动物生理学 实验课件

动物生理学实验课件2023/4/3第1页，共124页，2023年，2月20日，星期四实验室要求准守实验室守则，勿乱动仪器，保持安静每组六人，设一小组长（试验前后检查实验材料和器材）轮流打扫卫生，带走垃圾

实验报告专业、班级、学号、姓名、同实验者（1个）题目、目的、原理、器材仪器、方法步骤、注意事项、结果分析等2023/4/3第2页，共124页，2023年，2月20日，星期四目录INDEXEXP1.肠系膜血流显微观察EXP2.坐骨神经-腓肠肌标本制备EXP3.蛙心收缩记录和心肌特性EXP4.骨骼肌收缩特性EXP5.离体肠段运动描记EXP6.离体蛙心灌流EXP7.神经动作电位、肌电和肌张力同步记录EXP8.动脉血压的间接测定EXP11.红细胞的凝集与ABO血型鉴定EXP9.红细胞显微计数EXP10.血红蛋白测定EXP12.人体心电图描记EXP13.动脉血压的直接测定及影响因素14.动物生理学试验实验设计2023/4/3第3页，共124页，2023年，2月20日，星期四肠系膜血流显微观察请务必认真学习本课件然后开始实验操作！！！返回目录2023/4/3第4页，共124页，2023年，2月20日，星期四目的要求观察蛙肠系膜血管内血液的流动，了解外周血管的血流特点及其影响因素2023/4/3第5页，共124页，2023年，2月20日，星期四基本原理肠系膜薄而透明，可观察血流情况及神经递质对内脏血管舒缩的作用。

动脉血管内血液由主干流向分支；静脉血管内血液由分支流向主干；毛细血管内血细胞往往单排流动。肠系膜2023/4/3第6页，共124页，2023年，2月20日，星期四仪器材料蟾蜍蛙类手术器械、显微镜、任氏液、0.01%去甲肾上腺素溶液。

具体请以每组清单为准2023/4/3第7页，共124页，2023年，2月20日，星期四方法步骤1.实验准备：损毁蟾蜍的脑、脊髓2023/4/3第8页，共124页，2023年，2月20日，星期四2.然后用大头针将蛙腹位（背位）固定在蛙板上；在腹部侧方做一纵行切口，轻轻拉出一段小肠袢，将肠系膜展开，用大头针将肠系膜固定在蛙板孔上。2023/4/3第9页，共124页，2023年，2月20日，星期四2、实验观察项目（1）动脉、静脉、毛细血管内血液流动特点。（2）机械刺激的影响。（3）肾上腺素的影响。实验报告描绘观察到的现象。2023/4/3第10页，共124页，2023年，2月20日，星期四注意事项1、固定肠系膜时大头针要扎在肠外，避免撕裂要观察的肠系膜；2、大头针斜插固定，便于物镜上下移动；3、注意不要污染显微镜。2023/4/3第11页，共124页，2023年，2月20日，星期四思考题1、根据观察结果，归纳交感神经及其递质对内脏血管活动的作用。2、如何判断动脉血管和静脉血管？3、微循环是如何调节的？2023/4/3第12页，共124页，2023年，2月20日，星期四坐骨神经-腓肠肌标本制备请务必认真学习本课件然后开始实验操作！！！返回目录2023/4/3第13页，共124页，2023年，2月20日，星期四目的要求学习并掌握两栖类神经-肌肉标本的制备方法；观察肌肉的收缩现象。基本原理两栖类神经肌肉标本体外保持活性的条件相对简单，操作容易，其兴奋、收缩特性与哺乳动物的类似。2023/4/3第14页，共124页，2023年，2月20日，星期四仪器材料蟾蜍。蛙毁脊针、蛙类手术器械、玻璃分针、锌铜弓、任氏液等。具体请以每组清单为准2023/4/3第15页，共124页，2023年，2月20日，星期四方法步骤1、损毁脑脊髓。2、在两前肢附近剪断脊柱，去掉内脏，剥离皮肤，制备双后肢标本。2023/4/3第16页，共124页，2023年，2月20日，星期四3、从正中间剪开后肢。4、用玻璃分针分离坐骨神经。5、用玻璃分针分离腓肠肌。6、活性检验。用线结扎8cm左右股骨留2-3cm椎骨留0.5cm2023/4/3第17页，共124页，2023年，2月20日，星期四注意事项1、剪刀的用法：粗剪刀用于剪骨骼、皮肤等，大剪刀用于剪肌肉、眼科剪用于剪神经、血管等纤薄组织。2、神经组织用玻璃分针分离，避免牵拉及用金属器械夹持。3、制备过程中用任氏液保持神经肌肉的湿润。2023/4/3第18页，共124页，2023年，2月20日，星期四思考题1、兴奋是如何从神经传递到肌肉的？2、肌肉收缩是钙离子有什么作用？3、神经兴奋与肌肉收缩如何保证是一对一的关系？2023/4/3第19页，共124页，2023年，2月20日，星期四蛙心收缩记录和心肌特性请务必认真学习本课件然后开始实验操作！！！返回目录2023/4/3第20页，共124页，2023年，2月20日，星期四目的要求了解心肌的某些特性并掌握蛙心收缩的记录方法。观察心肌的期前收缩与代偿间歇现象。基本原理心肌的有效不应期长，在心肌的相对不应期之后、节律性兴奋传来之前给予单个阈上刺激，可引起一次期前（额外）收缩，其后便产生一个较长的代偿间歇。2023/4/3第21页，共124页，2023年，2月20日，星期四仪器材料蟾蜍。RM6240B信号采集处理系统、张力换能器、蛙心刺激电极、铁支架、双凹夹、蛙心夹、蛙板、蛙针、手术器械、丝线、小烧杯、滴管、大头针、纱布，任氏液。2023/4/3第22页，共124页，2023年，2月20日，星期四方法步骤1、实验准备：将蛙双毁髓，仰卧固定于蛙板上，用剪刀剪去胸壁，再小心地剪开心包膜，暴露心脏。将连有丝线的蛙心夹在心室舒张时夹住心尖，丝线另一端连张力换能器(小心！切勿用力牵拉换能器的弹簧片)，换能器接RM6240B信号采集处理系统。2023/4/3第23页，共124页，2023年，2月20日，星期四2、实验操作（1）打开仪器开关（背面）（2）双击电脑桌面“RM6240B”图标（3）打开“实验”下拉菜单，找到相应实验项目：“循环”--“期前收缩-代偿间歇”（4）点击“开始记录”图标单击此处观看示范2023/4/3第24页，共124页，2023年，2月20日，星期四3、观察项目（1）描记正常心搏活动曲线。（2）在心室收缩期给予中等强度的单个刺激，观察能否引起心脏活动的改变?（3）期前收缩和代偿间歇。2023/4/3第25页，共124页，2023年，2月20日，星期四注意事项1、实验中经常给蛙心滴加任氏液，以防心肌组织干燥。2、引起期前收缩后，须间隔一段时间再给予心脏第二次刺激。3、固定刺激电极时确保电极接触心室壁，并且不得影响心室的收缩。4、实验成功的关键在于把握施加刺激的时间。2023/4/3第26页，共124页，2023年，2月20日，星期四思考题1、心肌的绝对不应期长有何生理意义?2、心肌收缩与钙离子的关系？3、心肌受到连续刺激后会发生强直收缩吗？2023/4/3第27页，共124页，2023年，2月20日，星期四骨骼肌收缩特性请务必认真学习本课件然后开始实验操作！！！返回目录2023/4/3第28页，共124页，2023年，2月20日，星期四目的要求熟悉神经肌肉标本的制备方法理解刺激的强度、频率对骨骼肌收缩的影响。2023/4/3第29页，共124页，2023年，2月20日，星期四基本原理骨骼肌机械收缩时间>>兴奋不应期，可以发生收缩的叠加；刺激的频率增大到一定数值时，会发生强直收缩。2023/4/3第30页，共124页，2023年，2月20日，星期四仪器材料蟾蜍。蛙类手术器械，任氏液，生理数据采集系统、张力换能器、肌槽。具体以清单为准。2023/4/3第31页，共124页，2023年，2月20日，星期四方法步骤1、神经肌肉标本的制备。注意问题：（1）保留股骨2cm左右（2）结扎牢固，防止滑脱（3）肌肉、神经保持湿润2023/4/3第32页，共124页，2023年，2月20日，星期四2、联结仪器（教师示范）（1）股骨用肌槽的螺丝固定；（2）结扎线联结于张力换能器；（小心！切勿用力牵拉换能器的弹簧片）（3）神经搭在电极上。2023/4/3第33页，共124页，2023年，2月20日，星期四3、观察项目（1）单收缩（2）不完全强直收缩（3）完全强直收缩操作系统：

神经肌肉—刺激频率—典型实验点击观看示范2023/4/3第34页，共124页，2023年，2月20日，星期四注意事项1、制备标本过程中，应随时用任氏液润湿神经和肌肉，防止干燥。2、游离神经时，切勿用玻璃分针逆向剥离，以防损伤神经干，又要避免金属器械对神经的不必要触碰。2023/4/3第35页，共124页，2023年，2月20日，星期四思考题1、骨骼肌完全强制收缩时，其细胞膜上的动作电位是怎样的？2、骨骼肌收缩一段时间后为什么会收缩能力下降？3、影响骨骼肌收缩的因素有哪些？返回目录2023/4/3第36页，共124页，2023年，2月20日，星期四离体肠段运动描记请务必认真学习本课件然后开始实验操作！！！返回目录2023/4/3第37页，共124页，2023年，2月20日，星期四目的要求观察平滑肌运动的一般特性，了解某些理化因素对平滑肌运动的影响。2023/4/3第38页，共124页，2023年，2月20日，星期四基本原理肠道平滑肌具有自律性，离体肠段在适宜条件下可保持自律性收缩的特性，其收缩频率和幅度受到某些理化因素的影响。2023/4/3第39页，共124页，2023年，2月20日，星期四仪器材料兔。哺乳动物手术器械、注射器、离体器官恒温装置、充气装置、张力换能器、RM6240B生理信号采集系统肾上腺素、乙酰胆碱等。具体以试验台贴出的清单为准2023/4/3第40页，共124页，2023年，2月20日，星期四方法步骤1、实验准备（1）恒温装置预热38℃a.台氏液

b.麦氏浴皿保持100ml左右的台氏液一直在水浴中预热。2023/4/3第41页，共124页，2023年，2月20日，星期四注意：必须在完成预热工作后方可进行本部分操作！！！（2）离体肠段制备快速处死兔子（击打延髓或耳缘静脉注射空气，一定要迅速！！）迅速剖开腹腔找到与胃连接的十二指肠，食糜后推，剪取十二指肠，将其剪成2cm的肠段，立即放入38℃台氏液烧杯中。关键：操作迅速，否则影响实验结果！2023/4/3第42页，共124页，2023年，2月20日，星期四（3）联结仪器注意：

肠段浸入台氏液；

通气，控制通气速度。2023/4/3第43页，共124页，2023年，2月20日，星期四2、实验操作（1）打开仪器开关（背面）（2）双击电脑桌面“RM6240B”图标（3）打开“实验”下拉菜单，找到相应实验项目（4）点击“开始记录”图标单击此处观看示范2023/4/3第44页，共124页，2023年，2月20日，星期四3、观察项目（1）正常运动曲线。（2）温度的影响。（3）乙酰胆碱的影响。（4）肾上腺素的影响。（5）钙离子（6）酸（7）碱2023/4/3第45页，共124页，2023年，2月20日，星期四注意事项1.

标本安装好后，应在新鲜38℃台氏液中稳定5～10min，有收缩活动时即可开始实验。2.注意控制温度。加药前，要先准备好更换用的新鲜38℃台氏液，观察到实验结果后，应立即用38℃台氏液冲洗，待肠段活动恢复正常后，再进行下一个实验项目。3.平滑肌反应较慢，若效果不明显，可以增补剂量，但要防止一次性加药过量。2023/4/3第46页，共124页，2023年，2月20日，星期四思考题1、各种药物对平滑肌运动的影响机理。2、实验过程中为什么要不断通气？3、滴加药物的顺序有什么要求？2023/4/3第47页，共124页，2023年，2月20日，星期四离体蛙心灌流请务必认真学习本课件然后开始实验操作！！！返回目录2023/4/3第48页，共124页，2023年，2月20日，星期四目的要求掌握离体蛙心制备和灌流方法；了解体液因素对蛙心收缩的影响。2023/4/3第49页，共124页，2023年，2月20日，星期四基本原理心肌的收缩强度、频率等受肾上腺素、乙酰胆碱等激素、神经递质以及各种离子浓度等因素影响。2023/4/3第50页，共124页，2023年，2月20日，星期四仪器材料蟾蜍。蛙心套管、蛙心夹、蛙板、蛙类手术器械、RM6240生理信号采集系统、张力换能器、任氏液、长滴管、铁架台等。

2023/4/3第51页，共124页，2023年，2月20日，星期四方法步骤1、实验准备对蛙双毁髓，仰卧固定于蛙板上，用剪刀剪去胸壁，再小心地剪开心包膜，暴露心脏，识别心脏动脉球（圆锥）、静脉窦(背面)等结构(图17-1A、B、C)。球2023/4/3第52页，共124页，2023年，2月20日，星期四球2023/4/3第53页，共124页，2023年，2月20日，星期四2.于主动脉干下穿双线备用。3.用玻璃分针将蛙心向前翻转，在心脏背侧找到静脉窦，在静脉窦以外用一条备用线结扎(注意勿结扎静脉窦)，阻止血回心。球212023/4/3第54页，共124页，2023年，2月20日，星期四4.在左主动脉靠近动脉球处剪一向心斜口(勿把血管剪断)，将注有少许任氏液的蛙心插管由此开口插入动脉球，使插管尖端向动脉球背部后方及心尖方向推进，在心室收缩时把插管推入心室内（套管中有血喷出）。插管进入心室后，调整合适位置，可见插管内液面随心跳而升降。小心用任氏液反复冲洗管内的液体至清澈为止。2023/4/3第55页，共124页，2023年，2月20日，星期四用另一条备用线把血管和插管扎紧，并固定于插管的玻璃小钩上，以免心脏滑脱。

玻璃小钩2023/4/3第56页，共124页，2023年，2月20日，星期四5.轻提插管，剪断与心脏相连的血管和组织(注意勿损伤静脉窦及两心房)，摘下心脏。用任氏液反复冲洗插管内的液体至清澈为止。将离体蛙心联结记录仪器。进行以下实验。2023/4/3第57页，共124页，2023年，2月20日，星期四6、实验项目（1）描记正常心跳曲线（2）钙离子的影响。（3）钾离子的影响。（4）肾上腺素。（5）乙酰胆碱。仿实验结果描记曲线2023/4/3第58页，共124页，2023年，2月20日，星期四注意事项1.结扎静脉及固定插管时一定避开静脉窦，否则心脏停止跳动。2.固定换能器时应稍向下倾斜，以免自心脏滴下的水流入换能器内造成短路。3.滴加药物勿混用滴加试剂的滴管；加试剂应由少到多，作用不明显再补加；加后立即用滴管搅匀，使之迅速发挥作用；出现明显效应后，应立即吸出全部灌流液，并以新鲜任氏液换洗，直至恢复正常。4.随时滴加任氏液于心脏表面，使之保持湿润状态。5.保证记录连续，及时在曲线上加以标记，分析各现象产生原因.2023/4/3第59页，共124页，2023年，2月20日，星期四思考题1、分析有的蛙心标本插管内液面升降不明显的原因并提出相应的对策。2、实验过程中套管内液面为什么每次都应保持一定的高度？3、高Ca2+任氏液与肾上腺素引起的心脏活动变化有何不同？为什么？2023/4/3第60页，共124页，2023年，2月20日，星期四神经动作电位、

肌电和肌张力同步记录请务必认真学习本课件然后开始实验操作！！！返回目录2023/4/3第61页，共124页，2023年，2月20日，星期四目的要求掌握神经干动作电位、肌肉动作电位、肌张力同步记录方法；理解动作电位的产生、传导、传递及兴奋收缩偶联的过程；理解强直收缩时动作电位的形态。2023/4/3第62页，共124页，2023年，2月20日，星期四基本原理神经、肌肉兴奋的不应期较短，可以发生较高频率的兴奋，使骨骼肌的收缩发生叠加。阈强度与顶强度的概念。2023/4/3第63页，共124页，2023年，2月20日，星期四仪器材料蟾蜍。蛙板、蛙类手术器械、RM6240生理信号采集系统、张力换能器、任氏液、长滴管、铁架台等。2023/4/3第64页，共124页，2023年，2月20日，星期四方法步骤1、实验准备（1）制备坐骨神经-腓肠肌标本（2）连接仪器将标本的股骨固定在屏蔽盒的股骨固定孔内，腓肠肌跟腱的结扎线与张力换能器的弹簧片连接，坐骨神经干置于屏蔽盒中的刺激电极和黄金引导电极上。针式引导电极斜插入腓肠肌，但不要太深。张力换能器接计算机生物信号采集系统（RM6240B信号采集处理系统）1通道，神经干动作电位引导（黄金）电极接3通道，骨骼肌肌膜电位引导电极接2通道。屏蔽盒上的刺激电极和系统的刺激输出相连。接地电极可以接在屏蔽盒或铁架台上。调节张力换能器高低，使肌肉长度约为原长度的1.2倍，开始试验。2023/4/3第65页，共124页，2023年，2月20日，星期四2、实验操作（1）打开操作系统（2）一通道改为“张力”，（3）二通道调灵敏度2.5mV(测神经干AP)（4）三通道调灵敏度1.0-2.5mV(测肌AP)（5）关闭四通道。（6）调出刺激器对话框（7）选择刺激模式：强度递增刺激，强度改为0.012023/4/3第66页，共124页，2023年，2月20日，星期四（8）点击开始记录，并施加刺激，观察阈强度与顶强度；（9）重新选择刺激模式：频率递增刺激，观察并记录融合频率。（10）保存文件，分析结果：神经干AP与肌电AP有无间隔？肌电AP与肌张力的出现有无间隔？2023/4/3第67页，共124页，2023年，2月20日，星期四注意事项制备标本时务必保证神经的生理完整性。保留的脊椎骨尽量小。记录下蟾蜍的体重，阈强度与顶强度、融合频率的数值。2023/4/3第68页，共124页，2023年，2月20日，星期四思考题分析由刺激引起骨骼肌收缩的生理过程，那个阶段耗时最长？骨骼肌强直收缩时，AP融合了吗？2023/4/3第69页，共124页，2023年，2月20日，星期四红细胞的凝集与ABO血型鉴定请务必认真学习本课件然后开始实验操作！！！返回目录2023/4/3第70页，共124页，2023年，2月20日，星期四目的要求观察红细胞的凝集现象。学习血型鉴定的基本原理，掌握利用标准血清进行人类ABO血型鉴定的方法。2023/4/3第71页，共124页，2023年，2月20日，星期四基本原理血型是根据红细胞细胞膜上抗原（凝集原）的种类而将血液分成的类型。红细胞膜上只含有A型凝集原、血清中含有抗B凝集素的为A型血，红细胞膜上只有B型凝集原、血清中只有抗A凝集素的为B型血，红细胞膜上具有AB两种凝集原、血清中没有凝集素的为AB型血，红细胞膜上没有AB凝集原、血清中具有抗A和抗B两种凝集素的为O型血。当相应的凝集原、凝集素相互作用时，就产生红细胞的凝集。可依此用标准血清判定被测定人红细胞上凝集原的类型，即血型。2023/4/3第72页，共124页，2023年，2月20日，星期四仪器材料人。双凹载玻片、一次性采血针、牙签、酒精棉球、干棉球、标准血清

2023/4/3第73页，共124页，2023年，2月20日，星期四方法步骤1、取一干燥清洁双凹载玻片，在左、右上角标好“Ａ”、“Ｂ”字样，分别滴入抗Ａ(即Ｂ型)、抗Ｂ(即Ａ型)标准血清1滴。2、人指尖或耳垂消毒，待酒精挥发后用采血针采血。挤出第一滴血用干棉球擦去。再挤出一滴血液，用牙签刮下，与标准血清混合均匀；再挤出一滴血，用牙签另一端刮下，与另一侧的标准抗血清混合均匀，室温下静置几分钟，观察。2023/4/3第74页，共124页，2023年，2月20日，星期四3、观察判定：如有凝集反应可见到红色点状或小片状凝集块浮起，红细胞聚集成团，虽经振荡或轻轻搅动亦不散开，为“凝集”；红细胞散在均匀分布或虽似成团，一经振荡即散开，则为未凝集或“假凝集”。必要时可在显微镜下观察。按下图判定血型。2023/4/3第75页，共124页，2023年，2月20日，星期四2023/4/3第76页，共124页，2023年，2月20日，星期四A型标准血清（含抗B凝集素）B型标准血清（含抗A凝集素）2023/4/3第77页，共124页，2023年，2月20日，星期四注意事项1、所用双凹玻片实验前必须清洗干净，以免出现假凝集现象。

2、采血针一定要专人专用。3、牙签两端不可混用。2023/4/3第78页，共124页，2023年，2月20日，星期四思考题如果没有标准血清，仅知道1人的血型为A型或B型，请你设计无标准血清情况下测知全班同学血型的实验方案。2023/4/3第79页，共124页，2023年，2月20日，星期四动脉血压的间接测定请务必认真学习本课件然后开始实验操作！！！返回目录2023/4/3第80页，共124页，2023年，2月20日，星期四目的要求1、学习并掌握人体间接测压法的原理和方法。2、观察在正常情况下，某些因素对动脉血压的影响。2023/4/3第81页，共124页，2023年，2月20日，星期四基本原理

外加压力使血管变窄形成血液涡流时,则可发生声音.当外加压力超过动脉收缩压时,动脉血流完全被阻断.此时听不到声音,当外加压力等于或稍低于动脉内的收缩压时而高于舒张压时,则在心脏收缩时,动脉内有少量血流通过,而心室舒张时而无血流通过.血流连续通过血管时,会发出声音.故恰好可以完全阻断血流的最小外加压力相当于收缩压。当外加压的等于或小于舒张压时没,血管内血流连续通过,所发出的音调会突然降低或声音消失.在心室舒张时有少许血液通过的最大管外压力相当于舒张压.

2023/4/3第82页，共124页，2023年，2月20日，星期四打气球螺丝压脉带胸具压脉带压脉带2023/4/3第83页，共124页，2023年，2月20日，星期四仪器材料血压计、听诊器2023/4/3第84页，共124页，2023年，2月20日，星期四方法步骤1、正常血压的测定（1）松开打气球上的螺丝，将压脉带内的空气放出，再将螺丝扭紧。（2）受试者脱左臂衣袖，静坐。肘臂伸直，掌心向上，平放在实验台上。（3)将压脉带裹于左上臂，其下缘在臂弯上2-3cm处，松紧适宜(松紧以能放入一指为宜)，位置与心脏同一水平。

(4)在肘窝部找到肱动脉搏动处，将听诊器的胸具置于其上。注意：不可用力下压。2023/4/3第85页，共124页，2023年，2月20日，星期四（5）用听诊器听取血管音变化。右手持打气球，向压脉带打气加压到血压计200mmHg处。然后扭开打气球螺丝，缓慢放气（切勿过快）。此时可听到血管音的一系列变化，声音从无声——有声（收缩压）——无声（舒张压）。（6）扭紧打气球螺丝再打气加压，反复听取声音变化2~3次。算出血压平均值。2023/4/3第86页，共124页，2023年，2月20日，星期四2、运动对血压的影响

受试者作原地蹲起运动，1min内完成30次，共做2min。运动后立即坐下，30s测量血压一次，直至血压恢复正常。2023/4/3第87页，共124页，2023年，2月20日，星期四注意事项1、保持室内安静，以利听诊。2、在听诊过程中，充气或放气不宜过快或过慢。3、戴听诊器时，务使耳具的弯曲方向与外耳道一致，即接耳的弯曲端向前。4、重复测压时，须将压脉带内空气放尽，使压力降至零位，而后再加压测量。测压前嘱受试者休息10分钟。2023/4/3第88页，共124页，2023年，2月20日，星期四思考题1、心动周期中血管的平均压与舒张压和收缩压的关系。2、测定血压时为什么要与心脏基本保持水平？3、高血压与低血压分别反映了心血管什么方面的问题？2023/4/3第89页，共124页，2023年，2月20日，星期四红细胞计数

[目的]了解红细胞计数的原理并掌握其计数的方法。[原理]血细胞的计数是用适当的溶液将血液稀释后，放入计数板的计数室内，在显微镜下记录一定容积血液稀释液中的血细胞个数，再将所得结果换算成每升血液中的血细胞个数。返回目录2023/4/3第90页，共124页，2023年，2月20日，星期四[材料及用具]计数器，显微镜，生理盐水，蒸馏水，抗凝血，血细胞计数板，1.5毫升吸管，血红蛋白（微量）采血管，试管。[方法及步骤]

：1.首先检查计数板及血红蛋白（微量）采血管是否清洁，如有污垢，应先洗涤干净。然后将计数板放于低倍镜（4倍）下，熟悉计数室的构造。2023/4/3第91页，共124页，2023年，2月20日，星期四2.血细胞计数板的结构：计数板是一块长方形厚玻璃板，每块计数板由H型凹槽分为两个同样的计数池。计数池平面比整个玻璃板的平面低0.1mm。╬╬计数池2023/4/3第92页，共124页，2023年，2月20日，星期四计数池的长宽各3mm，被平均分为边长为1mm的9个大方格，称为计数室。每个大方格面积为1mm2，体积为0.1mm3。

中央的大方格由双线划分为25个中方格，每个中方格面积为0.04mm2，体积为0.004mm3。其中位于正中及四角的5个中方格是计数红细胞的区域，每个中方格又各分成16个小方格。2023/4/3第93页，共124页，2023年，2月20日，星期四3.稀释：用微量采血管吸取20微升的血液，用干棉球擦去管外面的血液，再放入盛有4毫升生理盐水的试管内，用上清液清洗管内残留血液，并混匀.4.充池(布血)：将盖玻片一边与计数池纵线末端接触，然后缓慢放下，使盖玻片盖在计数室上，然后用滴管吸取稀释血液，滴半滴于计数室与盖玻片交界处，稀释血液可自动均匀地渗入计数室。放置1—2分钟，待红细胞下沉后，就可将计数室置于低倍镜下进行计数。2023/4/3第94页，共124页，2023年，2月20日，星期四5.计数：计数时光线不必过强，红细胞在10倍镜下计数，记录计数室四角及中间共五个中方格（共80个小方格）中所有的红细胞数。计数视野的移动路线见右图。对于压线的血细胞，按照数上不数下，数左不数右原则计数。如发现各中方格红细胞数目相差20个以上，表明血细胞分布不均匀，必须把稀释液摇匀后重新充池计数。6.红细胞的计数方法是，将5个中方格所得的红细胞数乘以1010，即为要求的每一升血液中的红细胞数。2023/4/3第95页，共124页，2023年，2月20日，星期四7.仪器洗涤

计数板、盖玻片等用清水冲洗，立着晾干。

8.要求与思考题：

计算结果，报告中简要说明计算过程求出本组同学测定的均值并评价之

9.注重事项：

充液前应充分混匀血细胞悬液，充液要连续、适量，充液后应待血细胞下沉后再计数；

计数板、盖玻片、微量吸血管等用过后必须立即按要求洗涤干净

2023/4/3第96页，共124页，2023年，2月20日，星期四目的要求利用沙里氏比色法测定动物血红蛋白的含量。血红蛋白的测定返回目录2023/4/3第97页，共124页，2023年，2月20日，星期四基本原理血液中的血红蛋白在氧化剂（稀盐酸）作用下，可转变为稳定、棕色的高铁血红蛋白，其颜色与血红蛋白（或高铁血红蛋白）的浓度成正比。与标准色进行对比，可求出血红蛋白的浓度，即每升血液中含血红蛋白克数（g·L-1）。2023/4/3第98页，共124页，2023年，2月20日，星期四仪器材料沙里氏血红蛋白计、血红蛋白（微量）采血管、试管、培养皿、1%HCl、蒸馏水、乙醇、乙醚2023/4/3第99页，共124页，2023年，2月20日，星期四沙里氏血红蛋白计：标准褐色玻璃比色箱和1只方形刻度测定管（比色管）。比色管两侧通常有两行刻度；一侧为血红蛋白量的绝对值，以g·dl-1(每100ml血液中所含血红蛋白的克数)表示，从2～22g；另一侧为血红蛋白相对值，以%（即相当于正常平均值的百分数）来表示，从10%～160%。一般采用绝对值来表示。2023/4/3第100页，共124页，2023年，2月20日，星期四方法步骤1.先检查血红蛋白计的测定管和微量采血管是否清洁，如不清洁则依次用自来水、蒸馏水(3次)、95％酒精(2次)和乙醚(1-2次)清洗。2.将0.1mol/L盐酸加入测定管中至刻度“2”或“10％”处。3.用微量采血管吸血20µl，干棉球拭去外壁血液，将血液立即吹入测定管的盐酸中。反复吸吹，使吸血管中血液全部进入盐酸液中(避免起气泡)。混匀，静置10min，使管内的盐酸和血红蛋白完全作用，形成棕色的高铁血红蛋白。2023/4/3第101页，共124页，2023年，2月20日，星期四4.把测定管插入标准比色箱两色柱中央的空格中。5.使无刻度的两面位于空格的前后方向，便于透光和比色。用滴管向刻度管内逐滴加入蒸馏水，并不断搅匀，边滴，边观察、边对着自然光进行比色，直到溶液的颜色与标准比色板的颜色一致为止。6.读出测定管内液体凹面最低处的刻度，即为每100mL血液中血红蛋白的克数。再换算成每升血液中含血红蛋白克数（g·L-1）。2023/4/3第102页，共124页，2023年，2月20日，星期四注意事项1．血液与盐酸作用时间不可少于10分钟，否则血红蛋白不能充分转变成高铁血红蛋白，使结果偏低。

2．比色时应将玻棒取出，而且最好在自然光下，而不应在黄色光下进行，以免影响结果。

3．整个实验过程中均应注意避免起泡。

2023/4/3第103页，共124页，2023年，2月20日，星期四思考题1.盐酸量的多少及作用时间长短对结果会产生什么影响？为什么？2.血液中血红蛋白的含量的多少是否能反映机体的健康状况？为什么？3.测定血红蛋白的实际意义是什么？2023/4/3第104页，共124页，2023年，2月20日，星期四人体心电图描记请务必认真学习本课件然后开始实验操作！！！返回目录2023/4/3第105页，共124页，2023年，2月20日，星期四目的要求学习人体心电图描记方法和心电图波形的测量方法，辨认正常心电图的波形并了解其生理意义。2023/4/3第106页，共124页，2023年，2月20日，星期四基本原理正常人心脏由窦房结发出兴奋，按一定途径和时程，依次传向心房和心室，引起整个心脏的兴奋。这种生物电变化通过心脏周围的导电组织和体液，反应到身体表面使身体表面也随心动周期发生有规律的电变化。将测量电极置于人体表面的一定部位，通过仪器记录出来的心脏电变化曲线即为目前临床上常规记录的心电图（ECG）2023/4/3第107页，共124页，2023年，2月20日，星期四仪器材料实验对象：人体器材：RM6240B生理信号采集处理系统、心电引导电极、酒精棉。2023/4/3第108页，共124页，2023年，2月20日，星期四方法步骤1、接好仪器的电源线、地线和导联线。2、受试者安静，舒适地平卧在实验台上，肌肉放松。3、按电极颜色接好导联线：红色—右手（RA），黄色—左手（LA），黑色—右足(RL）