免疫学检验第十三章凝集反应

免疫学检验第十三章凝集反应第1页，共40页，2023年，2月20日，星期三早在1896年，Widal就利用伤寒病人的血清与伤寒杆菌发生特异性凝集的现象，有效地诊断伤寒病。--肥达试验至1903年，Landsteiner在特异性血凝现象的基础上发现了人类ABO血型，并于1930年获得了诺贝尔医学奖。

--血型鉴定凝集反应的发现第2页，共40页，2023年，2月20日，星期三凝集反应的定义凝集反应：

颗粒性抗原（细菌、红细胞等）与相应抗体特异性结合，或可溶性抗原（或抗体）与载体颗粒结合成致敏颗粒（红细胞、聚苯乙烯乳胶颗粒、炭粒）后，它们与相应抗体（或抗原）发生特异性反应，在适当电解质存在下，形成肉眼可见的凝集现象。第3页，共40页，2023年，2月20日，星期三可见反应形成第4页，共40页，2023年，2月20日，星期三阴性？阳性？第5页，共40页，2023年，2月20日，星期三凝集反应的分型凝集反应直接凝集反应间接凝集反应抗球蛋白试验第6页，共40页，2023年，2月20日，星期三第一节直接凝集反应直接凝集反应：

颗粒性抗原直接与抗体结合，在电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象。第7页，共40页，2023年，2月20日，星期三凝集原(agglutinogen)：凝集反应中的抗原。凝集素(agglutinin)：凝集参与反应的抗体第8页，共40页，2023年，2月20日，星期三（一）玻片凝集试验第9页，共40页，2023年，2月20日，星期三方法评价:定性试验简便和快速敏感度低应用:菌种鉴定血清学分型血型鉴定第10页，共40页，2023年，2月20日，星期三

在试管内颗粒性抗原直接与抗体结合，在电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象。（二）试管凝集试验第11页，共40页，2023年，2月20日，星期三0.50.50.50.50.5弃掉0.5

试管凝集试验原理结果

1234567菌液第12页，共40页，2023年，2月20日，星期三

结果+很小的凝集颗粒混浊-无凝集现象与对照相同++小、部分凝集块中等混浊+++大多凝集管底轻度混浊++++大的凝集块清亮凝集程度沉淀上清第13页，共40页，2023年，2月20日，星期三管底沉淀凝集程度第14页，共40页，2023年，2月20日，星期三方法评价：半定量试验简便、快速敏感度低可有假阳性临床应用：肥达试验外斐试验交叉配血试验第15页，共40页，2023年，2月20日，星期三第二节间接凝集反应间接凝集反应:

将可溶性抗原或抗体吸附于颗粒性载体表面，然后与相应的抗体或抗原反应，在电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象.第16页，共40页，2023年，2月20日，星期三载体可溶性抗原致敏致敏颗粒NS凝集颗粒

间接凝集试验示意图第17页，共40页，2023年，2月20日，星期三常用载体红细胞--间接血凝试验聚苯乙烯乳胶--胶乳凝集试验第18页，共40页，2023年，2月20日，星期三1、正向间接凝集试验2、反向间接凝集试验3、间接凝集抑制试验4、协同凝集试验间接凝集反应的类型第19页，共40页，2023年，2月20日，星期三用抗原致敏载体--检测抗体正向间接凝集试验第20页，共40页，2023年，2月20日，星期三反向间接凝集试验用抗体致敏载体----检测抗原第21页，共40页，2023年，2月20日，星期三间接凝集抑制试验用抗原致敏载体--检测抗原第22页，共40页，2023年，2月20日，星期三间接凝集抑制试验待测抗原已知抗体特异结合抗原抗体复合物NS＋致敏颗粒无凝集颗粒阳性第23页，共40页，2023年，2月20日，星期三间接凝集抑制试验待测抗原已知抗体无结合抗原抗体分散NS＋致敏颗粒有凝集颗粒阴性第24页，共40页，2023年，2月20日，星期三SPA:SPA-IgG

Fc;SPA抗体致敏------测抗原协同凝集试验第25页，共40页，2023年，2月20日，星期三

原理图IgGSPASPA-IgG

待测抗原SPA-IgG-待测抗原凝集颗粒混合加入第26页，共40页，2023年，2月20日，星期三间接凝集反应的应用抗原的检测

反向间接凝集试验可用于检测病原体的可溶性抗原，也可用于检测各种蛋白质成分。抗体的检测

检测细菌、病毒、寄生虫等感染后产生的抗体。

第27页，共40页，2023年，2月20日，星期三抗球蛋白试验又称Coombs试验第三节

抗球蛋白试验第28页，共40页，2023年，2月20日，星期三（一）直接Coombs试验不完全抗体检测红细胞上抗体第29页，共40页，2023年，2月20日，星期三（二）间接Coombs试验检测血清中的抗红细胞抗体第30页，共40页，2023年，2月20日，星期三临床应用：在输血上的应用血型抗原抗体的检查对新生儿溶血性贫血性疾病的诊断对溶血性贫血的研究对细菌或立克次体的不完全抗体检查第31页，共40页，2023年，2月20日，星期三

冷凝集试验原理抗原决定簇隐含，不能与抗体结合混合暴露的抗原决定簇与抗体结合混合37℃4℃37℃第32页，共40页，2023年，2月20日，星期三胶乳凝集试验--类风湿因子检测第33页，共40页，2023年，2月20日，星期三抗自身变性IgG抗体，属于IgM类，主要存在于血清中。约90%类风湿性关节炎（RA）患者的RF呈阳性。某些自身免疫病，如冷球蛋白血症、进行性全身性硬化症、干燥综合征、SLE等患者都有较高的阳性率；一些其他疾病如血管炎、肝病、慢性感染也可出现RF。类风湿因子RF第34页，共40页，2023年，2月20日，星期三其病因及发病机制仍不完全明了,机体出现免疫系统紊乱,进而引起关节滑膜、软骨组织慢性炎症和破坏的自身免疫性疾病。类风湿性关节炎RA第35页，共40页，2023年，2月20日，星期三RF可与IgG的Fc段结合。将变性IgG包被于聚苯乙烯胶乳颗粒上，此致敏胶乳在与待测血清中的RF相遇时，即可发生肉眼可见的凝集。乳胶凝集试验第36页，共40页，2023年，2月20日，星期三类风湿胶乳诊断试剂RF阴性对照RF阳性对照反应板搅拌棒主要的试剂和器材第37页，共40页，2023年，2月20日，星期三取阳性血清、阴性血清各1滴于反应板上，然后分别加类风湿胶乳诊断试剂1滴。用搅拌棒充分混匀后，轻轻摇动反应板2～3min，观察结果。步骤第38页，共40页，2023年，2月20日，星期三在室内的光线下观察，有清晰的凝集颗粒出现，且液体澄清者为RF阳性结果观察和判断第39页，共40页