动物生理学实验课件

第1页，共28页，2023年，2月20日，星期三动物生理学实验课的要求遵守学习纪律，准时上、下课。实验期间不得无故外出或早退。特殊情况下，应向教师请假。爱护公共财物，注意节约各种实验用品。实验动物按组发给，如需补充使用，须经教师同意才能补领。实验结果存在固定的盘上，每组上课时记住带一张盘，实验结束后立即将结果拷出。切勿在电脑上设置密码，带的盘要干净，免得电脑被感染病毒。保持实验室清洁整齐，随时清除污物。实验完毕后，应将实验器材、用品收拾妥当；将手术器械擦洗干净，清点数量，放回原处。经教师检查后才能离开实验室。实验前必须仔细预习实验指导，了解实验的目的要求、基本原理以及简要的操作步骤。复习有关理论，以便提高实验过程中的主动性和效率，并进一步巩固有关理论知识实验报告第2页，共28页，2023年，2月20日，星期三动物生理学实验基本操作技术一、常用手术器械蛙类实验手术器械：剪刀、镊子、金属探针、玻璃分针、铜锌弓、蛙心夹、蛙板等。哺乳动物手术器械：

手术刀、止血钳、咬骨钳、动脉夹、气管插管、血管插管（包括静脉插管和动脉插管）等。第3页，共28页，2023年，2月20日，星期三止血钳第4页，共28页，2023年，2月20日，星期三手术刀第5页，共28页，2023年，2月20日，星期三手术剪和手术镊第6页，共28页，2023年，2月20日，星期三二、手术器械的消毒方法煮沸消毒法：一般用蒸馏水加热，水沸3~5min后，将器械放入消毒锅内，等第二次水沸后15min，对怀疑有芽孢感染的，必须煮沸60min以上高压蒸汽灭菌法：高压灭菌锅，蒸汽压15~20lb/in2，温度121.6~126.6C，30min左右。不宜于橡胶制品和锐利器械的灭菌。化学药品消毒法：常用消毒剂有：LJ-强化戊二醛、70%乙醇（不适于金属器械的消毒）、0.1%新洁尔灭、酶皂溶液、甲醛溶液等，金属器械应浸泡30min以上。（见下表）烧灼灭菌法，适用于金属器械第7页，共28页，2023年，2月20日，星期三第8页，共28页，2023年，2月20日，星期三三、常用实验动物青蛙和蟾蜍家兔大白鼠和小白鼠鱼类鸟类等第9页，共28页，2023年，2月20日，星期三实验动物的抓取固定方法

蟾蜍蛙类抓取方法宜用左手将动物背部贴紧手掌固定，以中指、无名指、小指压住其左腹侧和后肢，拇指和食指分别压住左、右前肢、右手进行操作。在抓取是蟾蜍时，注意勿挤压其两则耳部突起之毒腺，以免毒液射进眼中。实验如需长时间观察，可破坏其脑脊髓（观察神经系统反应时不应破坏脑脊髓）或麻醉后用大头针固定在蛙板上。依实验需要采取俯卧位或仰卧位固定。第10页，共28页，2023年，2月20日，星期三家兔抓取：实验家兔多数饲养在笼内，所以抓取较为方便，一般以右手抓住兔颈部的毛皮提起，然后左手托其臀部或腹部，让其体重重量的大部分集中在左手上，这样就避免了抓取过程中的动物损伤。不能采用抓双耳或抓提腹部。(1、2、3均为不正确的抓取方法（1．可损伤两肾，2．可造成皮下出血，3．可伤两耳），4、5为正确的抓取方法。颈后部的皮厚可以抓，并用手托兔体)第11页，共28页，2023年，2月20日，星期三台式固定：做血压测量、呼吸等实验和手术时，则需将兔固定在兔台上，四肢用粗棉绳活结绑住，拉直四肢，将绳绑在兔台四周的固定木块上，头以固定夹固定或用一根粗棉绳挑过兔门齿绑在兔台铁柱上。第12页，共28页，2023年，2月20日，星期三几种常用生理盐溶液的配制生理性溶液为代替液，用于维持离体的组织、器官及细胞的正常生命活动。它必须具备下列条件：⑴渗透压与组织也相等；⑵应含有组织、器官维持正常机能所必需的比例适宜的各种盐类离子；⑶酸碱度应与血浆相同，并具有充分的缓冲能力；⑷应含有氧气和营养物质。动物实验中常用的生理盐溶液有生理盐水、任氏（Ringer）溶液、乐氏（Locke）溶液和台氏（Tyrode）溶液四种，其成分各异，如下表所示。第13页，共28页，2023年，2月20日，星期三第14页，共28页，2023年，2月20日，星期三各种生理盐溶液的用途

生理盐水：即与血清等渗之NaCl溶液，在冷血动物应用0.6%-0.65%，在温血动物应用0.85%-0.9%。任氏溶液：用于青蛙及其他冷血动物。乐氏溶液：用于温血动物之心脏、子宫及其它离体脏器。用作灌注液者须于用前通入氧气泡15分钟。低钙乐氏液（含无水氯化钙0.05g）用于离体小肠及豚鼠的离体支气管灌注。台氏溶液：用于温血动物之离体小肠。第15页，共28页，2023年，2月20日，星期三动物的麻醉在急、慢性动物实验中，手术前均应将动物麻醉，以减轻或消除动物的痛苦，保持安静状态,从而保证实验顺利进行。理想的麻醉药品应当是对动物麻醉完善，其毒性和对生理功能干扰最小，使用方便。1．常用麻醉剂的种类和用法局部麻醉剂：0.5%-1.0%盐酸普鲁卡因或2%盐酸可卡因用作皮肤或黏膜表面麻醉。全身麻醉剂：发挥性的乙醚，非挥发性的巴比妥类、氨基甲酸乙酯等，在生理学实验中，多采用全身麻醉剂。第16页，共28页，2023年，2月20日，星期三2.麻醉前的准备工作熟悉麻醉药品的特点

根据实验内容合理选用麻醉药。麻醉前应核对药物名称；检查药品有无变质或过期失效。狗、猫等手术前应禁食12小时，以减轻呕吐反应。需在全麻下进行手术的慢性实验动物，可适当给予麻醉辅助药。例如，皮下注射吗啡镇静止痛，注射阿托品减少呼吸道分泌物的产生等。

第17页，共28页，2023年，2月20日，星期三3.给药方法1）全身性麻醉：吸入麻醉：乙醚注射麻醉：常用乌拉坦、戊巴比妥钠及氯醛糖等。主要给药途径有：静脉注射、腹腔注射、肌肉注射、皮下注射、皮下淋巴囊注射等2）局部麻醉：表面麻醉：药物通过点眼、喷雾或涂布作用于粘膜表面，转而透过粘膜接触粘膜下神经末梢而发挥作用。该药物除具有麻醉作用外，还有较强的穿透力，如的卡因、利多卡因；浸润麻醉：用注射的方法将药物送到神经纤维旁。此类药物只需有局部麻醉作用，不一定要求有强大的穿透力，如普鲁卡因(对氨苯甲酸酯)、可卡因、利多卡因（其效力是普鲁卡因的2倍）。用作局部麻醉的药物的浓度一般为1%～2%，通常用0.5%～1%.第18页，共28页，2023年，2月20日，星期三4.麻醉效果的观察呼吸：深慢而平稳角膜反射：明显迟钝肌张力：全身肌肉松弛皮肤夹捏反射消失。第19页，共28页，2023年，2月20日，星期三5.兔耳缘静脉注射时的注意事项麻醉前应正确选用麻醉药品、用药剂量及给药途径；进行静脉麻醉时，先将总用药量的三分之一快速注入，使动物迅速渡过兴奋期，余下的三分之二量则应缓慢注射，并密切观察动物麻醉状态及反应，以便准确判断麻醉深度；如麻醉较浅，动物出现挣扎或呼吸急促等，需补充麻醉药以维持适当的麻醉。一次补充药量不宜超过原总用药量的五分之一；麻醉过程中，应随时保持呼吸道通畅，并注意保温；第20页，共28页，2023年，2月20日，星期三止血采血方法手术中，若遇到出血，常用的止血方法有:

钳夹止血法，压迫止血法，结扎止血法，烧烙止血法兔的采（取）血方法有耳中央动脉取血，股动脉取血，耳缘静脉取血，心脏穿刺取血。第21页，共28页，2023年，2月20日，星期三实验一生理机能系统的使用与

血型测定第22页，共28页，2023年，2月20日，星期三一、生理机能系统的使用开机顺序：贵重仪器先关后开熟悉系统操作仪器使用操作示教操作训练第23页，共28页，2023年，2月20日，星期三二、血型测定实验原理一、血型

血型：指的是红细胞膜上特异性抗原的类型。所谓的血型，主要指红细胞血型。红细胞凝集：若不同血型的血液混合，会出现红细胞彼此聚集在一起，成为一簇簇的细胞团，这种现象称为红细胞凝集反应。红细胞凝集反应是一种抗原—抗体反应，它是免疫反应的一种形式。凝集原（agglutinogen）：红细胞膜上存在着特异的抗原。凝集素（agglutinogen）：血液中与红细胞膜上的凝集原起反应的特异抗体。第24页，共28页，2023年，2月20日，星期三血型的分类:目前已知人类的RBC除ABO血型系统外,还有Rh、P等23个血型系统。ABO血型是根据红细胞表面存在的凝集原（A或B）决定的，分为A、B、AB、O四型。第25页，共28页，2023年，2月20日，星期三二、人类的Rh血型红细胞中含Rh因子的为Rh阳性，无为阴性我国汉人99%阳性，少数人民阴性占一定比例。白种人阴性多于阳性抗Rh抗体:为后天获得的免疫性抗体。是一种IgG(分子较小),能透过胎盘。*临床意义:

1.再次输血时，可能导致凝集反应

2.再次怀孕可能会出现死胎第26页，共28页，2023年，2月20日，星期三1.输血型相合的血液,最好成分输血;2.输血前必须进行血型交叉配血试验三、输血的原则给血者受血者红细胞血清红细胞血清主侧次侧*两侧均不凝:配血相合,可以输血;*主侧凝集,配血不合,绝对不能输！*主侧不凝次侧凝集,配血基本相合，紧