乙醇脱氢酶(ADH)活性测定试剂盒说明书_第1页
乙醇脱氢酶(ADH)活性测定试剂盒说明书_第2页
乙醇脱氢酶(ADH)活性测定试剂盒说明书_第3页
全文预览已结束

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

PAGE32页MS1007 100/96样乙醇脱氢酶（ADH）活性测定试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。义：ADH是生物体内短链醇代谢的关键酶，催化乙醇与乙醛可逆转换，在很多生理过程中起着重要作用。哺乳动物主要在肝脏生成，肝脏损伤导致释放到血清中。血清活性高低反映了肝功能是否异常。：催化还原乙醛生成乙醇和NAD+NADH340nm处有吸收峰，而NAD+没有；测定340nm吸光度下降速率，来计算ADH活性。自备实验用品及仪器：//96移和。试剂组成和配制：试剂：体×1，温。试剂：体×1，4。用前试剂转到试剂中，4。试剂：剂×1支，－20。试剂四：体×1支，4。粗酶液提取：1（g）：(mL)为15~10（0.1g1mL试剂）进行冰浴匀浆。16000，4离心20mi，取上清置冰上待测。2、细菌、真菌：按照细胞数量（04个）：试剂体积（L）为0：1的例（建议万细胞加入）（300w373mi）；16000，4离心20mi，取上清置冰上待测。3、血清等体：直接测定。ADH操作：光光度计/酶预热30min，节波长到340nm，零。试剂在25浴中温30mi。/9620μL160μL和20μL试混匀后于340nm测定吸光值变化，别记录15s75s别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。测定管：在微量/96中依次加入20μL160μL试剂20μL试混匀后于340nm测定吸光值变化，别记录15s75s别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。注意：空白管只需测定次。计算公式：a.使用微量测定的计算公式如下251molNADH1ADH(mol/mi/mgprot)=[(AA)d×V反总×106](Cpr×V样)T=1.61×(AA)Cpr样本质量25组织1molNADH1HlgAAV06(WVVTAAW04lH1Hl04AAV06VVTAA液体体积lH1Hl)=[(AAV06VTAA)NADH6.22×13L/mol/c；d比色皿光径1；V22×04LrLWV2.02mL；V提取液体积1m；T反应时间1mi。b.96的公式如下251molNADH1ADH(mol/mi/mgprot)=[(AA)d×V反总×106](Cpr×V样)T=1.61×(AA)Cpr样本质量25组织1molNADH1HlgAAV06(WVVTAAW04lH1Hl04AAV06VVTAA液体体积lH1Hl)=[(AAV06VT=1.61×(△A测

人人文库> 全部分类> 行业资料 > 信息产业

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论