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文档简介

学合成和高效纯化技术的最新进展大大减少了以往寡核苷酸合成所需要的的时间和精力。三、所需仪器、用具及流动相rr)(一)合成(二)粗样前处理变)。样品脱保护完从烘箱拿出，放冰盒冷却，接近常温后用移液枪将样品从Tube中转移至试管或鸡心瓶(可加纯水润洗Tube)。(三)修饰反应(四)HPLC逆向分取(五)HPLCPA100色谱柱再分取(六)C18柱脱盐湿树脂，待注射器内的甲醇接近流干，加水置换有机溶剂，待水快流干，加入TEAB置换(七)HPLCPA200色谱柱进行纯度检测(八)样品分装品离子交换HPLC纯化原理：依据分子(DNA)所带负电荷的多少，利用梯度洗脱(分辨(一)前处理：1.60度以上脱保护的样品从烘箱拿出来的时候要室温放置一分钟再转入冰盒，防止2.注意有树脂的样品转移时不要将过多的树脂转移至试管，以防蒸样的时候暴沸。3.蒸样时，不要将样品直接放至水面，要将样品先放至水面上方十厘米预热。(二)修饰反应光。2.修饰试药需要提前将试药从冰箱拿出室温解冻。(三)HPLC分取的分取梯度，进样品之前仪器用该梯度平衡。2.吸样品之前进样针要清洗到位，以防止上一个样品残留造成样品混合。(四)C18脱盐(五)分装2.分装量的确定及分装体积，需要明确负责人，并且确认体积。(一)1260开机维护为流速的突然升高造成机器压力过大。(二)1260使用维护谱柱一定要定期用水冲洗，将盐分冲洗掉。(三)1260关机维护[1]王维.多肽与寡核苷酸偶联纯化方法及功能化寡核苷酸的应用研究[D].湖南大学,2016.[2]翁国锋.基于质谱技术的寡核苷酸分离分析方法研究[D].浙江大学,2019.[3]柴梅梅.浅谈高效液相色谱仪日常维护经验[J].食品安全导刊,2020(27)

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