消疲怡神口服液抗应激的实验研究-对强制冷水游泳应激大鼠行为及神经内分泌的影响(完整版)实用资料

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消疲怡神口服液抗应激的实验研究——对强制冷水游泳应激大鼠行为及神经内分泌的影响（完整版）实用资料(可以直接使用，可编辑完整版实用资料，欢迎下载）消疲怡神口服液抗应激的实验研究*

——对强制冷水游泳应激大鼠行为及神经内分泌的影响

摘要：通过强制冷水游泳应激模拟慢性疲劳的发病过程。结果表明，强制冷水游泳应激使大鼠自发活动减少，出现抑郁倾向，力竭游泳时间缩短，体力下降，血清中肾上腺素(E)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)含量升高，肾上腺抗坏血酸含量降低，这些与慢性疲劳患者症状表现和实验室检查结果相似。以补气理气、调理肝脾为组方原则的中药复方“消疲怡神口服液”可以调节上述变化，表明其具有抗应激、抗疲劳作用，同时该结果还为研究中医气机失调、肝脾失和与应激、慢性疲劳的关系提供了理论依据。

关键词：消疲怡神口服液；慢性疲劳；行为；神经内分泌；大鼠EffectsofXiaoPiYiShenOralFluidOnRatBehaviorand

NeuroEndocrineSystemUnderForcedColdWaterSwimmingConditionsWangLin,WangTianfang,ZhangCuizhen,etal.

(BeijingUniversityofTraditionalChineseMedicine,Beijing100029)ABSTRACT:Toassesswhethertherepeatedforcecoldwaterswimming(RFCS)conditionsinfluencestheoccurrenceofchronicfatigueandthefunctionalmechanismoftheoralfluidofXiaoPiYiShen(XPYS),changesofbehaviorandneuro-endocrinesysteminratswereexamined.ResultsshowthatRFCSinhibitspontaneousactivitiesinopenfieldtests,shortenexhaustedspontaneuousactivitiesinopenfieldtests,shortenexhaustedswimmingtimeinnormaltemperaturewater,increaseepinephrine(E),dopamine(DA)and5-hydroxytryptamine(5-HT)levelsinserumanddecreaseascorbicacidlevelsinadrenalgland.Thoseindicatethatthisanimalmodelishelpfulforfurtherresearchofchronicfatigue.XPYScouldreversethechangescausedbyRFCS.ThatsuggestsXPYShasantistressandantifatiguefunction.ItalsobenefitsthestudyofrelationshipbetweenthedisorderofQi,liver,spleen(TCM)andthestressandthechronicfatigue.

KEYWORDS:XiaoPiYiShen(XPYS)Oralfluid；Repeatedforcedcoldwaterswimming(RFCS);Behavior;Neuro-Endocrinesystem;LiverandSpleen;Rat1988年，美国疾病控制中心将持续性或间断发作性疲劳和衰弱持续至少半年以上为主要特征的症候群正式命名为慢性疲劳综合征(简称CFS)。大量临床研究表明，该病的产生与精神刺激、不良习惯、过度劳累等多种应激因素有关，患者除疲劳的表现外，多伴有不同程度的精神抑郁等精神神经症状及免疫功能紊乱［1～5］。我们以强制冷水游泳模拟慢性疲劳的发病过程，从应激角度，观察应激导致动物疲劳时，其大体行为及神经内分泌系统的变化和以补气理气、调理肝脾为组方原则的中药复方“消疲怡神口服液”对该变化的影响，初步探讨慢性疲劳的发病机理、消疲怡神口服液抗应激抗疲劳的作用机制及其与中医肝脾的关系。1材料与方法1.1实验动物及分组

二级Wistar雄性大鼠，体重(170±10)g，由流行病研究所实验动物中心提供。按体重随机分为5组：模型组(n=15)，在造模同时予蒸馏水灌胃，2mL/d；人参皂甙组(n=15)，造模同时予以人参皂甙灌胃，70mg/(kg．d)［6］；小剂量消疲怡神口服液组(简称小剂量组，n=15)和大剂量消疲怡神口服液组(简称大剂量组，n=15)，在造模同时，以消疲怡神口服液灌胃，剂量分别为3.5、7.0g/(kg．d)；正常对照组(n=15)，不造模，仅予蒸馏水灌胃。1.2造模方法

Wistar大鼠购进后，置于室温(20±2)℃清洁级动物室中，5只／笼，自由进食饮水，适应1～2d后，开始造模。每日分别在不同时间令其在冷水(10±1)℃中游泳，每次造模持续时间为6～9.5min，共造模9d。1.3药物与主要试剂

消疲怡神口服液由枳壳、黄芪、人参、柴胡等组成。委托北京市永定制药厂加工，批号：960928，规格：10mL/支(1mL相当于1g生药)。

人参皂甙片，由中美合资吉林省亚威制药生产，吉卫药准字，批号：94032021，规格：0.1g/片，含人参总皂甙含量25mg/片。

肾上腺素(E)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)、高香草酸(HVA)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)、3，4-双羟苯乙酸(DOPAC)、二羟苄胺(DHBA)等均为Sigma公司产品；抗坏血酸(VitC)为国产；柠檬酸、乙酸钠、乙二胺四乙酸二钠(NA2EDTA)、高氯酸(HCLO4)、活性炭、2,4-二硝基苯肼、三氯醋酸、硫脲、盐酸、乙醇等均为国产分析纯。1.4主要仪器

小鼠自发活动测试仪(日本)、开阔箱(据有关文献制作［7］)、水迷宫(中国医学科学院药物研究所，规格依有关文献［7］)。

色谱柱：4mm×150mm，填料为Nava-PaK-C185μm，中国科学院大连色谱中心填充。流动相：50mmol/L柠檬酸-乙酸钠，pH3.5，内含：1.0mmol/LB8离子对试剂，4%甲醇，1.8mmol/L二正丁胺，0.3mmol/L乙二胺四乙酸二钠。检测电压+0.75V。流速1mL/min。Water510高效液相色谱系统(美国)、Water464电化学检测器(美国)。1.5指标测定方法

1.5.1行为指标［7，8］：①自发活动测定，用开阔法测定正中格停留时间、穿格次数、竖起或修饰时间、竖起或修饰次数；②力竭游泳时间。

1.5.2血清中单胺类神经递质测定：通过高效液相色谱系统(HPLC)加电化学检测器(ECD)检测［8］。

1.5.3肾上腺Vitc含量测定：2，4-二硝基苯肼比色法［8］2结果2.1消疲怡神口服液对冷水应激大鼠自发活动的影响

结果见表1。组别n剂量/g/kg正中格停留时间/s穿格次数/次修饰次数/次正常对照组13—5.53±3.11**84±31*31±10*模型组14—11.50±9.5455±3623±11人参皂甙组150.074.27±2.57**55±2127±7小剂量组143.502.87±1.97**81±22*△31±8*大剂量组157.003.76±1.40**69±3323±8

注：与模型组比*P＜0.05**P＜0.01；与人参皂甙组比△P＜0.052.2消疲怡神口服液对冷水应激大鼠力竭游泳时间的影响

结果见表2。表2不同组别大鼠力竭游泳时间的变化组别n剂量/g/kg力竭游泳时间正常对照组13—252.05±54.32模型组14—207.15±85.02人参皂甙组150.07266.56±72.95*小剂量组143.50246.75±102.27大剂量组157.00259.87±55.14*

注：与模型组比*P＜0.052.3消疲怡神口服液对冷水应激大鼠肾上腺VitC含量的影响

结果见表3。表3不同组别大鼠肾上腺VitC含量的变化组别n剂量/g/kgVitC正常对照组13—4390±350*模型组12—3940±510人参皂甙组130.074420±360*小剂量组133.504420±840大剂量组147.004720±1180*

注：与模型组比*P＜0.052.4消疲怡神口服液对冷水应激大鼠血清单胺类递质及其代谢产物含量的影响

模型组大鼠血清E、DA、HVA、5-HT及5-HIAA含量比正常组升高；其中DA含量升高尤为显著(P＜0.05)；消疲怡神口服液可以降低DA、HVA、5-HT含量，并使5-HIAA含量升高，而对E含量无明显影响；人参皂甙组血清5-HIAA含量与模型组相比升高，但其余各项指标无明显变化(见表4)。表4不同组别大鼠血清E、DA、HVA、5-HT及5-HIAA含量的变化组别n剂量/g/kgEDAHVA5-HT5-HIAA正常对照组10—195±702004±1482*386±181361±240223±91模型组9—287±1084499±2405445±139472±343270±174人参皂甙组130.07284±1694114±2110418±191403±206485±148*△小剂量组113.50256±1412115±1097*●312±101*320±217382±197△大剂量组137.00331±1102922±1566*●362±96294±212369±147△

注：与模型组比*P＜0.05；与人参皂甙组比●P＜0.05；与正常组比△P＜0.053讨论中医学认为慢性疲劳是一种涉及多脏腑、多系统功能失调的疾病，与气机失调关系密切，其发病多与情志不遂、劳逸、外邪有关［9］。而西医学认为应激是导致或诱发慢性疲劳的重要因素。其中又以长期的慢性应激较急性应激更为多见。实验和临床研究均表明，慢性应激能导致机体行为改变、多种功能失调，甚至会引起组织结构的改变［10，11］。在各种慢性应激中，不可预期的应激比可预期的应激更易对机体产生不良影响［12，13］。基于以上认识并参考有关文献［14］，我们选用强制冷水游泳作为应激源，在每天的不同时间造模，并改变每天造模持续时间，减少机体对应激的耐受，力制造一个包括温度刺激(寒冷)、体力消耗(游泳)以及精神刺激(强制冷水游泳所致情绪刺激)在内的由多种应激因素所致的应激动物模型。它既模拟了中医有关疲劳的发病过程，也符合西医所认为的由慢性应激导致疲劳的理论。实验结果证明，模型动物体力下降(力竭游泳时间缩短)，出现抑郁倾向(自发活动减少)、神经内分泌功能紊乱，这些与疲劳病人的症状表现和实验室检查相似。由此可见，该模型是一种值得进一步提高和完善的可用以研究慢性疲劳的动物模型。同时也说明在应激导致慢性疲劳的过程与机体神经—内分泌—免疫系统功能的紊乱关系密切。

机体在各种应激状态下，多出现以交感神经—肾上腺髓质与下丘脑—垂体—肾上腺皮质反应为主的变化，使血清儿茶酚胺和肾上腺糖皮质激素含量上升，这常常被视为应激的标志。结果显示，强制冷水游泳使大鼠血清中单胺类递质含量普遍出现升高趋势，其中多巴胺含量与正常对照组相比有明显统计学差异。消疲怡神口服液能降低5-HT、DA及其代谢产物HVA含量，并使5-HT代谢产物5-HIAA含量升高，提示其抗应激作用可能与抑制外周DA的合成与代谢，促进5-HT分解有关。

肾上腺Vitc含量是反映肾上腺皮质功能的经典指标。结果表明，强制冷水游泳可明显降低大鼠肾上腺VitC含量，表明此时肾上腺功能活跃，皮质酮合成增加。消疲怡神口服液和人参皂甙可以有效逆转这一变化，提示两药可以抑制应激情况下肾上腺皮质功能的过度活跃，减少肾上腺皮质激素的合成，减轻应激所致的不良影响。

消疲怡神口服液和人参皂甙都能提高正常小鼠和应激大鼠神经系统兴奋性，增加其自发活动，延长其游泳时间，增强其体力，并能部分或全部逆转强制冷水游泳应激所致血清单胺类递质及肾上腺VitC含量的变化。三组之间在提高体力方面无明显统计学差异，而在提高神经系统兴奋性、增加动物自发活动方面，小剂量消疲怡神口服液作用优于人参皂甙。考虑这与人参皂甙单纯补气，而消疲怡神口服液除补气之外，还具有理气调肝的作用有关。我们认为，在机体受到不良刺激产生疾病的过程中，除了虚的一方面外，气机紊乱也是一个重要因素。我们通过临床观察发现，慢性疲劳的病位多与中医肝脾有关，尤与肝关系密切。肝主疏泄，调畅气机，喜调达而恶抑郁，藏血，主情志，为“罢极之本”，通过肝的疏泄作用使全身气机调畅，各脏腑功能活动正常。不良刺激可干扰机体气血运行，影响脏腑功能，使肝疏泄失常，而产生疾病。所以在治疗上，除补益外，加以理气调肝之品，则可以通过肝的疏泄，使全身“气血调和”，更有助于减少机体的不良影响，减轻或消除疾病。本实验的结果为进一步研究中医肝脾与应激、慢性疲劳的关系提供了一定的实验依据。作者简介：王琳，女，26岁，医学硕士，助教

*国家自然科学基金资助项目(NO.39500184)

国家中医药管理局资助项目(NO.95B109)

作者单位：北京中医药大学北京100029参考文献1BarkerE,FujimuraSF,FadenMB,etal.Immunologicabnormalitiesassociatedwithchronicfatiguesyndrome.Clin.Infect.Dis.1994,18(1):136～141

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瑞士天森医药集团，在中国西安高新产业园区投资近亿元，已建成占地百亩，宠物外用消毒护毛产品达标生产线，保健药品GMP生产车间和全新的香波浴液三条生产线。

口服液体制剂生产中常见问题问题的提出成都三勒浆集团四川华美制药的液体制剂车间有两条30mL液体制剂生产线，主要用于口服液生产。该生产线由卧式洗瓶机、杀菌干燥箱及灌装机组成，设计生产能力为180支/min。在生产线的运行中，各工序设备的稳定性及衔接性对生产线的生产效率有着至关重要的作用。但是，在实际生产中该条流水线生产效率只能达到设计能力的70%，使得生产成本增加，工作时间增长。经实际分析，发现造成生产率低下的主要原因为：洗瓶机出瓶拨轮不合理所造成“破瓶”及灌装机计量泵计量不稳定。问题的解决洗瓶机“破瓶”问题的解决在维修中我们对洗瓶机进行了全面检查，发现洗瓶机各部件均完好，且零部件的配合均无问题，但“破瓶”故障仍然频频发生。经过仔细观察终于发现了问题的根源，原来是出瓶拨轮至杀菌烘箱平台这段的玻瓶阻力过大，造成出瓶拨轮负荷增加，从而导致夹头与出瓶拨轮错位而“破瓶”。为什么在短短1m的轨道及平台上会出现负荷过重的现象呢？从结构上看，轨道两侧由U型不锈钢嵌入尼龙条组成，轨道是厚20mm、宽12mm的不锈钢条，烘箱平台由一块约0.65m2的不锈钢板组成。这样的结构对玻瓶都不会造成太大的阻力，我们将没有清洗的玻瓶布满轨道及烘箱平台用手在出瓶拨轮处推玻瓶，发现只需一点点力就能将玻瓶推动。另外，我们将这些玻瓶清洗后再布满轨道及烘箱平台，用手推玻瓶发现阻力明显增加，于是得出由于水在金属表面不易流动且水的涨力等原因使玻瓶与不锈钢表面产生吸附力，增加玻瓶前进的阻力，从而引起洗瓶机故障进口泵。经研究，我们在轨道及平台上平辅了一层聚四氟板，利用聚四氟的较低的摩擦系数和水在上面的良好流动性来缓解玻瓶的阻力。经生产验证，此方法完全解决了洗瓶机易“破瓶”的故障，减少了洗瓶机停机次数。灌装机计量泵计量不稳定问题的解决灌装机计量泵共有12组，任一计量泵出现问题都会造成设备停机，如何增加计量泵的稳定性是解决灌装机产能不足的关键。我们的生产线当时设计生产规格范围为30～100mL，而当时制造商所提供的这组计量泵计量范围是20～100mL，其计量筒直径大，容易造成计量偏差，且由于当时活塞采用聚四氟机械加工精度有偏差，活塞磨损较快造成滴液、漏液等现象使灌装机停机频繁。后来，制造商重新购回一组计量筒直径小的计量泵，专用于30mL规格，但新计量泵在使用中聚四氟活塞仍然磨损较快从而影响设备稳定性，因此我们对活塞部位进行了小的改动，以增加计量泵的稳定性。改造前，活塞由两块聚四氟V型密封件安装在活塞杆上工作，依靠聚四氟V型后边缘进行密封(如图1所示，由于聚四氟的材质不耐磨、弹性差，活塞V型后边缘很容易磨损，造成计量偏差，只能停机更换活塞，而且活塞的加工精度要求高，加工成本较高，增加了维修费用。改造时，我们利用磨损后的聚四氟活塞将其V型后边缘切削掉，只留下圆柱部位。根据活塞筒直径订做硅胶垫，再用两块聚四氟圆柱体把硅胶夹在中间，适当拧紧活塞杆紧固螺栓(如图2所示，利用硅胶垫的密封特性密封，达到耐用与密封的目的。这样改造后增加了活塞的耐磨性，减少设备停机次数，而且硅胶垫加工容易、费用低。出瓶拨轮改造由灌装机出来的成品经由输送带送到灭菌车间灭菌，中间任一设备出故障都会影响产能。由于原灌装机出瓶拨轮设计时出瓶方式采用撞击式(如图3所示，造成玻瓶容易撞破导致药液泄漏污损输送带，导致停机，而且撞击时发出的噪音令操作人员十分难受。针对这个问题我们将出瓶拨轮进行技术改造，其方法是把出瓶拨轮直径加大，其他尺寸不变，再沿每个瓶槽弧线切割(如图4所示。这样改造后，出瓶时依靠凸出部分挤压玻瓶大大减少了瓶与瓶之间的撞击力，玻瓶自然完好无损，减少了停机次数，改善了操作工人工作环境。结语经过上述一系列技术改造后，30mL液体制剂生产线的稳定性明显提高了，基本达到了生产线的设计生产能力，大大节约了生产成本。可以认为，对于设备的维修，不能只看故障表面，而要掌握设备的工作原理，针对故障进行分析，找出故障的症结，这样才能彻底解决问题。同时对设备的缺陷不能听之任之，而要认真分析，提出行之有效的技术改造方案，进行技术改造，这样才能减少设备故障率，从而提高设备的稳定性。

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近年来，在“开拓、拼搏、进取”的海康精神激励下，全公司干部职工艰苦创业，使我公司口服液瓶、抗生素瓶年产量超过10亿支，居同类产品前列。针剂塑料托，口服液塑料托年产量超过10亿个，排名全国第一。

我公司获得多项荣誉：于2002年获得国家医药管理局《药包材容器生产企业许可证》,2007年获《沧州市文明企业》称号，2006年-2021年获泊头市银行“AAA”企业称号，近几年来一直获泊头市政府颁发的《重合同守信誉单位》称号，泊头市国税局评为《纳税先进单位》称号，被轻工厅，市政府评为《先进单位》，《明星企业》称号；并在2003年至今陆续通过了各种药用玻璃包装瓶及PVC塑托的生产注册证的申请换证的认证工作。

高效率的生产，先进的生产工艺，强大的供货能力，优良的质量保证，完善的售后服务，使我公司成为您可信赖的合作伙伴。我公司真诚希望与您携手并进，共创辉煌。加油站油罐液位仪安装存在问题和解决方案黄胜(中国石油福建销售公司,350003福建省福州市摘要在加油站油罐的液位仪安装过程中，存在许多不规范现象，如使用防爆穿线盒代替防爆接线盒进行连接线路、线路通过不同危险区域间未进行有效的密封隔断和违反防雷相关规范等。通过有效对这些问题的解决，促进加油站液位仪安装和使用更加规范。关键词液位仪安装问题解决方案引言某加油站的便利店管理员在早晨上班打开便利店的大门时，一股浓重的油气扑面而来。便利店的员工打开门窗通风换气，警示杜绝一切火种，事件没有进一步扩大。到底便利店的油汽从哪里扩散来的呢？经排查发现油罐内的油蒸汽通过液位仪立管法兰信号线出口处泄漏出来，通过信号电缆金属套管空隙持续不断地向便利店进行扩散。特别在罐车卸油的时候，油汽扩散更加严重。工程技术人员对加油站的液位仪进行一次彻底检查，发现加油站在安装液位仪系统过程中，在设计和安装方面存在违反电气防爆、防雷安全规范等现象。1加油站油罐液位仪安装存在的问题1.1不符合电气防爆规范现象（1）在人孔(阀井内，液位仪的信号线路与控制台的信号线路之间的连接使用防爆穿线管而没有使用防爆接线盒，线路在防爆穿线盒进行直接连接后用胶布包扎等。根据《加油加气站设计和施工规范》加油站内埋地卧式油罐爆炸危险区域的等级范围划分规定，人孔井内部空间属于爆炸危险1区，根据《爆炸和火灾危险区域电气装置设计规范》相关条款规定，在1区内电缆严禁有中间接头，须将该接头置于符合相应区域等级的防爆类型的接头盒内。而防爆穿线盒只能用来穿线使用而不能用来接线使用。（2）电缆线路穿过不同危险区域或界面时，未采用非燃性材料作有效的隔离密封，如在人孔（阀）井内0区与1区之间，即液位仪立管法兰信号线出口处；1区和2区与火灾危险区域间，即信号线路出人孔(阀井的线路保护钢管进口处和线路进入配电室或站房的信号线路保护钢管出口处未采用有效的隔离密封，可能导致爆炸性混合物（油气）沿管路及其与建筑物的空隙流动散逸到配电房或站房和火花的传播而引起爆炸事故的发生。另外由于没有采取有效的隔离密封，从油罐里散逸出来的油气在穿线盒内聚焦，腐蚀控制电缆的外护套，且在穿线管内形成白色的结晶体，油汽同时腐蚀了电缆线路的接头。油气如果腐蚀信号线路的接头，将影响液位信号的传送，影响液位仪的正常使用。如果信号线接头由于接触不良等原因产生火花，可能存在引起火灾爆炸的风险。1.2违反防雷保护相关规范的现象加油站的信息系统电缆未采用铠装电缆或导线穿钢管配线，对电缆未能实施有效保护，却使用PVC管代替保护钢管的现象，违反《加油加气站设计和施工规范》防雷10.2.6条规定。在安装过程中还存在配线电缆保护钢管口两端未作保护接地。在部分加油站还存在接地不规范现象，由于人孔（阀）井内未设置专用接地极，接地线直接接在管道的法兰上。保护钢管两端未作接地，就不能产生电磁封锁效应，防止雷电波的侵入，可能导致雷电事故发生。1.3设备安装缺陷液位仪系统在安装过程中，存在许多过渡接头，如在防爆穿线盒与立管连接处，接线盒采用立式直接连接，未采用过渡接头，在设备运行过程中，在外力作用下容易折断，影响液位仪的正常使用。如图1所示。2安装解决方案2.1爆炸危险区域线路连接爆炸危险区域内（人孔井内）使用防爆穿线盒进行线路连接，应严格按照《爆炸和火灾危险区域电气装置设计规范》相关条款要求，使用符合相应区域危险等级的防爆类型的接头盒。建议在爆炸危险区域1区内电缆要避免产生中间接头的可能性，施工人员必须做到周密的安排，按电缆的长度，把电缆的中间接头安排在爆炸危险区域之外，并应将敷设好的电缆切实加以保护。如图1所示。2.2不同危险区域之间隔离密封在电缆线路穿过不同危险区域或界面时，须采用非燃性材料作有效的隔离密封。在现场施工实践中，依据《爆炸和火灾危险区域电气装置设计规范》第2.5.12条和《加油加气站设计和施工规范》12.6.6条第二款的规定，建议采用四级密封隔离措施。（1）一级密封隔离为在立管法兰线路出口处用密封组件进行密封，即加装与电缆相匹配的弹性压紧密封圈，再拧上紧定螺栓，可有效密封防止油气扩散。（2）二级密封隔离为在防爆接线盒连接信号线，并使用环氧树脂胶密封电缆接头和屏蔽层，防止油气通过。（3）三级隔离密封为在电缆保护套管与防爆接线盒之间加装一个防爆穿线盒，如下图1中1处所示，并在其中填充满密封胶泥，实现对保护套管端口的密封。（4）四级隔离密封为在室内管线出口处将电缆周围用非燃性纤维堵塞严密，再填塞密封胶泥且长度不得小于40毫米。由于防爆密封胶泥易脱落，有的施工过程中使用环氧树脂密封，但使用环氧树脂电缆将被固化，维修不便。通过以上四级密封措施后能够实现对不同区域之间进行有效密封隔断，杜绝油汽扩散或火花传播。2.3保护钢管两端口接地根据《加油加气站设计和施工规范》10.2.6条规定，信息系统电缆保护钢管两端均应作保护接地。在现场施工实践中，一般在保护两端口加焊一个M8或M6螺栓，用作连接接地线。如果人孔井未设置接地装置，可使用40×4镀锌扁铁从油罐接地干线上引一条接地支线，统一用作人孔井各种设备接地线连接装置。如图1所示。图1操作井内接地效果图2.4安装过渡接头为防止保护管和穿线盒的弱连接处在外力作用下易被碰断的风险，实施改进安装工艺措施，把防爆接线盒从立式安装改为水平安装，并强化防爆挠性管与液位仪立管之间的连接，参照下图2中2处所示，在接头处安装两个对丝和1个弯头可解决。图2液位仪建议安装效果图3结语通过以上的分析，针对在液位仪安装时存在的问题和隐患，依据相关规范提出相应的解决方案，在多个加油站施工实践中证明达到良好效果。另外，我们在加油站技术改造或工艺设备变更过程中，要加强在设计阶段的工艺危害分析，识别在设备变更或技术改造过程中可能带来的危害，通过设计变更等手段来控制这些危害，减少不必要的损失。4参考文献[1]《爆炸和火灾危险区域电气装置设计规范》（GB50058-1992）[2]《电气装置安装工程接地装置施工及验收规范》GB50169-1992）[3]《加油加气站设计和施工规范》（GB50156-2002，2006版）[4]《电气装置安装工程爆炸和火灾危险环境电气装置施工及验收规范》（GB50257-1996）

消疲怡神口服液抗应激的实验研究*

——对强制冷水游泳应激大鼠行为及神经内分泌的影响

摘要：通过强制冷水游泳应激模拟慢性疲劳的发病过程。结果表明，强制冷水游泳应激使大鼠自发活动减少，出现抑郁倾向，力竭游泳时间缩短，体力下降，血清中肾上腺素(E)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)含量升高，肾上腺抗坏血酸含量降低，这些与慢性疲劳患者症状表现和实验室检查结果相似。以补气理气、调理肝脾为组方原则的中药复方“消疲怡神口服液”可以调节上述变化，表明其具有抗应激、抗疲劳作用，同时该结果还为研究中医气机失调、肝脾失和与应激、慢性疲劳的关系提供了理论依据。

关键词：消疲怡神口服液；慢性疲劳；行为；神经内分泌；大鼠EffectsofXiaoPiYiShenOralFluidOnRatBehaviorand

NeuroEndocrineSystemUnderForcedColdWaterSwimmingConditionsWangLin,WangTianfang,ZhangCuizhen,etal.

(BeijingUniversityofTraditionalChineseMedicine,Beijing100029)ABSTRACT:Toassesswhethertherepeatedforcecoldwaterswimming(RFCS)conditionsinfluencestheoccurrenceofchronicfatigueandthefunctionalmechanismoftheoralfluidofXiaoPiYiShen(XPYS),changesofbehaviorandneuro-endocrinesysteminratswereexamined.ResultsshowthatRFCSinhibitspontaneousactivitiesinopenfieldtests,shortenexhaustedspontaneuousactivitiesinopenfieldtests,shortenexhaustedswimmingtimeinnormaltemperaturewater,increaseepinephrine(E),dopamine(DA)and5-hydroxytryptamine(5-HT)levelsinserumanddecreaseascorbicacidlevelsinadrenalgland.Thoseindicatethatthisanimalmodelishelpfulforfurtherresearchofchronicfatigue.XPYScouldreversethechangescausedbyRFCS.ThatsuggestsXPYShasantistressandantifatiguefunction.ItalsobenefitsthestudyofrelationshipbetweenthedisorderofQi,liver,spleen(TCM)andthestressandthechronicfatigue.

KEYWORDS:XiaoPiYiShen(XPYS)Oralfluid；Repeatedforcedcoldwaterswimming(RFCS);Behavior;Neuro-Endocrinesystem;LiverandSpleen;Rat1988年，美国疾病控制中心将持续性或间断发作性疲劳和衰弱持续至少半年以上为主要特征的症候群正式命名为慢性疲劳综合征(简称CFS)。大量临床研究表明，该病的产生与精神刺激、不良习惯、过度劳累等多种应激因素有关，患者除疲劳的表现外，多伴有不同程度的精神抑郁等精神神经症状及免疫功能紊乱［1～5］。我们以强制冷水游泳模拟慢性疲劳的发病过程，从应激角度，观察应激导致动物疲劳时，其大体行为及神经内分泌系统的变化和以补气理气、调理肝脾为组方原则的中药复方“消疲怡神口服液”对该变化的影响，初步探讨慢性疲劳的发病机理、消疲怡神口服液抗应激抗疲劳的作用机制及其与中医肝脾的关系。1材料与方法1.1实验动物及分组

二级Wistar雄性大鼠，体重(170±10)g，由流行病研究所实验动物中心提供。按体重随机分为5组：模型组(n=15)，在造模同时予蒸馏水灌胃，2mL/d；人参皂甙组(n=15)，造模同时予以人参皂甙灌胃，70mg/(kg．d)［6］；小剂量消疲怡神口服液组(简称小剂量组，n=15)和大剂量消疲怡神口服液组(简称大剂量组，n=15)，在造模同时，以消疲怡神口服液灌胃，剂量分别为3.5、7.0g/(kg．d)；正常对照组(n=15)，不造模，仅予蒸馏水灌胃。1.2造模方法

Wistar大鼠购进后，置于室温(20±2)℃清洁级动物室中，5只／笼，自由进食饮水，适应1～2d后，开始造模。每日分别在不同时间令其在冷水(10±1)℃中游泳，每次造模持续时间为6～9.5min，共造模9d。1.3药物与主要试剂

消疲怡神口服液由枳壳、黄芪、人参、柴胡等组成。委托北京市永定制药厂加工，批号：960928，规格：10mL/支(1mL相当于1g生药)。

人参皂甙片，由中美合资吉林省亚威制药生产，吉卫药准字，批号：94032021，规格：0.1g/片，含人参总皂甙含量25mg/片。

肾上腺素(E)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)、高香草酸(HVA)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)、3，4-双羟苯乙酸(DOPAC)、二羟苄胺(DHBA)等均为Sigma公司产品；抗坏血酸(VitC)为国产；柠檬酸、乙酸钠、乙二胺四乙酸二钠(NA2EDTA)、高氯酸(HCLO4)、活性炭、2,4-二硝基苯肼、三氯醋酸、硫脲、盐酸、乙醇等均为国产分析纯。1.4主要仪器

小鼠自发活动测试仪(日本)、开阔箱(据有关文献制作［7］)、水迷宫(中国医学科学院药物研究所，规格依有关文献［7］)。

色谱柱：4mm×150mm，填料为Nava-PaK-C185μm，中国科学院大连色谱中心填充。流动相：50mmol/L柠檬酸-乙酸钠，pH3.5，内含：1.0mmol/LB8离子对试剂，4%甲醇，1.8mmol/L二正丁胺，0.3mmol/L乙二胺四乙酸二钠。检测电压+0.75V。流速1mL/min。Water510高效液相色谱系统(美国)、Water464电化学检测器(美国)。1.5指标测定方法

1.5.1行为指标［7，8］：①自发活动测定，用开阔法测定正中格停留时间、穿格次数、竖起或修饰时间、竖起或修饰次数；②力竭游泳时间。

1.5.2血清中单胺类神经递质测定：通过高效液相色谱系统(HPLC)加电化学检测器(ECD)检测［8］。

1.5.3肾上腺Vitc含量测定：2，4-二硝基苯肼比色法［8］2结果2.1消疲怡神口服液对冷水应激大鼠自发活动的影响

结果见表1。组别n剂量/g/kg正中格停留时间/s穿格次数/次修饰次数/次正常对照组13—5.53±3.11**84±31*31±10*模型组14—11.50±9.5455±3623±11人参皂甙组150.074.27±2.57**55±2127±7小剂量组143.502.87±1.97**81±22*△31±8*大剂量组157.003.76±1.40**69±3323±8

注：与模型组比*P＜0.05**P＜0.01；与人参皂甙组比△P＜0.052.2消疲怡神口服液对冷水应激大鼠力竭游泳时间的影响

结果见表2。表2不同组别大鼠力竭游泳时间的变化组别n剂量/g/kg力竭游泳时间正常对照组13—252.05±54.32模型组14—207.15±85.02人参皂甙组150.07266.56±72.95*小剂量组143.50246.75±102.27大剂量组157.00259.87±55.14*

注：与模型组比*P＜0.052.3消疲怡神口服液对冷水应激大鼠肾上腺VitC含量的影响

结果见表3。表3不同组别大鼠肾上腺VitC含量的变化组别n剂量/g/kgVitC正常对照组13—4390±350*模型组12—3940±510人参皂甙组130.074420±360*小剂量组133.504420±840大剂量组147.004720±1180*

注：与模型组比*P＜0.052.4消疲怡神口服液对冷水应激大鼠血清单胺类递质及其代谢产物含量的影响

模型组大鼠血清E、DA、HVA、5-HT及5-HIAA含量比正常组升高；其中DA含量升高尤为显著(P＜0.05)；消疲怡神口服液可以降低DA、HVA、5-HT含量，并使5-HIAA含量升高，而对E含量无明显影响；人参皂甙组血清5-HIAA含量与模型组相比升高，但其余各项指标无明显变化(见表4)。表4不同组别大鼠血清E、DA、HVA、5-HT及5-HIAA含量的变化组别n剂量/g/kgEDAHVA5-HT5-HIAA正常对照组10—195±702004±1482*386±181361±240223±91模型组9—287±1084499±2405445±139472±343270±174人参皂甙组130.07284±1694114±2110418±191403±206485±148*△小剂量组113.50256±1412115±1097*●312±101*320±217382±197△大剂量组137.00331±1102922±1566*●362±96294±212369±147△

注：与模型组比*P＜0.05；与人参皂甙组比●P＜0.05；与正常组比△P＜0.053讨论中医学认为慢性疲劳是一种涉及多脏腑、多系统功能失调的疾病，与气机失调关系密切，其发病多与情志不遂、劳逸、外邪有关［9］。而西医学认为应激是导致或诱发慢性疲劳的重要因素。其中又以长期的慢性应激较急性应激更为多见。实验和临床研究均表明，慢性应激能导致机体行为改变、多种功能失调，甚至会引起组织结构的改变［10，11］。在各种慢性应激中，不可预期的应激比可预期的应激更易对机体产生不良影响［12，13］。基于以上认识并参考有关文献［14］，我们选用强制冷水游泳作为应激源，在每天的不同时间造模，并改变每天造模持续时间，减少机体对应激的耐受，力制造一个包括温度刺激(寒冷)、体力消耗(游泳)以及精神刺激(强制冷水游泳所致情绪刺激)在内的由多种应激因素所致的应激动物模型。它既模拟了中医有关疲劳的发病过程，也符合西医所认为的由慢性应激导致疲劳的理论。实验结果证明，模型动物体力下降(力竭游泳时间缩短)，出现抑郁倾向(自发活动减少)、神经内分泌功能紊乱，这些与疲劳病人的症状表现和实验室检查相似。由此可见，该模型是一种值得进一步提高和完善的可用以研究慢性疲劳的动物模型。同时也说明在应激导致慢性疲劳的过程与机体神经—内分泌—免疫系统功能的紊乱关系密切。

机体在各种应激状态下，多出现以交感神经—肾上腺髓质与下丘脑—垂体—肾上腺皮质反应为主的变化，使血清儿茶酚胺和肾上腺糖皮质激素含量上升，这常常被视为应激的标志。结果显示，强制冷水游泳使大鼠血清中单胺类递质含量普遍出现升高趋势，其中多巴胺含量与正常对照组相比有明显统计学差异。消疲怡神口服液能降低5-HT、DA及其代谢产物HVA含量，并使5-HT代谢产物5-HIAA含量升高，提示其抗应激作用可能与抑制外周DA的合成与代谢，促进5-HT分解有关。

肾上腺Vitc含量是反映肾上腺皮质功能的经典指标。结果表明，强制冷水游泳可明显降低大鼠肾上腺VitC含量，表明此时肾上腺功能活跃，皮质酮合成增加。消疲怡神口服液和人参皂甙可以有效逆转这一变化，提示两药可以抑制应激情况下肾上腺皮质功能的过度活跃，减少肾上腺皮质激素的合成，减轻应激所致的不良影响。

消疲怡神口服液和人参皂甙都能提高正常小鼠和应激大鼠神经系统兴奋性，增加其自发活动，延长其游泳时间，增强其体力，并能部分或全部逆转强制冷水游泳应激所致血清单胺类递质及肾上腺VitC含量的变化。三组之间在提高体力方面无明显统计学差异，而在提高神经系统兴奋性、增加动物自发活动方面，小剂量消疲怡神口服液作用优于人参皂甙。考虑这与人参皂甙单纯补气，而消疲怡神口服液除补气之外，还具有理气调肝的作用有关。我们认为，在机体受到不良刺激产生疾病的过程中，除了虚的一方面外，气机紊乱也是一个重要因素。我们通过临床观察发现，慢性疲劳的病位多与中医肝脾有关，尤与肝关系密切。肝主疏泄，调畅气机，喜调达而恶抑郁，藏血，主情志，为“罢极之本”，通过肝的疏泄作用使全身气机调畅，各脏腑功能活动正常。不良刺激可干扰机体气血运行，影响脏腑功能，使肝疏泄失常，而产生疾病。所以在治疗上，除补益外，加以理气调肝之品，则可以通过肝的疏泄，使全身“气血调和”，更有助于减少机体的不良影响，减轻或消除疾病。本实验的结果为进一步研究中医肝脾与应激、慢性疲劳的关系提供了一定的实验依据。作者简介：王琳，女，26岁，医学硕士，助教

*国家自然科学基金资助项目(NO.39500184)

国家中医药管理局资助项目(NO.95B109)

作者单位：北京中医药大学北京100029参考文献1BarkerE,FujimuraSF,FadenMB,etal.Immunologicabnormalitiesassociatedwithchronicfatiguesyndrome.Clin.Infect.Dis.1994,18(1):136～141

2TirelliU,Marottag,ImprotaS,etal.Immunologicalabnormalitiesinpatientswithchronicfatiguesyndrome.Scand.J.Immunol，1994,40(6):601～608

3MatsunoT,HikitaK,MatsuoT.Chronicfatiguesyndromesandpsychiatricdiseases.Nippon.Rinsho，1994,52(5):1339～1344

4KruppLB,PollinaD.Neuroimmuneandneuropsychiatricaspectsofchronicfatiguesyndrome,Adv.Neuroimmunol，1996,6(2):155～167

5CleareAJ,WesselySC.Chronicfatiguesyndrome:astressdisorder?

Br.J.Hosp.Med，1996,55(9):571～574

6王子健，杨光华，钱锦康，等.人参地上部分总皂甙适应原性作用的初步研究.药学通报，1982，17(8)：5～9

7徐叔云，卞如濂，陈修主编.药理实验方法学.北京：人民卫生出版社，1994.643，662

8陈奇.中药药理研究方法学.北京：人民卫生出版社，1993.741，789

9李峰，杨维益，梁嵘，等.从中医学看肝脏调节应激反应的作用.北京中医药大学学报，1998，21(1)：20～22

10AragonaM,AragonaF.Chronicstressandhistologicaleffectsonthehumancentralnervoussystemandotherorgans.Funct.Neurol.1994,9(3):121～131

11AnimanH,ZacharkoRM.Depressionasaconsequenceofinadequateneurochemicaladaptationinresponsetostressors.Br.J.Psychiatry.1992,15(Suppl):36～43

12肖健，G米布芬尼.应激的可预期性和行为控制对大鼠免疫功能的影响.北京大学学报(自然科学版)，1996，32(6)：760～766

13罗基花，曲娴，孙红霞，等.应激对大鼠行为及血压的影响.吉林医学院学报(自然科学版)，1996，16(3)：3～4

14孙建宁，徐秋萍，唐民科，等.益脑冲剂对应激状态下小鼠和大鼠神经内分泌系统的影响.北京中医药大学学报，1996，19(增刊)：85～87

消疲怡神口服液抗应激的实验研究*

——对强制冷水游泳应激大鼠行为及神经内分泌的影响

摘要：通过强制冷水游泳应激模拟慢性疲劳的发病过程。结果表明，强制冷水游泳应激使大鼠自发活动减少，出现抑郁倾向，力竭游泳时间缩短，体力下降，血清中肾上腺素(E)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)含量升高，肾上腺抗坏血酸含量降低，这些与慢性疲劳患者症状表现和实验室检查结果相似。以补气理气、调理肝脾为组方原则的中药复方“消疲怡神口服液”可以调节上述变化，表明其具有抗应激、抗疲劳作用，同时该结果还为研究中医气机失调、肝脾失和与应激、慢性疲劳的关系提供了理论依据。

关键词：消疲怡神口服液；慢性疲劳；行为；神经内分泌；大鼠EffectsofXiaoPiYiShenOralFluidOnRatBehaviorand

NeuroEndocrineSystemUnderForcedColdWaterSwimmingConditionsWangLin,WangTianfang,ZhangCuizhen,etal.

(BeijingUniversityofTraditionalChineseMedicine,Beijing100029)ABSTRACT:Toassesswhethertherepeatedforcecoldwaterswimming(RFCS)conditionsinfluencestheoccurrenceofchronicfatigueandthefunctionalmechanismoftheoralfluidofXiaoPiYiShen(XPYS),changesofbehaviorandneuro-endocrinesysteminratswereexamined.ResultsshowthatRFCSinhibitspontaneousactivitiesinopenfieldtests,shortenexhaustedspontaneuousactivitiesinopenfieldtests,shortenexhaustedswimmingtimeinnormaltemperaturewater,increaseepinephrine(E),dopamine(DA)and5-hydroxytryptamine(5-HT)levelsinserumanddecreaseascorbicacidlevelsinadrenalgland.Thoseindicatethatthisanimalmodelishelpfulforfurtherresearchofchronicfatigue.XPYScouldreversethechangescausedbyRFCS.ThatsuggestsXPYShasantistressandantifatiguefunction.ItalsobenefitsthestudyofrelationshipbetweenthedisorderofQi,liver,spleen(TCM)andthestressandthechronicfatigue.

KEYWORDS:XiaoPiYiShen(XPYS)Oralfluid；Repeatedforcedcoldwaterswimming(RFCS);Behavior;Neuro-Endocrinesystem;LiverandSpleen;Rat1988年，美国疾病控制中心将持续性或间断发作性疲劳和衰弱持续至少半年以上为主要特征的症候群正式命名为慢性疲劳综合征(简称CFS)。大量临床研究表明，该病的产生与精神刺激、不良习惯、过度劳累等多种应激因素有关，患者除疲劳的表现外，多伴有不同程度的精神抑郁等精神神经症状及免疫功能紊乱［1～5］。我们以强制冷水游泳模拟慢性疲劳的发病过程，从应激角度，观察应激导致动物疲劳时，其大体行为及神经内分泌系统的变化和以补气理气、调理肝脾为组方原则的中药复方“消疲怡神口服液”对该变化的影响，初步探讨慢性疲劳的发病机理、消疲怡神口服液抗应激抗疲劳的作用机制及其与中医肝脾的关系。1材料与方法1.1实验动物及分组

二级Wistar雄性大鼠，体重(170±10)g，由流行病研究所实验动物中心提供。按体重随机分为5组：模型组(n=15)，在造模同时予蒸馏水灌胃，2mL/d；人参皂甙组(n=15)，造模同时予以人参皂甙灌胃，70mg/(kg．d)［6］；小剂量消疲怡神口服液组(简称小剂量组，n=15)和大剂量消疲怡神口服液组(简称大剂量组，n=15)，在造模同时，以消疲怡神口服液灌胃，剂量分别为3.5、7.0g/(kg．d)；正常对照组(n=15)，不造模，仅予蒸馏水灌胃。1.2造模方法

Wistar大鼠购进后，置于室温(20±2)℃清洁级动物室中，5只／笼，自由进食饮水，适应1～2d后，开始造模。每日分别在不同时间令其在冷水(10±1)℃中游泳，每次造模持续时间为6～9.5min，共造模9d。1.3药物与主要试剂

消疲怡神口服液由枳壳、黄芪、人参、柴胡等组成。委托北京市永定制药厂加工，批号：960928，规格：10mL/支(1mL相当于1g生药)。

人参皂甙片，由中美合资吉林省亚威制药生产，吉卫药准字，批号：94032021，规格：0.1g/片，含人参总皂甙含量25mg/片。

肾上腺素(E)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)、高香草酸(HVA)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)、3，4-双羟苯乙酸(DOPAC)、二羟苄胺(DHBA)等均为Sigma公司产品；抗坏血酸(VitC)为国产；柠檬酸、乙酸钠、乙二胺四乙酸二钠(NA2EDTA)、高氯酸(HCLO4)、活性炭、2,4-二硝基苯肼、三氯醋酸、硫脲、盐酸、乙醇等均为国产分析纯。1.4主要仪器

小鼠自发活动测试仪(日本)、开阔箱(据有关文献制作［7］)、水迷宫(中国医学科学院药物研究所，规格依有关文献［7］)。

色谱柱：4mm×150mm，填料为Nava-PaK-C185μm，中国科学院大连色谱中心填充。流动相：50mmol/L柠檬酸-乙酸钠，pH3.5，内含：1.0mmol/LB8离子对试剂，4%甲醇，1.8mmol/L二正丁胺，0.3mmol/L乙二胺四乙酸二钠。检测电压+0.75V。流速1mL/min。Water510高效液相色谱系统(美国)、Water464电化学检测器(美国)。1.5指标测定方法

1.5.1行为指标［7，8］：①自发活动测定，用开阔法测定正中格停留时间、穿格次数、竖起或修饰时间、竖起或修饰次数；②力竭游泳时间。

1.5.2血清中单胺类神经递质测定：通过高效液相色谱系统(HPLC)加电化学检测器(ECD)检测［8］。

1.5.3肾上腺Vitc含量测定：2，4-二硝基苯肼比色法［8］2结果2.1消疲怡神口服液对冷水应激大鼠自发活动的影响

结果见表1。组别n剂量/g/kg正中格停留时间/s穿格次数/次修饰次数/次正常对照组13—5.53±3.11**84±31*31±10*模型组14—11.50±9.5455±3623±11人参皂甙组150.074.27±2.57**55±2127±7小剂量组143.502.87±1.97**81±22*△31±8*大剂量组157.003.76±1.40**69±3323±8

注：与模型组比*P＜0.05**P＜0.01；与人参皂甙组比△P＜0.052.2消疲怡神口服液对冷水应激大鼠力竭游泳时间的影响

结果见表2。表2不同组别大鼠力竭游泳时间的变化组别n剂量/g/kg力竭游泳时间正常对照组13—252.05±54.32模型组14—207.15±85.02人参皂甙组150.07266.56±72.95*小剂量组143.50246.75±102.27大剂量组157.00259.87±55.14*

注：与模型组比*P＜0.052.3消疲怡神口服液对冷水应激大鼠肾上腺VitC含量的影响

结果见表3。表3不同组别大鼠肾上腺VitC含量的变化组别n剂量/g/kgVitC正常对照组13—4390±350*模型组12—3940±510人参皂甙组130.074420±360*小剂量组133.504420±840大剂量组147.004720±1180*

注：与模型组比*P＜0.052.4消疲怡神口服液对冷水应激大鼠血清单胺类递质及其代谢产物含量的影响

模型组大鼠血清E、DA、HVA、5-HT及5-HIAA含量比正常组升高；其中DA含量升高尤为显著(P＜0.05)；消疲怡神口服液可以降低DA、HVA、5-HT含量，并使5-HIAA含量升高，而对E含量无明显影响；人参皂甙组血清5-HIAA含量与模型组相比升高，但其余各项指标无明显变化(见表4)。表4不同组别大鼠血清E、DA、HVA、5-HT及5-HIAA含量的变化组别n剂量/g/kgEDAHVA5-HT5-HIAA正常对照组10—195±702004±1482*386±181361±240223±91模型组9—287±1084499±2405445±139472±343270±174人参皂甙组130.07284±1694114±2110418±191403±206485±148*△小剂量组113.50256±1412115±1097*●312±101*320±217382±197△大剂量组137.00331±1102922±1566*●362±96294±212369±147△

注：与模型组比*P＜0.05；与人参皂甙组比●P＜0.05；与正常组比△P＜0.053讨论中医学认为慢性疲劳是一种涉及多脏腑、多系统功能失调的疾病，与气机失调关系密切，其发病多与情志不遂、劳逸、外邪有关［9］。而西医学认为应激是导致或诱发慢性疲劳的重要因素。其中又以长期的慢性应激较急性应激更为多见。实验和临床研究均表明，慢性应激能导致机体行为改变、多种功能失调，甚至会引起组织结构的改变［10，11］。在各种慢性应激中，不可预期的应激比可预期的应激更易对机体产生不良影响［12，13］。基于以上认识并参考有关文献［14］，我们选用强制冷水游泳作为应激源，在每天的不同时间造模，并改变每天造模持续时间，减少机体对应激的耐受，力制造一个包括温度刺激(寒冷)、体力消耗(游泳)以及精神刺激(强制冷水游泳所致情绪刺激)在内的由多种应激因素所致的应激动物模型。它既模拟了中医有关疲劳的发病过程，也符合西医所认为的由慢性应激导致疲劳的理论。实验结果证明，模型动物体力下降(力竭游泳时间缩短)，出现抑郁倾向(自发活动减少)、神经内分泌功能紊乱，这些与疲劳病人的症状表现和实验室检查相似。由此可见，该模型是一种值得进一步提高和完善的可用以研究慢性疲劳的动物模型。同时也说明在应激导致慢性疲劳的过程与机体神经—内分泌—免疫系统功能的紊乱关系密切。

机体在各种应激状态下，多出现以交感神经—肾上腺髓质与下丘脑—垂体—肾上腺皮质反应为主的变化，使血清儿茶酚胺和肾上腺糖皮质激素含量上升，这常常被视为应激的标志。结果显示，强制冷水游泳使大鼠血清中单胺类递质含量普遍出现升高趋势，其中多巴胺含量与正常对照组相比有明显统计学差异。消疲怡神口服液能降低5-HT、DA及其代谢产物HVA含量，并使5-HT代谢产物5-HIAA含量升高，提示其抗应激作用可能与抑制外周DA的合成与代谢，促进5-HT分解有关。

肾上腺Vitc含量是反映肾上腺皮质功能的经典指标。结果表明，强制冷水游泳可明显降低大鼠肾上腺VitC含量，表明此时肾上腺功能活跃，皮质酮合成增加。消疲怡神口服液和人参皂甙可以有效逆转这一变化，提示两药可以抑制应激情况下肾上腺皮质功能的过度活跃，减少肾上腺皮质激素的合成，减轻应激所致的不良影响。

消疲怡神口服液和人参皂甙都能提高正常小鼠和应激大鼠神经系统兴奋性，增加其自发活动，延长其游泳时间，增强其体力，并能部分或全部逆转强制冷水游泳应激所致血清单胺类递质及肾上腺VitC含量的变化。三组之间在提高体力方面无明显统计学差异，而在提高神经系统兴奋性、增加动物自发活动方面，小剂量消疲怡神口服液作用优于人参皂甙。考虑这与人参皂甙单纯补气，而消疲怡神口服液除补气之外，还具有理气调肝的作用有关。我们认为，在机体受到不良刺激产生疾病的过程中，除了虚的一方面外，气机紊乱也是一个重要因素。我们通过临床观察发现，慢性疲劳的病位多与中医肝脾有关，尤与肝关系密切。肝主疏泄，调畅气机，喜调达而恶抑郁，藏血，主情志，为“罢极之本”，通过肝的疏泄作用使全身气机调畅，各脏腑功能活动正常。不良刺激可干扰机体气血运行，影响脏腑功能，使肝疏泄失常，而产生疾病。所以在治疗上，除补益外，加以理气调肝之品，则可以通过肝的疏泄，使全身“气血调和”，更有助于减少机体的不良影响，减轻或消除疾病。本实验的结果为进一步研究中医肝脾与应激、慢性疲劳的关系提供了一定的实验依据。作者简介：王琳，女，26岁，医学硕士，助教

*国家自然科学基金资助项目(NO.39500184)

国家中医药管理局资助项目(NO.95B109)

作者单位：北京中医药大学北京100029参考文献1BarkerE,FujimuraSF,FadenMB,etal.Immunologicabnormalitiesassociatedwithchronicfatiguesyndrome.Clin.Infect.Dis.1994,18(1):136～141

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