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转基因检测技术第一页,共十六页,2022年,8月28日Page
2那么什么是转基因食品呢?第二页,共十六页,2022年,8月28日转基因食品(GeneticallyModifiedFood,GMF)概念:指利用基因工程(转基因)技术在物种基因组中嵌入了(非同种)外源基因的食品,包括转基因植物食品、转基因动物食品和转基因微生物食品。转基因作为一种新兴的生物技术手段,它的不成熟和不确定性,必然使得转基因食品的安全性成为人们关注的焦点。Page
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8第八页,共十六页,2022年,8月28日世界上对转基因食品的态度目前,世界上已经形成了两大阵营。一个阵营以美国为代表,包括加拿大和阿根廷等国支持转基因食品。据国际农业生物技术应用服务组织报告,2009年,全球1.34亿公顷的转基因作物中,美国占到了47.8%,居全球之首。另一个阵营以欧盟为代表,包括澳大利亚、新西兰、日本、英国等国反对转基因食品。欧盟的转基因作物种植面积还不到全球的0.3%。Page
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转基因食品检测技术的由来由于转基因物质有可能在耕种、收割、运输、储存和加工过程中混入食品,对食品造成偶然污染。因此,不论是对转基因食品贴示标签,或是对转基因与非转基因原料进行分别输送,转基因原料和旧食品的检测都是必不可少的;另外,要区分转基因与非转基因食品,对转基因食品进行选择性标记,对食品中的转基因含量的多少加以限制,也需要准确有效的基因检测技术。
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12凝胶电泳测序该技术是由美国centus公司的karymullis发明,于1985年由saiki等首次报道,是近年来开发的体外快速扩增dna技术。1988年,等人又成功地将热稳定taqdna聚合酶应用于pcr扩增,是pcr技术上向实用化的一次突破性的进展。。由于许多获得批准的遗传工程体(gmo)表现出一定的导入基因的性状,因此,基因检测也需要以蛋白质为基础的检测技术,这就出现了elisa法。1971年engvall和perlman发表了有关酶联免疫吸附分析法用于免疫球蛋白g(igg)定量测定的文章,使该技术发展成为液体标本中微量物质的测定方法。
转基因存在的检测主要方法是一大类技术,被科学工作者用于分离不同物理性质(如大小、形状、等电点等)的分子。凝胶电泳通常用于分析用途,但也可以作为制备技术,在采用某些方法(如质谱(MS)、聚合酶链式反应(PCR)、克隆技术、DNA测序或者免疫印迹)检测之前部分提纯分子。第十二页,共十六页,2022年,8月28日Page
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14第十四页,共十六页,2022年,8月28日转基因食品检测展望转基因检测技术的发展方向除了在传统的检测技术上改进和几种检测技术的组合以外,还包括有以往没有用于转基因食物领域的检测方法在这个领域的尝试以及全新的技术。例如,色谱技术、毛细管电泳技术、近红外波谱技术和超分支滚环扩增技术等。食品加工过程可能破坏植物纤维结构,以致转基因检测方法难以判断食品是否含有转基因成分。Hurburgh等利用近红外波谱技术初步解决了这个问题。此外,免疫PCR被广泛应用于医药卫生领域,它也可以被应用于转基因食品检测领域。传统PCR检测方法是利用琼脂糖凝胶电泳分析产物,结果可能出现假阳性;而免疫PCR结合了PCR的高效性与ELISA的高特异性。该技术首先利用PCR对目标核酸进行扩增,再用标记探针与之杂交,最后用碱性磷酸酶标记的链亲和素进行ELISA检测,使检测的灵敏度和准确度都有很大的提高,因此预计这种技术在转基因
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