基础科学细胞培养概述

基础科学细胞培养概述第1页/共23页优点

2.可控制：

可控制-选择对象：均一性、重复性

哪一种：类型：上皮？间质？--

性质：正常？肿瘤？--

阶段：

可控制-调节条件：各种因素

物理、化学、生物等因素

第2页/共23页优点2.可控制：

可控制-利用方法：

采用各种研究技术、记录方法：

研究：倒置生物显微镜、荧光显微镜、

电子显微镜、流式细胞术、激光共焦

显微镜、免疫组织化学、原位杂交、

同位素标记--

记录：摄影照片、缩时电影、电视--第3页/共23页优点

3.应用广：

学科多：

对象广：

各种动物：低等动物--高等动物--人类

一种动物：不同年龄--

不同组织--

正常或异常（肿瘤--）

第4页/共23页优点4.较经济：

可提供大量、同时、重复性好的、

生物学性状相似的实验对象第5页/共23页细胞培养的缺点

现人工模拟体内环境的技术已经很高,

但,人工所模拟的条件与体内实际情况

仍不完全相同.

当细胞被置于体外培养后,

生活在缺乏动态平衡的环境中,

久了，必然发生变化.第6页/共23页1.与体内主要不同

相对孤立、相对单一

缺乏体内的系统作用、

失去神经体液的调节

和细胞相互间的影响

第7页/共23页缺点

2.主要表现

失去原有组织结构和细胞形态

分化减弱或不显

细胞趋向单一化；

3.提示

要正确认识体外培养细胞

是一种特定条件下生长的细胞群体。

应用

第8页/共23页生长类型第9页/共23页体外细胞培养物的生长类型

按生长方式:2型

粘附型细胞:附着在某一固相支持物表面才

能生长的细胞。

悬浮型细胞:不必附着于固相支持物表面，而

在悬浮状态下即可生长的细胞。

绝大多数有机体细胞属粘附型细胞，

只有少数细胞类型，如某些肿瘤细胞和白细胞

可在悬浮状态下生长第10页/共23页贴附(粘附)型细胞

粘附:是大多数有机体细胞在体内

生存和生长发育的基本存在方式含义两方面结果基于粘附特性，使细胞与细胞之间相互结合形成组织，

有机体的绝大多数细胞必须

粘附于一固相表面

才能生存和生长。

第11页/共23页培养时：细胞被放到体外环境中以后,同样需要粘附于某一固相表面才能生存和生长，因而

属于粘附型细胞。粘附(锚定或锚着)依赖型(性)细胞：

唯有粘附于固相表面才能生存的细胞第12页/共23页

类型

细胞在体内、外的粘附方式：存在差异

体内：粘附是全方位

外形具有复杂的立体特征

体外：多数情况，细胞只有一个附着平面

外形一般与体内时明显不同

按照培养细胞的主要形态，可分为几大类型

第13页/共23页分类

根据形态大致的不同，主要2类：

上皮样成纤维细胞样

其它，不定型第14页/共23页上皮样细胞型

名称：仅形态上似体内，实际上不完全等于--来源：来源于外胚层，内胚层细胞

如：皮肤及其衍生物消化道，乳腺，肺泡上皮性肿瘤形态：类似体内的上皮细胞

扁平，不规则多角形，中有圆形核

第15页/共23页生长特点

易相连成片

相靠—紧密相连—成薄层—

铺石状

生长时呈膜状移动

很少脱离细胞群而单个活动

第16页/共23页成纤维细胞样细胞

名称：凡在培养中形态与成纤维细胞类似的来源：由中胚层间充质组织起源的组织

如：真正的成纤维细胞心肌，平滑肌，成骨细胞，血管内皮形态：似体内成纤维细胞的形态

胞体梭形或不规则三角形

胞质向外伸出2—3个长短不等的突起

中有卵圆形核第17页/共23页生长特点

排列成放射状，漩涡状

并不紧靠连成片，

细胞—细胞接触易断开而

单独行动

游离的单独的成纤维样细胞，

常有几个伸长的细胞突起

第18页/共23页贴附生长型--类型1.与体内同名的细胞不完全相同

如：形态相似的成纤维细胞，可不同来源

自同一动物不同组织的成纤维样细胞相似但

发展趋向不同2.培养细胞的形态不稳定

条件改变，细胞形态可有变化第19页/共23页培养细胞形态不稳定

血清

Hela高血清低血清

成纤维细胞样上皮样细胞

pH

Hela太酸或太碱标准pH

成纤维细胞样上皮样细胞

细胞密度

3T3低密度高密度

成纤维细胞样上皮样细胞

生长状态改变

悬浮或贴附

悬浮贴附

圆形成纤维或上皮样

转化与否

未转化转化后

成纤维样可成上皮样第20页/共23页悬浮生长型

概念

培养时不贴附于底物而呈悬浮状态生长

或以机械方法使保持悬浮状态下生长来源

自血，脾或骨髓，尤以血中白细胞

癌肿细胞也可能特点

在悬浮中生长良好细胞圆形，单个或小细胞团第21页/共23页优点

生存空间大，提供数量大传代方便(不需消化)

易于收获可获得稳定状态缺点