菌的生长繁殖受到抑制,需氧腐生细菌的生长繁殖加快C.罐口密闭不严,氧气使酵母菌和需氧腐生细菌的生长繁殖减慢D.罐口密闭缺氧,促进了乳酸菌和需氧腐生细菌的生长繁殖③测定亚硝酸盐含量的方法是____________________________________________。亚硝酸盐可与对氨基苯磺酸发生重氮化反响,反响产物再与N-1-萘基乙二胺偶联,形成______________色产物。绘制标准曲线时,应以亚硝酸钠质量为横坐标,以________________为纵坐标。④三坛泡菜分别在腌制过程中的第3、5、7、9、11、13天分别对食盐浓度为4%、6%、8%的泡菜做了亚硝酸盐含量的检测,得到以下数据:食盐浓度发酵天数1号坛4%2号坛6%3号坛8%第3天1.61.20.5第5天3.25.52第7天3.84.01.8第9天3.51.81.6第11天3.41.21.5第13天3.21.21.2请根据表中数据,对泡菜的制作提出两条建议:________________________________、________________________________________。(3)科学家将别离得到的人参果韧皮部细胞进行克隆,最终由单个细胞发育成了完整的新人参果植株。具体操作步骤如以下图所示:科学家所用的这种植物克隆技术叫做______________。该项技术说明,当植物细胞处于____________________状态时,在一定的营养物质、______________________和其他外界条件的作用下,可能表现出________________________,发育成完整植株。答案(1)①冲洗过滤②25~30℃不能因醋化醋杆菌是好氧型细菌,而果酒发酵是无氧环境(或因醋化醋杆菌需要在有氧且温度是30~35℃条件下,才能将糖转化为醋酸,而此时发酵罐中的条件是无氧且温度是25~30℃)③有成形的细胞核④在有氧条件下,使酵母菌迅速繁殖,增加数量(2)①亚硝酸盐的含量低假丝酵母和乳酸菌②B③光电比色法紫红光密度值④泡菜腌制时间最好长于13天适当地增加食盐的浓度(3)(植物)组织培养离体(植物)激素细胞的全能性解析(1)①果酒生产的工艺流程为选料→冲洗→粉碎→灭菌→接种→发酵→过滤→果酒。②醋化醋杆菌的最适生长温度为30~35℃。如果果汁灭菌不合格,含有醋化醋杆菌,由于果酒发酵旺盛时是无氧环境,且温度为25~30℃,不适合醋化醋杆菌生存,故醋化醋杆菌不能将果汁中的糖发酵为醋酸。③醋化醋杆菌是原核生物,无细胞核,酵母菌是真核生物,有细胞核及多种细胞器。④果酒制作过程中,接种完成后要先向发酵罐中通入一段时间的无菌空气,目的是在有氧条件下,使酵母菌迅速繁殖,增加数量,有利于后期发酵。(2)①制作泡菜宜选用新鲜的蔬菜是因为其中亚硝酸盐的含量低,蔬菜中的氮元素会被微生物分解产生亚硝酸盐。泡菜腌制过程中起主要作用的菌种是假丝酵母和乳酸菌,先期发酵以假丝酵母为主,以后发酵以乳酸菌为主。②在制作泡菜的过程中,罐口密闭不严,氧气使乳酸菌的生长繁殖受到抑制,需氧腐生细菌的生长繁殖加快,造成泡菜腐烂。③测定亚硝酸盐含量的方法是光电比色法,亚硝酸盐可与显色剂反响产生紫红色物质。绘制标准曲线时,应以标准溶液中亚硝酸钠质量为横坐标,以光密度值为纵坐标。④分析表中数据可以发现,泡菜中亚硝酸盐的含量随时间的延长先增加,13天后开始下降;泡菜中亚硝酸盐的含量还与使用盐水浓度有关,盐水浓度适当增大,亚硝酸盐的含量相对减少。(3)图中所示为植物组织培养过程,A为离体培养,B为脱分化形成愈伤组织,C为再分化形成胚状体,D表示胚状体经过有丝分裂发育成幼苗,E为幼苗成长为植株。植物组织培养的原理是植物细胞的全能性。12.(11分)(2022·浙江自选改编)下面是关于固定化酶和细菌培养实验的问题。请答复:(1)某兴趣小组欲利用固定化酶进行酶解淀粉的实验,分组见下表。组别固定化酶柱长度(cm)淀粉溶液的流速(mL·min-1)甲100.3乙100.5丙150.3丁150.5将吸附了α淀粉酶的石英砂装入柱中后,需用蒸馏水充分洗涤固定化酶柱,以除去______________________。按上表分组,将配制好的淀粉溶液参加到固定化酶柱中,然后取一定量的流出液进行KII2检测。假设流出液呈红色,说明有__________生成;假设各组呈现的颜色有显著差异,那么流出液中淀粉水解产物浓度最高的应是________组。(2)以下关于上述固定化酶实验的表达,错误的选项是______。A.固定化酶柱长度和淀粉溶液流速决定了酶柱中酶的含量B.淀粉溶液流速过快会导致流出液中含有淀粉C.各组实验所用的淀粉溶液浓度应相同D.淀粉溶液的pH对实验结果有影响(3)现有一份污水样品,某兴趣小组欲检测其中的细菌数,进行以下实验。将一定量的污水样品进行浓度梯度稀释。取适量不同稀释度的稀释液,用________法分别接种于固体平面培养基上,经培养后进行计数。该实验应注意,接种前,从盛有______________的容器中将玻璃刮刀取出,放在酒精灯火焰上灼烧,冷却后待用;分组时,需用________________作为对照。(4)在上述细菌培养实验中进行计数时,应计数的是接种了()A.各个稀释度样品的培养基上的细菌数B.合理稀释度样品的培养基上的细菌数C.各个稀释度样品的培养基上的菌落数D.合理稀释度样品的培养基上的菌落数答案(1)未吸附的α淀粉酶糊精丙(2)A(3)涂布别离70%酒精未接种的培养基(4)D解析(1)利用固定化酶进行酶解淀粉的实验时,先要将酶固定化。此题中利用石英砂吸附α淀粉酶,装入固定化酶柱时有些酶没有完全吸附在石英砂上,需用蒸馏水充分洗涤固定化酶柱,以除去未吸附的游离的α淀粉酶。α淀粉酶可使淀粉水解成糊精,如果用淀粉指示剂(KII2)检测糊精,那么呈现红色。酶的量不同,水解的效果也不同,丙组固定化酶柱的长度较长,其固定化酶的总量较多,且柱中淀粉溶液的流速也较慢,反响充分,故产物浓度高,颜色最深。(2)A项,固定化酶柱的长度决定了酶的含量,反响是否充分与淀粉溶液的流速有关,决定了产物的浓度。B项,如果淀粉溶液的流速过快,那么淀粉与酶接触不充分,从而使淀粉不能被充分水解。C项,各组淀粉溶液的浓度是实验的无关变量,故各组实验所用的淀粉溶液浓度应该相同。D项,温度、pH会影响酶的活性,从而对实验结果造成影响。(3)细菌的别离与计数常用涂布别离法,即用玻璃刮刀将一定体积的稀释液涂布到固体平面培养基上。玻璃刮刀在使用前需进行灭菌处理,即将其保存在体积分数为70%的酒精中,随后取出放在酒精灯火焰上灼烧,冷却后待用。为排除其他因素的影响,提高实验的可信度,实验中要设置空白对照。(4)将菌液涂布到固体平面培养基上后,倒置放在恒温箱中培养,培养一段时间后,统计菌落数。当样品的稀释度足够高时,培养基外表生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌,这样通过统计菌落数就可估算出待测样品的细菌数目,所以要选择合理稀释度样品的培养基上的菌落数。13.(13分)(2022·舟山中学模拟卷)某研究组对籼稻开展了组织培养及相关研究。请答复以下问题:(1)2,4-D常用于籼稻愈伤组织的诱导,对形态的发生有一定的抑制作用。为促进愈伤组织再分化,在配制分化培养基时需________(填“升高〞“保持〞或“降低〞)2,4-D的浓度。(2)籼稻愈伤组织在只含有细胞分裂素的培养基上培养时,出现了具有分生能力的绿色芽点,但不能继续出芽。此时通常应在培养基中添加________________,以促进幼苗形成。(3)研究中用显微镜可以观察到的现象是________(填以下序号)。①绿色芽点细胞排列松散②刚融合的籼稻和稗草杂交细胞发生质壁别离③胚状体细胞中有叶绿体④分化的愈伤组织内各细胞的形态、大小一致。(4)经组织培养筛选获得的籼稻叶绿素突变体,其叶绿素a与叶绿素b的比值显著大于对照组,叶绿素总量不变。某同学用________(填序号:①绿色;②红色;③蓝紫色;④黄色)光照射突变体和对照叶片,检测到两者的光合放氧速率差异不大。假设取等量色素提取液进行层析,会发现突变体第________条色素带(自上而下)窄于对照组。(5)胚乳(3n)由一个精子与两个极核受精发育而成。假设用籼稻种子的胚乳诱导愈伤组织培育三倍体,需适时剔除胚,以免胚的存在影响愈伤组织细胞的________,还可防止再生苗中混有________。答案(1)降低(2)适量的生长素(3)③(4)①④4(5)增殖与分化二倍体幼苗解析14.(12分)在我们的周围存在着各种各样的微生物,比方大肠杆菌、酵母菌、乳酸菌、霉菌等。微生物与人类的生活、健康有着密切的联系。请答复以下相关问题:(1)检查饮用水中大肠杆菌数量时必须进行无菌操作。实验前所需的各种器材如三角烧瓶、培养皿等需要经过____________________法灭菌。在微生物培养或别离过程中,以下操作不恰当的是________。A.在超净台中进行接种时应该关闭紫外灯B.扩大培养时必须保证氧气的供给C.控制液体培养基中营养物质的浓度D.空白的培养基平板需进行无菌实验(2)微生物与人类的生活关系越来越密切,在制作果酒、果醋、泡菜的过程中,用到的主要微生物分别是________________________________。在果醋、泡菜和果酒的制作过程中,均利用相应微生物的代谢特点进行条件控制,其中需要提供氧气的是________________的制作。泡菜腌制的原理是______________和______________等主要微生物利用菜中的________________和其他营养物质进行发酵,产生有机酸和醇类物质。(3)因为培养基里面含有微生物或动植物细胞生长所必需的营养物质和成分,所以常用培养基来保存或增殖微生物或动植物细胞。①配制培养大肠杆菌的培养基时,根据“细菌喜荤,霉菌喜素〞的规律,通常在培养基中参加_________________________作为营养物质,还需要考虑温度、渗透压和___________等条件。大肠杆菌培养和别离的实验中,在LB液体培养基中进行________,培养液经___________后,在LB固体培养基上进行________________,并将培养皿________________放在恒温培养箱中培养,可以获得如图效果。通常对获得的纯菌种可以依据________________的形状、大小等特征进行初步的鉴定。②根据微生物的特点,可以利用相应的培养基进行别离或培养,例如用___________________的培养基别离能产生脲酶的微生物,用______________________的培养基培养苹果青霉,可提高果胶酶的产量。③利用固体培养基可以进行微生物培养和植物细胞培养,两者的培养基明显不同的是()A.琼脂的添加 B.有机物的添加C.激素的添加 D.灭菌的处理答案(1)高压蒸汽灭菌B(2)酵母菌、醋化醋杆菌、乳酸菌果醋假丝酵母乳酸菌糖(3)①蛋白胨和酵母提取物pH扩大培养稀释涂布别离倒置菌落②仅以尿素为氮源富含果胶③C解析(1)无菌操作包括多种灭菌方法,对实验器皿如培养皿等采用高压蒸汽灭菌法灭菌。扩大培养一般用液体培养基,是否要通入空气要根据微生物的需求而定,不能一概而论。(2)在制作果酒、果醋、泡菜的过程中,分别用到的主要微生物是酵母菌、醋化醋杆菌和乳酸菌。果醋发酵属于需氧发酵,需要向发酵装置中通入无菌空气。泡菜腌制的原理是假丝酵母和乳酸菌等主要微生物利用菜中的糖和其他营养物质进行发酵,产生有机酸和醇类物质。(3)①细菌需要的营养物质主要为蛋白胨、酵母提取物等。培养基配制除考虑营养物质、温度、渗透压等之外还要特别注意pH适宜。通常液体培养基用于菌种扩大培养或生产,固体培养基用于研究鉴定和菌种别离,菌种别离常用划线别离和涂布别离,其中涂布别离前常常需要稀释样品。接种后的培养皿应倒置培养,防止培养皿盖上的冷凝水滴落到培养基上,造成菌体随水滴扩散,不能获得单菌落。固体培养基上生长的微生物能形成菌落,菌落的形状、大小、颜色、软硬等特征可用于菌种的鉴定。②别离能产生脲酶的微生物应用以尿素为唯一氮源的培养基。培养苹果青霉获得大量果胶酶时应用含果胶丰富的培养基。③植物组织培养的培养基中必须参加植物激素作为生长调节物质才能完成,有机物的需求较少但不能缺少,而一般微生物培养时不需要添加激素,有机物较多。15.(12分)(2022·台州检测)微生物与人类的生活有着密切的联系。请答复以下有关问题:(1)在果醋、泡菜和果酒的制作过程中,均利用相应微生物的代谢特点进行条件控制,其中始终需要提供氧气的是________的制作;在杨梅酒的制备过程中,为了提高杨梅的出汁率,在压榨前可参加一定浓度的淀粉酶和果胶酶,其中果胶酶可来自________________等微生物;泡菜腌制过程中________和乳酸菌等主要微生物利用菜中的糖和其他营养物质进行发酵。(2)根据微生物的特点,可以利用相应的培养基进行别离或培养,例如用仅以尿素为氮源的培养基可别离能产生________酶的微生物,在配制培养基时,要参加尿素和酚红指示剂,其中尿素用________________灭菌,经培养后菌落周围会出现________色环带。(3)与LB全营养培养基中的菌落相比,以尿素为氮源的培养基中的菌落数________。A.多 B.少C.相等 D.几乎为零(4)利用固体培养基可以进行微生物培养和植物组织培养,两者的培养基明显不同的是后者________。A.需要添加琼脂B.需要添加有机物C.需要添加激素D.需要灭菌处理答案(1)果醋黑曲霉(或苹果青霉)假丝酵母(2)脲G6玻璃砂漏斗红(3)B(4)C解析(1)由于醋化醋杆菌是需氧型生物,因此始终需要提供氧气的是果醋的制作;在杨梅酒的制备过程中,为了提高杨梅的出汁率,在压榨前可参加一定浓度的淀粉酶和果胶酶,其中果胶酶可来自黑曲霉(或苹果青霉)等微生物;泡菜腌制过程中假丝酵母和乳酸菌等主要微生物利用菜中的糖和其他营养物质进行发酵。(2)根据微生物的特点,可以利用相应的培养基进行别离或培养,例如用仅以尿素为氮源的培养基可别离能产生脲酶的微生物,在配制培养基时,要参加尿素和酚红指示剂,其中尿素用G6
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