输血传染性指标检测

1997年20122015血站技术操作规程的沿革－《中国输血技术操作规程（血站部分〉》是对1993年发布的《采供血机构和血液管理办法3择，以及《且1站基本标准》的技术性支持文件一《血站技术操作规程》是对2006年发布的一法两规

的技术性支持文件；是在体系化管理思想指引下，对血站技术要求的新发展建立健全全

国各级采供血机构，实施血液“三统一”

管理，我国血液管理规范化起步

-2011年，《血站技术操作规程（2012版〉》-2015年，《血站技术操作规程（2015版〉》-1978年，《关于加强输血工作的请示报告》

-1979年，《全国血站工作条例（试行草案）》

进一步细戈IJ对血站的管理-1993年，《采供血机构和血液管理办法》-1993年，《血站基本标准》〈涵盖了GMP的基本要素〉完善技术要求作为管理要求的支持-1997年，《中国输血技术操作规程〈血站部分〉》体系化管理思想指引下，技术要求的新发展8法律中华人民共和同献血5t. (1998)法规／规章采｛共

阳机构和阳液管理办法 (

1993)血站营理办法

（暂行） (2000)血站管理办法 (2006

)规范性血站基本标准 （才

993

)中国输

阳技术操作规程

（

阳站部分）(

1997)山站基本标准 (2000

)文ft血站质量管理规荒 (2006

)血站实转宰质量管理规

报 (2006

)血主l气技术操作规程 (20才

1)技术标准献阳者健康检查要求 (200

1)全血和)J,X,分血的质量要求 (2001)献血者健康粉吉要求 (2011)伞血和成分血的质量要求 (2012)我国血站血液检测策略相检测法规的变化时饲我回献血者血穰检测顷同及方法相关法规国外输血相类传3居病检测进展血比重

硫酸铜法二十世纪60年代谷两转氮回事

梅毒一金氏法50年代，梅毒筛查民反应法血比重

毓酸铜法

血型一

玻片法二十世纪70年代1979年巾国生物刷品检定所颁布

4献血员健康体检标准70年代初，献血者IIOsAg筛查－毒梅

－康氏反应肝功能血比.!Ii

硫自费锡法血 玻片法19制年卫宝部发布

《献血件格位置茸参考标准E

(8付

）

卫1985年献血誓就

H’吩市金1085年日本HTLV-1筛查二十世纪80年代梅毒一－康氏反应医司字第79号肝功能IIOsAg反向被动血凝法检测二十世纪90年代1993年卫生部发布

《血站基本标准》

〈卫医发

（1993)1991＇IIOsAg酶联免疫试验检测第2号〕，

供血者健康检查标准中增航了杭州CV

、抗．1990年献血者扰

IICV筛查1999年HCV

阳A

HIV

ANAj市查IUV

（离危人疆塔〉

的险测．1997年8月，卫生部发布

《中国输血技术操作规程

｛血

站部分〉

｝

〈卫医发I1997

I第28

号

〉1993年抗

IICV

酶联兔疫试验

抗

HIV

--11串联免疫拭验”明年二十一世纪2010'年NAT:lOU年l＇

《默力

者健康检沓要求

（

uBllS4b

I

)

l和

f伞血及成分血质量要求

（GB18469）

》

发布实施2006年卫宝部分别发布丁

《血站质量管也规范B

和

《血

站实验室质量管理规We>2011年卫生部发布

4血站技术操作技术规程》

（2012版〉HBsAg、抗

Hα、抗

或CUAHTLVHIV

--ELISA2003

WNV2010

1IOV

ONA2015年2011年发布

｛献血者健康检查要求

（

GB184G7-2011)2012年发布《企血及成分血质量要求

（

GB18469·2012)

)701.

茧主fli

《血筒

，，〉

【捕’E版】，，要求所有血液在进行血清学检测的基础上，必须迹行核酸检测明确规定了核酸检测实验军防污染控制、实验宰信息管理系统、血被枪测标本的处理、核酸检测标本汇集管共耗材的要求、J核酸检测流程、试验结果的判定等要求－增加f化学发光免；庭分析试骗的方出调整丙氨酸氨基转移酶（ALT）检测次数和限值－根据相关卫生标委会及专家建议，将丙氨酸氮基转移酶C

ALT）由2遍检测调整为进行1遍检测，限值由≤40U/L调整为≤5OU/L

赋予国家和省级卫生计生行政部门增加地为性

、时限性输血相关传染病检测项目的权限增加实验室检测方法核酸检测实施的必要性通过核酸检测缩短窗口期(Kleinman,

LelieandBusch,

Transfusion

2010)核酸检测（2010年国家开始试点……

14家）原理：PCR、TMA等技术。直接检测DNA或RNA项目：HBV、HCV、HIV效果：缩短窗口期，大大降低输血风险

目前的ELISA方法：HIV-1/2：14天；抗HCV：72天；HBsAg56天

NAT方法：

HIV-1

:

11天

；HCV

:

22

天; HBV

:

33

天• 4.1

输血相关传染病的检测项

目及检测方法-

4.1.1

检测项目•

4.1.1.1人类免疫缺陷病毒

（

HIV

）

感染标志物，包

括2-

(1）人类兔疫缺陷病毒核酸CHIVRNA)-(2）人类免疫缺陷病毒T型抗体（抗HIV斗）和人类免疫缺陷病毒2型抗体〈抗HIV-2），或者抗HIV斗、抗HIV-2和p24抗原（HIVAg/Ab)• 4.1

输血相关传染病的检测项

目及检测方法-4.1.1检测项目•4.1.1.2乙型肝炎病毒（HBV）感染标志物，包括z- (1）乙型肝炎病毒核酸CHBVDNA)- (2）乙型肝炎病毒表面抗原CHBsAg)•4.1.1.3丙型肝炎病毒（HCV）感染标志物，包括：- (1）丙型肝炎病毒核酸（HCVRNA)“ （2）丙型肝炎病毒抗体（抗HCV），或者HCV抗原和抗体制CVAg/Ab)• 4.1

输血相关传染病的检测项

目及检测方法-

4.

1.1

检测项目•

4.1.1.,4

梅毒螺旋体感染标志物：梅毒螺旋体特异性

抗体

（

抗TP)•

4.1.1.5

丙氨酸氨基转移酶

（A

LT)•

4.1.1.6

国家和省级卫生计生行政部门规定的地方性、

时限性输血相关传染病标志物• 4.1.2.

检测方法-

4.1.2.1

检测方法包括：(1）

核酸扩增检测技术，包括转录介导的核酸扩增检测技术CTMA

）

、实时荧光聚合酶链反应

C

PCR

)(2）

血清学检测技术，包括酶联免疫吸附试验

（

ELISA

）、

化学发光免疫分析试验

（CLIA

)(3）

速率法

〈湿化学法〉• 4.1.2.检测方法-4.1.2.2检测策略·实施核酸检测试剂批签发之前，HIV、HBV和HCV感染标志物应采用2遍血清学检测和T遍核酸检测，血清学检测应采用2个不同生产厂家的试部lz实施核酸检测试剂批签发之后，HIV、HBV和HCV感染标志物应采用核酸和血泊学检测2种方法各进行T次检测。对于酶免检测阳性的标本可不再进行核酸检测，直接视为该项目检测结果不合格·梅毒螺旋体感染标志物采用2个不同生产厂家的血清学检测试剂进行检测•ALT采用速率法（湿化学法〕进行1次检测夹心法HCV抗体检测试剂的改进和优势1、IgG+IgM联合检；2、双抗原夹心；3、生物素-亲和素级联放大；4、加样50µL+生物素50µL

；5、天然抗原构象。b

bIgG抗体IgM抗体生物素化抗原EE①

缩短“窗口期”，降低传染风险；②

提升“特异性”，减少血液浪费及医疗纠③

增强“灵敏度”，提高检出能力；④

改进“加样量”，操作稳定，重复性好；⑤

提取“新抗原”，构象提升，活性更高。减少输血传播病原体的对策

从安全的献血者中采集血液

从固定献血者中采集血液

无偿血比有偿血安全性高5~10倍。

严格进行血液病原体标志物的筛查

自动化，减少差错

严格按操作过程操作：RNA病毒易降解，防止污染

提高检测方法的灵敏度

为什么要提高检测的灵敏度

OBI的病毒滴度往往低于HBsAg阳性献血者

核酸试剂的调整减少输血传播病原体的对策提倡患者血液保护，尽可能减少输血以患者为中心，

患者获得最佳病情转归为目的（综合评估风险、

资源、

费用、

预后、

其他等）纠正贫血，促进造血，提高对失血的耐受能力最大限度控制血液丢失循证基础上，采用适当的血液保护方式合理应用异体血液2014年中国输血协会第七届输血大会临床不合理的输血达50%（北京协和医院麻醉科主任黄宇光教授）血液和血液制品的病原体灭活两遍ELISA一遍NAT血液筛查模式流程图标 本酶免检测NAT样本筛选样本剔除弃去酶免阳性酶免阴性或待查核酸检测阳性标本阴性标本酶免待查拆分/鉴别阳性再检阳性再检阴性不合格合格NAT待查 酶免阴性拆分/鉴别阴性合格 合格不合格两个互为备份核酸检测实验室一个酶免检测实验室共计约1200m2全自动加样STAR全自动酶免后处理FAME全自动生化680