土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课件-高二下学期生物人教版选修1

课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数专题二微生物的培养与应用1.掌握对土样的选取和选择培养基的配制2.尝试对分解尿素的细菌的计数学习目标学生自学（5分钟）自学课本P23-P26上半部分，思考这部分讲了哪些知识点，哪些是重点，并标出疑惑自学指导一（4分钟）根据P23-P24完成下列问题：1、实验设计的内容包括哪些？2、根据图示2－7分析实验流程。3、为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度？4、举例说出培养不同微生物往往需要不同培养温度。5、菌落的特征是什么？6、土壤微生物种类最多、数量最大的原因是什么？

实验的具体操作

㈠.土壤取样

从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层土3cm左右，再取样，将样品装入事先准备好的信封中。◆取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。㈡.制备培养基：制备以尿素为唯一氮源的选择培养基。◆应在火焰旁称取土壤10g。◆在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁进行（三）样品的稀释㈣.取样涂布◆实验时要对培养皿作好标记。注明培养基类型、培养时间、稀释度、培养物等。分离不同的微生物采用不同的稀释度稀释倍数目的细菌104、105、106保证获得菌落数在30～300之间、适于计数的平板放线菌103、104、105真菌102、103、104原因：不同微生物在土壤中含量不同㈤.微生物的培养与观察在菌落计数时，每隔24h统计一次菌落数目。选取菌落数目稳定时的记录作为结果，以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。

培养不同微生物往往需要不同培养温度。细菌：30～37℃培养1～2d放线菌：25～28℃培养5～7d霉菌：25～28℃的温度下培养3～4d。思考：要将哪些培养皿进行培养？◆如果得到了2个或2个以上菌落数目在30——300的平板，则说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数，如果同一稀释倍数的三个重复的菌落数相差较大，表明试验不精确，需要重新实验。

关注菌落的形态、大小、边缘、突起、颜色、质地等等，都是区分细菌的重要手段。

关注菌落的形态、大小、边缘、突起、颜色、质地等等，都是区分细菌的重要手段。

关注菌落的形态、大小、边缘、突起、颜色、质地等等，都是区分细菌的重要手段。微生物的培养与观察自学指导二（3分钟）根据P25中间部分解决下列问题1.无菌操作需要注意哪几点？2.做标记前应该做好哪些工作？3.实验中第一天和第二天可以分开做什么？操作提示

无菌操作

做好标记

规划时间

〖思考〗在研究未知微生物时务必规范操作，以防被

致病微生物

感染，实验后一定要洗手。[一]无菌操作

1.取土用的小铁铲的盛土样的信封在使用前都需要灭菌。

2.应在火焰旁称取土壤。在火焰附近将称好的土样倒入锥形瓶中，塞好棉塞。

3.在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁操作。[二]做好标记注明培养基种类、培养日期、平板培养样品的稀释度等。[三]制订计划根据P25下半部分至P26解决下列问题1、鉴定菌种可以采用什么方法？2、什么物质能够分解尿素？分解成了什么物质？3、我们可以通过判断什么来判断化学反应是否发生？自学指导三（3分钟）

结果分析与评价1.通过对照实验，若培养物有杂菌污染，菌落数偏高；若培养物混入其他氮源，则菌落形态多样，菌落数偏高，难以选择出分解尿素的微生物。2.提示：选择每个平板上长有30—300个菌落的稀释倍计算每克样品的菌数最合适。同一稀释倍数的三个重复的菌落数不能相差悬殊，如相差较大，表示实验不精确。课外延伸在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。培养某种细菌后，如果PH升高，指示剂将变红，说明该细菌能够分解尿素。测定饮水中大肠杆菌数量的方法是将一定体积的水用细菌过滤器过滤后，将滤膜放到伊红美蓝培养基上培养，大肠杆菌菌落呈现4黑紫色，通过记述得出水样中大肠杆菌的数量。大肠杆菌呈黑色中心,有或无金属光泽大肠杆菌在伊红美蓝琼脂(EMB)上典型特征

小结:1.对细菌群体生长规律测定的正确的表述是（）

A.在液体培养基上进行B.至少接种一种细菌

C.接种一个细菌D.及时补充消耗的营养物质2.使用选择培养基的目的是（

）

A.培养细菌

B.培养真菌

C.使需要的微生物大量繁殖

D.表现某微生物的特定性状与其他微生物加以区别3.能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分别是()A.CO2和N2B.葡萄糖和NH3

C.CO2和尿素D.葡萄糖和尿素当堂训练A

CD4.下列说法不正确的是（）

A.科学家从70－80度热泉中分离到耐高温的TaqDNA聚合酶

B.统计某一稀释度的5个平板的菌落数依次为M1、M2、M3、M4、M5，以M3作为该样品菌落数的估计值

C.设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度

D.同其他生