培养基与微生物的分离

培养基与微生物的分离第1页/共18页第2页/共18页第3页/共18页一、培养基的类型和作用划分标准培养基种类特点用途物理性质液体培养基不加凝固剂工业生产半固体培养基加凝固剂，如琼脂观察微生物的运动、分类、鉴定固体培养基微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种第4页/共18页划分标准培养基种类特点用途化学成分天然培养基含化学成分不明确的天然物质工业生产合成培养基培养基成分明确(用化学成分已知的化学物质配成)微生物的分类、鉴别第5页/共18页划分标准培养基种类特点用途用途选择培养基允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他微生物生长培养、分离出特定微生物，如培养酵母菌或霉菌，可在培养基中加入青霉素；培养金黄色葡萄球菌，可在培养基中加入高浓度食盐鉴别培养基根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品鉴别不同种类的微生物，如用伊红—美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌(若有，菌落呈深紫色，并带有金属光泽)第6页/共18页科目一考试/2016年科目一模拟考试题科目二考试2016年科目二考试技巧、考试内容、考试视频第7页/共18页二、微生物的分离与鉴定微生物的分离方法有很多种，本专题中常用的是：平板划线法、稀释涂布平板法、微生物的选择培养等。针对不同微生物的特点选择不同的方法，对目的微生物进行筛选。以下是尿素分解菌和纤维素分解菌的分离与鉴定比较。第8页/共18页尿素分解菌的分离与鉴定纤维素分解菌的分离与鉴定分离选择条件利用尿素为唯一氮源利用纤维素为唯一碳源鉴定原理细菌等微生物合成脲酶，将尿素分解产生NH3，使pH升高，加入酚红变红色分解纤维素的微生物产生纤维素酶，将纤维素分解为纤维二糖或葡萄糖，使纤维素—刚果红复合物降解而出现透明圈步骤土壤取样→制备培养基→样品梯度稀释→涂布平板→培养观察→进一步鉴定土壤取样→制备培养基→选择培养→富集培养→梯度稀释→涂布培养→刚果红染色→挑取菌落→进一步鉴定第9页/共18页1．(2011·重庆高考)下列有关细菌培养的叙述，正确的是

(

)A．在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌B．在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长C．向液体培养基中通入氧气能促进破伤风杆菌的生长D．在半固体培养基中接种细菌培养后可以观察其运动解析：单个菌落中只含有一种细菌；青霉素抑制细菌生长，而对真菌没有影响；破伤风杆菌是厌氧型细菌，通入氧气会抑制其生长。答案：D第10页/共18页2．微生物与人类关系密切。虽然有些微生物能使动植物患病，但多数微生物对人类是有益的，请回答下列有关问题：(1)下表为两种微生物的培养基配方。A培养基：KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O葡萄糖尿素琼脂1.4g2.1g0.2g10.0g1.0g15.0g第11页/共18页

B培养基：纤维素粉NaNO3Na2HPO4·7H2OKH2PO4MgSO4·7H2OKCl酵母膏水解酪素5g1g1.2g0.9g0.5g0.5g0.5g0.5g第12页/共18页将上述两种培养基中的物质分别溶解后，均用蒸馏水定容到1000mL。①如果要进行土壤中分解尿素的细菌的分离，则需要选择上述哪种培养基？________，该培养基能分离尿素分解菌的原因是__________________________________________。②在该培养基中可加入________指示剂，根据指示剂的颜色可鉴定该种细菌能够分解尿素。③从功能上来看，上述两种培养基均属于________培养基。第13页/共18页(2)把牛肉膏蛋白胨固体培养基倒入平板，等培养基冷凝后，应将平板________放置，这样做的目的是可防止________造成污染。(3)微生物接种的方法很多，平板划线法操作结束时，为什么仍需要灼烧接种环？______________________________。(4)微生物培养过程中还有什么方法或步骤要防止其他微生物污染？________________、_______________________、________________。第14页/共18页解析：在进行土壤中分解尿素的细菌的分离时，培养基中尿素是唯一的氮源，只有能分解尿素的微生物才能生长繁殖，这种培养基属于选择培养基。接种时及接种操作结束后，仍需要灼烧接种环以杀死接种环上残留的细菌，避免污染环境和感染操作者。答案：(1)①A培养基培养基中尿素为唯一氮源，只有能分解尿素的微生物才能生长繁殖②酚红③选择(2)倒过来皿盖上的水珠落入培养基(3)杀死接种环上残留菌种，避免污染环境和感染操作者(4)培养基灭菌接种环境灭菌接种过程无菌操作第15页/共18页KH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4·7H2O0.2g葡萄糖10g尿素1g琼脂15g将上述物质溶解后，用自来水定容到1000mL第16页/共18页(1)培养基中加入尿素的目的是________，这种培养基属于________培养基。(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的________和________，实验需要振荡培养