中国胃癌HER检测指南解读郑杰

中国胃癌HER2检测(jiǎncè)指南解读

（2011版）第一页，共四十页。概述(ɡàishù)本指南推荐IHC与FISH和（或）DSISH相结合的检测策略胃癌有必要进行准确的HER2检测

HER2状态检测首先选用免疫组织化学法（IHC）

IHC3+的病例(bìnglì)视为HER2阳性

IHC2+的病例建议进一步行原位杂交（ISH：FISH和或DSISH）检测，IHC2+/ISH+的病例视为HER2阳性

IHC1+和IHC0病例，IHC2+/ISH-病例视为HER2阴性

胃癌HER2检测应在有能力的实验室进行

检测质量取决于标本的采集、处理过程、IHC/ISH检测方法和评判标准的执行第二页，共四十页。问题(wèntí)一1.请问您所在(suǒzài)的医院胃癌HER2检测是否属于常规检测项目？是否不清楚第三页，共四十页。问题(wèntí)二请问您所在的医院，由谁决定是否做胃癌HER2免疫组化检测？病理科外科肿瘤(zhǒngliú)内科消化内镜室第四页，共四十页。问题(wèntí)三请您对多学科合作对胃癌HER2检测的重要性打分（0-5重要性逐渐递增(dìzēng)），请按投票器选择012345第五页，共四十页。胃癌(wèiái)HER2检测第六页，共四十页。切片(qiēpiàn)脱水(tuōshuǐ)包埋固定(gùdìng)HER2检测的相关流程切片检测判读标本收取第七页，共四十页。问题(wèntí)四贵单位胃癌手术(shǒushù)标本送到病理科处理的时间？A30分钟内B1小时内C2小时内D>2小时E不清楚

第八页，共四十页。问题(wèntí)五贵单位手术标本固定时间？不固定直接(zhíjiē)取材固定时间在8小时内固定时间在12小时左右（过夜）固定时间12-24小时不清楚第九页，共四十页。标本(biāoběn)类型原发病灶的手术切除标本原发病灶的胃镜活检标本建议取6-8块，以获得足够的样本组织，多点活检对准确的检测有必要切除标本离体后20–30分钟内进行标记、切开、固定(gùdìng)等初步处理后，及时送病理科活检标本的大小≥2x2x2mm3原发灶活检组织、手术切除组织皆有的病例，建议使用手术切除组织进行检测标本(biāoběn)采集第十页，共四十页。问题(wèntíí)六贵单位送检标标本采用何种种固定液？不用固定液，，直接(zhíjiē)送病理科10%福尔马林固定定液（蒸馏水水配）10%福尔马林固定定液（中性缓缓冲液配）10%甲醛固定液不清楚第十一页，共共四十页。标本(biāoběn)固定采用新鲜配制制10%中性缓冲福尔尔马林作为固定液固定液的量应应为组织的10倍手术切除标本本的固定时间间为8–48h(至少1h/mm组织)活检标本的固固定时间不超过24h(至少1h/mm组织)不宜使用(shǐyòòng)其它固定液，，非10%中性缓冲福尔尔马林制剂可可能会妨碍IHC和ISH检测的可靠性性不宜用微波快快速固定组织织规范的标本固固定是HER2检测质量的保保障；保存良良好的组织形形态，防止(fángzhǐ)细胞内蛋白和和核酸的丢失失标本准备第十二页，共共四十页。固定1小时固定52小时固定4小时固定2周固定时间影响响(yǐngxiǎng)HER2染色结果固定22小时图片(túpiààn)由ofAMorey,StVincent’sHospital,NSW,Australia提供第十三页，共共四十页。固定较差示例例(shìlìì)：乳腺癌HER2IHC检测固定(gùdìng)较差会导致染染色结果的异异质性胞质染色可能能是由固定较较差导致图片(túpiààn)由WHanna提供第十四页，共共四十页。固定较差示例例(shìlìì)：胃癌HER2IHC检测固定(gùdìng)不完全会导致致假阳性检查查结果胞质染色可能能由于使用了了不恰当的固固定方式图片(túpiààn)由TargosMolecularPathology.提供第十五页，共共四十页。固定(gùdìng)较差示例：HER2ISH检测图片(túpiààn)由Abbott/Vysis.提供固定(gùdìng)不完全-SISH，“空核”固定不完全导导致探针信号号较弱或缺失失过度染色会导导致持续性自自发荧光探探针信号可可能较弱或缺缺失第十六页，共共四十页。HER2检测(jiǎncè)HER2过表达(biǎodá)的检测HER2扩增的检测(jiǎncè)免疫组织化学学染色方法（（IHC）自动化原位杂交方法法（ISH）FISHDualSISH第十七页，共共四十页。实验室总体(zǒngtǐ)要求应当在有条件件的实验室进进行，拥有试试验所需的仪仪器和设备及及空间条件实验室掌握包包括标本的制制备、抗体的的选择、抗原原修复方法及及其它相关技技术；探针的的选择、检测测预处理方法法及其它相关关技术实验室经过严严格的内部和和外部(wàibùù)质量控制程序序验证，建立立完善的实验室标准操操作流程（SOP）实验室技术员员具备相关资资质及经过合合格培训第十八页，共共四十页。HER2检测(jiǎncè)-IHCIHC方法试验方法根据据实验室条件件(tiáojiàn)可以选择手工工染色、半自动染染色和全自动动免疫组化染染色建议使用全自自动染色方法法建议使用我国相关部门门（SFDA）批准的试剂剂盒自行组配和分分装的抗体必必须经过严格格的内部和外外部质量控制(kòngzhì)程序验证，并并与权威机构构批准的检测测试剂盒进行比对，以保保证检测结果果的可靠性IHC抗体第十九页，共共四十页。结果判读(pàndú)和分析普通(pǔtōng)光光学显微镜荧光(yíngguāng)显微镜病理医生需要要经过培训IHC评分标准和乳乳腺癌有所不不同样本：活检组组织和切除组组织有所不同同观察：高异质质性需要全面面观察所有肿肿瘤组织沟通：结果不不确定时需要要与肿瘤科医医生沟通第二十页，共共四十页。IHC判读标准（参照ToGA经验(jīngyàn)，所有图片来来自SCC）0无反应或肿瘤瘤(zhǒngliú)细胞膜染色<10%1+≥10%肿瘤细胞微弱弱(wēiruò)或隐约膜染色色，细胞膜仅部分分区域着色2+≥10%肿瘤细胞弱到到中度的完全全或细胞基底部和和两侧边膜染染色3+≥10%肿瘤细胞完全全性或基底部部和两侧边膜强染染色（对3+的病例同时表明百分率，，注明是否有有异质性）IHC结果判读时应应注意：细胞胞质着色应忽忽略不计，正正常胃黏膜上上皮细胞不应应着色HER2检测-IHC第二十一页，，共四十页。。原位杂交检测测(jiǎncè)方法（ISH）荧光原位杂交交（FISH）双色银染原位位杂交（DualSISH，DSISH）探针建议使用我国国相关部门（（SFDA）批准的试剂剂盒第二十二页，，共四十页。。FISH，HER2红色(hóngsè)信号增多，局局部呈簇状，，CEP17信号1-2个，比值7.2，有扩增（100×）FISH，HER2和CEP17信号(xìnhàào)各1-2个，比值1.65，无扩增（100×）FISH：严格按照(ànzhàào)试剂盒标准程程序执行HER2检测-FISH图片来自SCC第二十三页，，共四十页。。DSISHHER2黑色信号扩增增，呈簇状；；CEP17红色(hóngsè)信号1-2个；比值15，有扩增(100×)DSISHHER2和CEP17信号(xìnhàào)各1-2个，比值<0.8，无扩增(100×)DSISH：实验室应先先进行严格的的对比(duìbǐǐ)试验和程序优优化严格按照所用用全自动染色色仪器的优化化程序和SOP执行HER2检测-DSISH图片来自SCC第二十四页，，共四十页。。请问贵院是否否有统一的HER2检测病理(bìnglǐ)报告格式？是否问题(wèntíí)七第二十五页，，共四十页。。检测(jiǎncè)报告内容胃癌HER2IHC/ISH检测报告临床信息：姓名性别年龄门诊／住院号号送检医师联系方式检测日期年月日标本信息：病理号/蜡块号标本类型：手手术切除□□活活检检□肿瘤部位：胃胃食道交界界处□胃底底□胃体□□胃窦□幽幽门管□转转移灶□标本固定液种种类（10％中性缓冲福福尔马林(fúěrmǎlín)）是□ 否□□标本离体至固固定时间(如有记录)分钟标本固定的时时间(如有记录)分钟组织学类型/分级Laurén分型临床分期TNM第二十十六页页，共共四十十页。。HER2IHC检测(jiǎncè)报告检测信信息：：抗体信信息(克隆号号／生生产商商)检测方方法手手工工/半自动动□□全全自自动□□对照设设置情情况3+□□0□□样本量量是否否足够够用于于评估估是是□□否否□□具有膜膜着色色的肿肿瘤细细胞的的百分分比%着色的的异质质性有有□无无□肿瘤细细胞膜膜染色色模式式完完整整□基基底和和侧膜膜（U-shaped)□两者皆皆有□□判读结结果：：0□□l+□□2+□□3+□□无法判判读□□结论：：阳性(yáángxììng)□；不不确定定□；；阴性性□；；无法法判读读□检测人人员：：技术术员病理医医师第二十十七页页，共共四十十页。。HER2ISH检测(jiǎncè)报告检测信信息：：探针信信息(生产商商/商品号号)检测方方法对照设设置情情况阳阳性对对照□□阴阴性对对照□□样本量量是否否足够够用于于评估估是是□□否否□□IHC检测结结果0□□l+□□2+□□3+□□无法判判读□□判读结结果：：用于评评估的的肿瘤瘤细胞胞数量量HER2信号总总数／／CEPl7信号总总数HER2信号数数平均均值／／细胞胞核CEPl7信号数数平均均值／／细胞胞核17号染色色体是是否为为多体体是是□□否否□□结论(jiélùn)：阳阳性性(扩增)□□阴性(无扩增增)□□无法判判读□□检测人人员：：技技术术员病病理医医生第二十十八页页，共共四十十页。。实验室室质量量(zhìliààng)控制（1）HER2蛋白和和基因因扩增增的检检测均均应在在内、、外部部质量量控制制良好好(liánghǎo)的病理理实验验室进进行检测必必须严严格按按照指指南要要求执执行，，以保保证结结果可可靠不具备备HER2检测条条件的的单位位应按按照指指南要要求，，妥善善处理理和准准备好好标本本，提提供给给有质质量保保证的的病理理实验验室进进行检检测第二十十九页页，共共四十十页。。实验室室质量量(zhìliààng)控制（2）实验室室内、、外部部质量量控制制和SOP的主要要要求求如下下准备开开展GCHER2检测的的实验验室应应选择择1～2家已较较好开开展该该项检检测的的实验验进行行25～100例标本本的对对比验验证(yàànzhèèng)或通过过参加加有关关外部部质量量控制制活动动来实实现，，外部部质控控阳性性和阴阴性结结果的的一致致性应应达到到90％以上上，每每年应应进行行1～2次从事GCHER2检测的的实验验室技技术人人员和和病理理医师师应进进行必必要的的培训训和资资格考考核第三十十页，，共四四十页页。实验室室质量量(zhìliààng)控制（3）实验室室应建建立完完善的的SOP，并做做好每每次检检测情情况的的记录录(jììlùù)和存档档工作作任何改改变操操作程程序和和试剂剂的行行为均均应重重新进进行严严格的的验证证内部质质控应应包括括同一一组织织不同同批次次染色色结果果的重重复性性分析析，每每次染染色阳阳性、、阴性性对照照的设设置，，如有有可能能还应应没置置包括括低表表达／／低扩扩增对对照检测相相关的的仪器器和设设备需需定期期维护护、校校验第三十十一页页，共共四十十页。。类似(lèèisìì)乳腺癌癌亮视野野检测测方法法有优优势Her2检测(jiǎncè)流程样本(yààngběěn)收集镜下观观察异质性性高需要观观察整张切片检测所所需时时间胃癌进进展快快，宜宜及时时获得得结果果多学科科参与结果判判读与乳腺腺癌有有所不不同胃癌HER2检测：：基基本过过程和和特殊殊性数量、、质量量合适适的含含有肿肿瘤组组织的的活检标本具有代代表性性的手术切切除标本第三十十二页页，共共四十十页。。多学科科协作作共同同努力力医医生和和技术术员知识识更更新新和和观观念念(guāānniààn)改变变患患者者和和医医生生第三三十十三三页页，，共共四四十十页页。。多学学科科协协作作检检测测(jiǎǎncèè)HER2：临床床医医生生之之角角色色采样样手手术术和和胃胃镜镜活活检检(huóójiǎǎn)（6-8块组组织织））固定定10%中性性缓缓冲冲福福尔尔马马林林样本本送送检检（（离离体体时时间间））30分钟钟结果果解解读读HER2+IHC01+2+3+HER2阳性性第三三十十四四页页，，共共四四十十页页。。多学学科科协协作作检检测测HER2：病病理理(bììnglǐǐ)医生生之之角角色色WolffAC,etal.JClinOncol2007;25:118––145.检测测结结果果分分析析检查查备备检检标标本本是是否否可可用用正确确设设立立内内部部对对照照组组依照照国国际际评评分分系系统统进进行行评评分分检测测结结果果报报告告使用用标标准准化化HER2检测测结结果果报报告告表表报告告内内容容应应包包括括标标本本取取样样，，固固定定，，检检测测方方法法及及评评分分系系统统多学学科科(xuéékēē)检测测治治疗疗小小组组(MDT)会议议第三三十十五五页页，，共共四四十十页页。。学科科(xuéékēē)协作作检检测测HER2：技技术术员员之之角角色色处理理:避免免影影响响检检测测结结果果之之因因素素--最佳佳固固定定时时间间及及固固定定方方法法--石蜡蜡包包埋埋--组织织切切片片的的合合理理时时间间(最好好于HER2检测测前前切切片片)--标本本脱脱蜡蜡方法法:使用用(shǐǐyòòng)标准准化化/经验验证证之之检检测测步步骤骤--IHC--ISHFISHDualSISHWolffAC,etal.JClinOncol2007;25:118––145.第三三十十六六页页，，共共四四十十页页。。患者者(huàànzhěě)病理理(bììnglǐǐ)医生生技术术人人员员肿瘤瘤科科/内科科医医生生病理理(bììnglǐǐ)医生生外科科/内窥窥镜镜医生生获取取肿肿瘤瘤组组织织并并按按照照规规范范进进行行固固定定后后转