QA安捷伦GCMS操作规程

东莞龙昌数码科技有限企业QA实验室受控文件DongguangLungcheongtechnologyLtd.QALab禁止复印文件种类:引导文件名称:GC-MS操作引导文件编号:WI-LABC-020制定部门:化学测试组奏效日期:2010-09-18页号:1OF34编制:周星星审查:同意:文件版本:4.0文件改正历史更他日期版本号改正原由2010-09-164.0首版刊行1.0目的规范GC-MS操作过程，使受权操作人员能正确操作GC-MS，保证测试结果正确性。2.0范围合用于实验室使用GC-MS所测试项目操作过程。3.0权责实验室GC-MS受权操作人员依照引导正确操作GC-MS并出具测试数据。4.0名词解说无5.0流程5.1仪器操作条件操作的最正确环境温度范围为15至35℃、环境湿度范围为40%至80%，工作电压220±10V，在此工作条件下操作可保证仪器性能达到最正确和延伸使用寿命，同时仪器需要足够的空间进行正常的热对流和通风。载气氦气的使用条件要保证供气管道气密性，若有漏气需用检漏液查找漏气部位，拧紧漏气部位零件或改换零件，用检漏液再次确认能否漏气，正常后抽真空一段时间后再进行参照5.4进行空气和水检查。氦气的纯度需达99.999%以上，不含碳氢化合物，使用13瓶氦气后需改换页号:2OF34编号：WI-LABC-020引导文件文件名：GC-MS操作引导文件版本:4.0气体净化组合捕集阱。5.2开机翻开载气钢瓶（He）,设置分压阀压力至0.5Mpa（0.4～0.6Mpa），拧紧放空阀。开启计算机，翻开气相色谱和质谱电源，,前级泵开始抽真空，用手向右边推真空腔的侧版直至侧面板被紧固地吸牢，等听到滴一声，质谱面板显示“pumpdown”,分子涡轮泵启动抽真空，这时可松开手，等候仪器自检完成。5.3进入化学工作站在操作系统桌面双击<MSD5975C>图标（见图1）进入化学工作站仪器控制系统。图1此时会提示设置离子源和四极杆温度，点击<APPLY>按钮，将离子源和四极杆温度分别设置为230℃和150℃（调和谐收集数据介绍温度）。注意不重点击<OK>按钮，不然离子源和四极杆温度将都会是仪器开机预设温度100℃。5.4空气与水检查点击仪器控制界面<View>菜单（见图2）中<TuneandVacuumControl>选项进入调谐与真空控制界面。页号:3OF34编号：WI-LABC-020引导文件文件名：GC-MS操作引导文件版本:4.0图2单击<Tune>菜单,选择<AirandWaterCheck>选项（见图3）,跳出一个对话框（见图4）。图3单击<NO>按钮（见图4），进行空气与水检查。只有当新安装调谐液时才点<Yes>按钮调整标准阀，点<Cancel>按钮不进行空气与水检查。图4打印检查报告（图5）并评估结果页号:4OF34编号：WI-LABC-020引导文件文件名：GC-MS操作引导文件版本:4.0图5当水18/69丰度<5%、氮气28/69丰度<5%、氧气32/69丰度<5%，系统状态正常。当氮气28/69丰度>5%、氧气32/69丰度>5%表示仪器漏气，检查气相色谱、质谱各个可能漏气的部位，参照仪器说明书用丙酮捡漏，注意不要用捡漏液捡漏，否则会破坏仪器。最常有是气相色谱联质谱柱螺母松动，用1/2规格扳手旋紧柱螺母。再次水与空气检查察系统能否恢复正常。当氮气28/69丰度>5%而氧气32/69丰度<5%表示气相色谱、质谱不漏气，漏气部位是气体净化组合捕集阱至载气钢瓶一段各个可能漏气零件。用捡漏液逐个排查并办理，直至正常。当水18/69丰度>5%、新换衬管或冲洗口时，将进样口温度设置为290℃后吹扫15分钟，再次空气与水检查，如仍不正常再吹扫15分钟，直至正常。当水18/69丰度>5%、长时间关机或许刚才冲洗离子源时，参照5.5烘烤质谱起码2个小时后，再次空气与水检查，如仍不正常,持续烘烤质谱至水18/69丰度<5%。注意先保证系统不漏气时才能烘烤质谱，不然会加快离子源消耗。5.5烘烤质谱点击仪器控制界面<View>菜单中<TuneandVacuumControl>选项（见图6）进入调谐与真空控制界面。页号:5OF34编号：WI-LABC-020引导文件文件名：GC-MS操作引导文件版本:4.0图6单击<Execute>菜单,选择<BakeoutMSD>选项（见图7）,进入烘烤质谱参数设置（见图

8），离子源和四极杆烘烤温度分别设置为

300℃和

200℃，烘烤质谱时间依据实质状况设定，烘烤完后离子源和四极杆温度分别降低至

230℃和

150℃（常用剖析条件）。图7页号:6OF34编号：WI-LABC-020引导文件文件名：GC-MS操作引导文件版本:4.0图8单击<Bake>按钮（见图8）开始烘烤质谱。烘烤质谱达成后单击<View>菜单中<InstrumentControl>返回仪器控制界面。5.6调谐自动调谐参照5.4水与空气检查确认系统正常后，在调谐与真空控制界面单击<Tune>菜单中<AUTOTUN>选项（见图9）,进行自动调谐调谐,调谐结果（见图10）自动打印。图9页号:7OF34编号：WI-LABC-020引导文件文件名：GC-MS操作引导文件版本:4.0图10评估调谐报告(见图10)并采纳相应举措电压EM电压超出2500V，需参照仪器自带光盘中视频冲洗离子源，如仍旧超出2500V，联系仪器供给商改换电子倍增管。峰形碎片离子m/z=69、m/z=219、m/z=502峰形能否对称、光滑，是则为正常。半峰宽页号:8OF34编号：WI-LABC-020引导文件文件名：GC-MS操作引导文件版本:4.0m/z=69、m/z=219、m/z=502半峰宽能否一致（相差<0.3U），且都在0.55±0.10U范围内。峰的个数Peaks峰的个数<150,如>150peaks需参照仪器自带光盘中视频冲洗离子源。丰度及相对丰度碎片离子碎片离子m/z=69基峰丰度>200000m/z=219丰度/m/z=69丰度>40%（即相对丰度>40%）m/z=502丰度/m/z=69丰度>2.4%（即相对丰度>2.4%）。同位素丰度比0.5%〈m/z=70丰度/m/z=69丰度〈1.6%3.2%〈m/z=219丰度/m/z=220丰度〈5.4%7.9%〈m/z=502丰度/m/z=503丰度〈12.3%增益自动调谐参照5.4水与空气检查确认系统正常后，在调谐与真空控制界面单击<Tune>菜单,选择<GainAutotune>选项(见图11),进行增益自动调谐,调谐结果自动打印。图11评估调谐报告(见图12)并采纳相应举措参照5.6.1.2,增益自动调谐报告在自动调谐报告基础上增添了增益因子为15时EM增益。当增益因子=15时不是在自动页号:9OF34编号：WI-LABC-020引导文件文件名：GC-MS操作引导文件版本:4.0调谐的基础上简单加上400V相对电压，而是对证谱参数进行优化，敏捷度更高，介绍使用增益自动调谐。图125.7数据收集方法成立单击仪器控制界面<Method>菜单<EditEntireMethod>选项（见图13），开始编写数据收集方法。页号:10OF34编号：WI-LABC-020引导文件文件名：GC-MS操作引导文件版本:4.0图13点击<OK>按钮（图14）进入下一步。图14勾选<SaveCopyofMethodwithData>,在<MethodComments>中输入方法的描绘，点击<OK>按钮（见图15）进入下一步。页号:11OF34编号：WI-LABC-020引导文件文件名：GC-MS操作引导文件版本:4.0图15选择<GCALS>自动进样器，勾选<UseMs>使用质谱，点击<OK>按钮（见图16）进入下一步图16页号:12OF34编号：WI-LABC-020引导文件文件名：GC-MS操作引导文件版本:4.0气相色谱参数设置注射器设置（见图17）图17进样口设置（见图18）图18页号:13OF34编号：WI-LABC-020引导文件文件名：GC-MS操作引导文件版本:4.0柱流量设置（见图19）图19传输线温度设置（见图20）图20柱温箱设置（见图21）均衡时间是柱温箱在运转前稳固在指定温度的时间。柱温箱初始温度、升温速率、柱温、保持时间依据标准输入。后运转是指在运转达成后将柱温箱温度保持一段时间，质谱检测器封闭，应用于延伸时间烘优秀谱柱中高沸点杂物。页号:14OF34编号：WI-LABC-020引导文件文件名：GC-MS操作引导文件版本:4.0图21质谱参数设置（见图22）溶剂延缓时间设置溶剂延缓指从剖析开始到翻开质谱的时间（单位为分钟）。在溶剂峰从色谱柱中流出并经过质谱前，质谱应该处于封闭状态。溶剂延缓时间依据标准或参照溶剂流出时间而定，可延伸灯丝寿命。电压模式设置5.7.6.2.1.绝对（Absolute）电压模式输入的EM电压值即为要使用的电压值,电压值范围0~3000V相对(Relative)电压模式在调谐文件中EM电压值基础上加上(+)或许减去(-)设定值而获得EM电压值。增益系数（GainFactor）电压模式页号:15OF34编号：WI-LABC-020引导文件文件名：GC-MS操作引导文件版本:4.0增益系数1.0表示检测器中的信号倍增（增益）值为100,000。较高的增益系数会提高信号敏捷度，但也会缩短EM的寿命。增益系数设置范围从0.25到25，代表信号增益值从25,000到2,500,000。增益设置依据标准工作溶液浓度而定，即要求测试标准工作溶液浓度最低点有很好敏捷度，又要保证测试标准工作溶液浓度最高点时质谱检测器不饱和。图22质谱数据收集模式全扫描(Scan)数据收集模式扫描质量数范围（见图23）页号:16OF34编号：WI-LABC-020引导文件文件名：GC-MS操作引导文件版本:4.0图阈值和采样频次（见图24）阈值只有丰度等于或大于此值的碎片离子才会被保存在每次扫描的质谱图中，阈值默认值为150。采样频次在此输入的值n用于计算每个质量数的丰度在进行至下一质量数前的记录次数（采样次数）。关于大部分剖析，独自使用

SIM

收集模式时适合的值为

2，而

SIM

和SCAN

同时收集时适合的值为

1。记录次数按

2^n

进行计算，若是设置为

3，则记录次数为

2^3=8

次，n

设定值范围为

0至

7。页号:17OF34编号：WI-LABC-020引导文件文件名：GC-MS操作引导文件版本:4.0图24选择离子扫描（SIM）数据收集模式（见图25）分辨力低(Low)指定了的峰宽；增添峰宽可在几乎不损失特点性的状况下提升敏捷度，高(High)可指定调谐文件中的峰宽，往常为0.6amu。当同组离子中有两个质量数相差小于3amu时，须选择高（High）分辨率。每秒扫描次数此参数很重要，依据每组离子个数和驻留时间和空中时间计算得出，计算方法为1000ms/（每个离子驻留时间之和+空中时间）。页号:18OF34编号：WI-LABC-020引导文件文件名：GC-MS操作引导文件版本:4.0图25分组及离子驻留时间每种化学物扫描离子由标正确立。分组前先要获得全扫描谱图，依据全扫描谱图状况进行分组，在保证化合物色谱峰完整分开的状况下尽量多分组，这样每组离子的驻留时间就能够设置更长。驻留时间设定依照是每种化合物色谱峰由10~20个点绘成（正确立量需知足条件），驻留时间（毫秒）=（化合物峰终点时间-化合物峰起点时间）/10~20（自定）/每组离子个数。（注：计算过程中忽视空中时间，此计算过程只应用于独自SIM收集模式，如用在SIM和SCNA同时收集模式须除以2）5.8序列摆放样品页号:19OF34编号：WI-LABC-020引导文件文件名：GC-MS操作引导文件版本:4.0将装有待测试样品溶液的样品瓶按必定次序摆放在16位样品盘上（见图26）。图26新建序列将已存在序列另存为新序列再进行编写，点击仪器控制界面<Sequence>菜单中<SaveSequenceAs>选项（见图27），另存为新序列。图27编写序列点击编写序列快捷按钮（见图28），对序列进行编写。页号:20OF34编号：WI-LABC-020引导文件文件名：GC-MS操作引导文件版本:4.0图28输入样品盘地点、样品名称、方法、数据文件名等信息，点击<OK>按钮（见图29）达成序列编写。图29运转序列点击运转序列快捷按钮（见图28）运转序列，GC-MS自动收集数据保存在预设的文件夹下。5.9数据剖析方法成立双击计算机桌面<MSD5975CDataAnalysis>图标（见图30）进入化学工作站数据办理系统。页号:21OF34编号：WI-LABC-020引导文件文件名：GC-MS操作引导文件版本:4.0图30单击色谱〈Chromatogram〉菜单中〈SelectIntergrator〉选择积分方式（见图31）。图31选择化学工作站积分器，点击〈OK〉按钮（见图32）确立。页号:22OF34编号：WI-LABC-020引导文件文件名：GC-MS操作引导文件版本:4.0图32点击积分参数快捷按钮（见图33），成立和编写积分参数文件。图33积分参数设置（见图34）图34初始最小峰面积（InitialAreaReject）页号:23OF34编号：WI-LABC-020引导文件文件名：GC-MS操作引导文件版本:4.0关于面积小于该值的峰，不会进行储存或在计算中使用，也不会包含在报告中。在方法中，常常经过设置高的初始最小峰面积来除去进样瞬变或溶剂峰，在随后的运转时间处可设置较小的值。检测(InitialPeakWidth)峰宽是指半峰高处的宽度。此参数表示积分器要查找的峰的初始峰宽条件。假如峰宽值过大，则所检测到的窄峰数目会大大减少，甚至被完整忽视。假如峰宽设置得过低，则可能会将噪音尖峰检测为峰，而宽峰可能会被完整忽视。“初始峰宽”与积分器封闭或面积加和翻开事件不可以同时使用。肩峰检测(ShoulderDetection)假如两个峰距离太近，以致于它们之间不存在峰谷但仍可分辨出是未分别的峰，这类信号就称为肩峰。积分器不会试试分别这些峰和计算其面积。初始阈值(InitialThreshold)初始阈值决定了积分器的初始敏捷度。阈值每增添1都会使敏捷度降低为本来的1/2。设置的阈值越高，可接受的峰越少。范围为-12.0至25.0。默认值为18。峰加和（AreaSum）开启（ON）和封闭(OFF)使用“面积加和”能够对一组相邻峰的面积履行加和操作，并以单个值形式报告面积加总结果。与该加和有关的保存时间由加和事件的开始（面积加和翻开）和结束（面积加和封闭）时间的均匀值来确立，常用于五指峰积分。定量数据库成立先选择标液数据文件（注:建议选择最高浓度点标液数据文件），点击〈Calibrate〉菜单中〈SetUpQuantitation〉选项（见图35）开始成立定量数据库。图35页号:24OF34编号：WI-LABC-020引导文件文件名：GC-MS操作引导文件版本:4.0定量数据库参数设置（见图36）参照峰窗口/非参照峰窗口用于确立在定量数据库中指定的峰能否存在于目前正在办理的数据文件中。设置2分钟表示正在办理的峰的保存时间都一定在定量数据库中的保存时间的+/-1分钟之内;设置5%表示正在办理的峰的保存时间一定在定量数据库中的保存时间的+/-2.5%以内。参照峰窗口用于内标。非参照峰窗口用于全部其余化合物。图36有关性窗口有关窗口：同意目标离子与限制离子的保存时间之差．对扫描方式

(scan)

的数据典型值为

0.05，而对

SIM

方式的数据可能需要

0.025。缺省+/-

：目标峰起点与终点都一定在希望保存时间

+/-设定值范围内．点击<OK>

按钮进入输入化合物界面（见图

37）。页号:25OF34编号：WI-LABC-020引导文件文件名：GC-MS操作引导文件版本:4.0图37点击<InsertAbove>按钮（图37）进入下一界面（见图38）。在目标化合物保存时间处右键双击出现目标化合物质谱图（SIM信号），见图37：图38页号:26OF34编号：WI-LABC-020引导文件文件名：GC-MS操作引导文件版本:4.0输入目标化合物名称，在目标离子质量杆左右键双击，获得目标离子质量数和丰度，接下来在限制离子质量杆左右键双击，获得离子质量数和与目标离子丰度的比率。（此步骤应用于后续SIM定性）点击<Save>按钮（图38）进行下一个化合物输入，步骤与同样。输入全部目标化合物后，点击<Exit>按钮（图38）进入下一界面（见图39）。图39点击<Yes>按钮进入更新定量数据库界面（见图40）。图40页号:27OF34编号：WI-LABC-020引导文件文件名：GC-MS操作引导文件版本:4.0选择增添浓度点，输入标液浓度和浓度点编号。点击<DoUpdate>按钮（图40）将该浓度点增添到定量数据库中。图41点击<OK>按钮（图41）达成定量数据库初步设置，选择其余标准工作曲线浓度点数准备增添到定量数据库中。选摘要增添的浓度点数据文件，点击<UpdateCalibrate>更新标线按钮（见图42）。图42点击<OK>按钮（图43）进入下一界面。页号:28OF34编号：WI-LABC-020引导文件文件名：GC-MS操作引导文件版本:4.0.图43点击<Yes>按钮（图44）进入下一界面（图45）。图44输入标线浓度和编号，点击<DoUpdate>按钮（图45）将该浓度点更新到定量数据库中。图45页号:29OF34编号：WI-LABC-020引导文件文件名：GC-MS操作引导文件版本:4.0查察标准工作曲线有关系数能否切合测试要求，可在此界面改正标准工作曲线浓度。点击<OK>按钮达成标线更新，如要持续增添其余浓度点，参照步骤进行增添，点击<OK>按钮（图46）达成定量数据库。（注：定量数据库成立都需选择数据文件SIM信号进行标线更新）图46目标化合物定性选摘要办理数据文件，点击计算快捷按钮（图47）。图47点击定量编写快捷按钮进入定量编写界面（图48）。页号:30OF34编号：WI-LABC-020引导文件文件名：GC-MS操作引导文件版本:4.0图48目标化合物定性（见图49）查察峰保存时间与希望保存时间之差能否高出范围（范围由平常标线保存时间统计得出），如高出范围，保证仪器正常状况下可判断能否为目标化合物。图49页号:31OF34编号：WI-LABC-020引导文件文件名：GC-MS操作引导文件版本:4.0右键双击质谱图进行谱库检索，查察目标化合物能否出此刻检索结果（图49）中，般配度能否大于60，如是且保存时间在范围内则可判断为目标化合物。图50五指峰定性提取物五指峰目标离子（EIC目标离子）点击<Chromatogram>菜单中<ExtractIonChromatograms>选项。图51输入目标化合物目标离子，点击<OK>按钮提取目标离