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文档简介
检测生物组织中的一.实验原理:某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。如:①.还原性糖的鉴定:还原性糖+②.脂肪的鉴定:
脂肪+脂肪+
③.蛋白质的鉴定:蛋白质+④淀粉+斐林试剂砖红色沉淀苏丹Ⅲ橘黄色苏丹Ⅳ红色双缩脲试剂紫色碘蓝色▲二.目的要求:尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质1、还原糖的检测和观察:选材应该选择含
量高.颜色为的植物组织,以苹果.梨为最好。糖白色或近于白色制备组织样液:制浆过滤取液三.实验过程:用一层纱布①还原糖有
。②试剂:
.(甲液:0.1g/ml的
,乙液:0.05g/ml的
.)甲乙液必须
后再加入样液中,
。③必须
。葡萄糖,果糖,麦芽糖用水浴加热斐林试剂NaOHCuSO4等量混合均匀现配现用注意事项:④颜色变化:浅蓝色棕色砖红色2、脂肪的检测和观察:圆形小颗粒呈橘黄色,说明有脂肪存在。方法一:待测组织样液+苏丹Ⅲ染液→橘黄色取材:花生种子(浸泡3~4h),将子叶削成薄片方法二:制作子叶临时切片,用显微镜观察子叶细胞的着色情况。制片①取最理想的薄片②在薄片上滴苏丹Ⅲ染液(2~3min)③去浮色(用50﹪酒精)④制成临时装片观察低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒,然后用高倍镜观察结论:注意事项:①切片要薄,如厚薄不均就会导致观察时有的地方清晰有的地方模糊。②酒精的作用是:
。③需使用显微镜观察④使用不同的染色剂染色时间不同颜色变化:
。洗去浮色橘黄色或红色(3)注意事项:①试剂:
(
A液:0.1g/ml的
;B液:0.01g/ml的
)先加
,再加
。B液要求量适中,否则多余的B液将会与A液发生反应生成Cu(OH)2显色而遮盖原有的颜色。②鉴定前,留出一部分组织样液,以便对比双缩脲试剂A液1mlB液4滴NaOHCuSO4蛋白质的检测结果③用于蛋白质鉴定的蛋清必须稀释,以免实验后粘住试管壁,不易洗刷斐林试剂与双缩脲试剂的比较:A液:0.1g/mLNaOHB液:0.01g/mLCuSO4甲液:0.1g/mLNaOH乙液:0.05g/mLCuSO4紫色物质生成砖红色沉淀先加A液,再加B液,不需加热甲液与乙液先混再用,且现配现用,需加热蛋白质还原性糖试剂组成检验结果试剂用法检测对象双缩脲试剂斐林试剂斐林试剂与双缩脲试剂的不同点斐林试剂与双缩脲试剂都由NaOH和CuSO4组成,但二者有如下3点不同:a.溶液浓度不同、斐林试剂中NaOH的浓度为0.1g/mL,CuSO4的浓度为0.05g/mL;双缩脲试剂中NaOH的浓度为0.1g/mL,CuSO4的浓度为0.01g/mL。b.使用原理不同。斐林试剂实质是新配制的Cu(OH)2溶液;双缩脲试剂实质是在碱性环境下的Cu2+。c.使用方法不同。斐林试剂使用时,先把NaOH溶液和CuSO4溶液混合,而后立即使用。双缩脲试剂使用时,先加入NaOH溶液,然后再加入CuSO4溶液。1.在下列四支试管中分别加入一些物质,甲试管:豆浆;乙试管:氨基酸溶液;丙试管:牛奶和蛋白酶;丁试管:人血液中的红细胞和蒸馏水.上述四支试管中加入双缩脲试剂振荡后,有紫色反应的是()A.甲、丁B.甲、乙、丁C.甲、乙、丙D.甲、丙
对应训练D2.下列关于实验操作步骤的叙述中,正确的是
A.用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液,可直接用于蛋白质的鉴定
B.脂肪的鉴定需要用显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪滴
C.鉴定可溶性还原糖时,要加入斐林试剂甲液摇匀后,再加入乙液
D.用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂A液与B液要混合均匀后,再加入含样品的试管中,且必须现配现用()B3.甘薯和马铃薯都富含淀粉,但甘薯吃起来比马铃薯甜,为探究其原因,某兴趣小组以甘薯和马铃薯块茎为材料,在不同温度、其他条件相同的情况下处理30min后,测定还原糖含量,结果表明马铃薯不含还原糖,甘薯的还原糖含量见下表:
处理温度(℃)010203040甘薯还原糖含量(mg/g)22.123.325.837.640.5
处理温度(℃)5060708090甘薯还原糖含量(mg/g)47.454.768.945.328.6实验步骤:
第一步:取A、B两支试管,在A管中加入甘薯
提取液,B管中加入等量的马铃薯提取液。
第二步:70℃水浴保温5min后,在A、B两支试
管中各加入_____________,
第三步:70℃水浴保温5min后,在A、B两支试管
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