合成抗菌药分析

合成抗菌药分析第1页，共72页，2023年，2月20日，星期三第一节喹喏酮类药物的分析一、化学结构与性质R1OCOOH12345678NR2R3R4R5X第2页，共72页，2023年，2月20日，星期三基本结构:4-喹诺酮3位COOH和4位C=O为活性必需在C6、N1、C7、C8引入不同的基团→改变抗菌谱、抗菌活性、脂溶性、光敏反应→形成各具特点的喹诺酮类药物。R1OCOOH12345678NR2R3R4R5X第3页，共72页，2023年，2月20日，星期三【发展概况与分代】

分代代表药

第一代(1962-1969)

萘啶酸(nalidixicacid)第二代(1969-1979)

吡哌酸(pipemidicacid,PPA）第三代(1980-1996)

诺氟沙星(norfloxacin)

(氟喹诺酮类)

第四代(1997-)

莫西沙星(moxifloxacin)

(新型氟喹诺酮类)第4页，共72页，2023年，2月20日，星期三

萘啶酸第一代喹诺酮类抗菌药第5页，共72页，2023年，2月20日，星期三

吡哌酸第二代喹诺酮类抗菌药第6页，共72页，2023年，2月20日，星期三第三代喹诺酮类抗菌药氟喹诺酮类6位引入氟原子，7位引入哌嗪基诺氟沙星第7页，共72页，2023年，2月20日，星期三常用氟喹诺酮类药物诺氟沙星(norfloxacin)环丙沙星(ciprofloxacin)氧氟沙星(ofloxacin)左氧氟沙星(levofloxacin)洛美沙星(lomefloxacin)氟罗沙星(fleroxacin)司氟沙星(sparfloxacin)培氟沙星(pefloxacin)依诺沙星(enoxacin)莫西沙星(moxifloxacin)吉米沙星(gemifloxacin)加替沙星（gatifloxacin）（后三种为第四代）第8页，共72页，2023年，2月20日，星期三理化性质外观性状：类白色或淡黄色结晶溶解性：在水及乙醇中的溶解度小，在酸性和碱性水溶液有一定的溶解度。如诺氟沙星25oC时在水中的溶解度约为0.027%，乙醇中的溶解度约0.076%。成盐后在水中溶解:如盐酸环丙沙星在水中溶解，在甲醇中微溶，在乙醇中极微溶解，在三氯甲烷中几乎不溶。第9页，共72页，2023年，2月20日，星期三酸碱两性:

含有羧基和碱性氮原子，故显酸碱两性，易溶于酸和碱R1OCOOH12345678NR2R3R4R5X第10页，共72页，2023年，2月20日，星期三紫外吸收光谱特征：分子结构中具有共轭系统，在紫外区有特征吸收，利用此性质可进行鉴别或含量测定。1.0A0.0200350l/nm诺氟沙星片紫外吸收光谱第11页，共72页，2023年，2月20日，星期三旋光性：左氧氟沙星具有旋光性，氧氟沙星、环丙沙星等无旋光性。分解反应：遇光照可分解，使用前后均应注意避光。第12页，共72页，2023年，2月20日，星期三离子络合反应:

极易和金属离子如钙、镁、铁、锌等形成螯合物:3,4-位羧基和羰基R1OCOOH12345678NR2R3R4R5X第13页，共72页，2023年，2月20日，星期三二、鉴别试验（1）与丙二酸的反应（反应机制尚未清楚）喹诺酮类药物为叔胺化合物，与丙二酸在酸酐中共热时，有棕色、红色、紫色或蓝色呈现。R1OCOOH12345678NR2R3R4R5X第14页，共72页，2023年，2月20日，星期三示例:

ChP2010诺氟沙星乳膏的鉴别

【鉴别】取含量测定相下供试品溶液5ml，置水浴上蒸干，残渣中甲丙二酸约50mg与酸酐1ml,在水浴中加热约10分钟，溶液显红棕色。第15页，共72页，2023年，2月20日，星期三（2）紫外-可见分光光度法ChP2010利用紫外-可见分光光度法对多种喹诺酮类药物进行鉴别1.0A0.0200350l/nm诺氟沙星片紫外吸收光谱第16页，共72页，2023年，2月20日，星期三示例:

ChP2010左氧氟沙星的UV鉴别

【鉴别】取供试品适量,加0.1mol/L盐酸溶液溶解并稀释制成每1ml中约含5mg的溶液,在226nm与294nm的波长处有最大吸收,在263nm的波长处有最小吸收。第17页，共72页，2023年，2月20日，星期三（3）薄层色谱法ChP2010对氧氟沙星、诺氟沙星和氟罗沙星用本法鉴别.系统适用性实验:斑点的检测灵敏度、比移值(Rf)和分离效能。第18页，共72页，2023年，2月20日，星期三xxx对照品供试品混合对照品第19页，共72页，2023年，2月20日，星期三(4)高效液相色谱法含量测定项下供试品主峰应与相应对照品主峰的保留时间一致。对照品供试品对照品第20页，共72页，2023年，2月20日，星期三（5）红外光谱法

用本法鉴别药物时，中国药典要求按指定条件绘制供试品的红外光吸收图谱，与《药品红外光谱集》中的相应标准图谱对比，如果峰位、峰形、相对强度都一致时，即为同一种药物。第21页，共72页，2023年，2月20日，星期三诺氟沙星红外光谱图第22页，共72页，2023年，2月20日，星期三2400～2100

1900～1650

1670～1500

C三C

乙炔基C＝O羰基C＝C苯环C三N

腈基1300～1000

1000～650

C-O醚＝CH苯(单取代)

酯第23页，共72页，2023年，2月20日，星期三三、特殊杂质检查有关物质:工艺杂质、降解产物ChP2010检查喹诺酮类药物有关物质主要采用HPLC法（一般了解）第24页，共72页，2023年，2月20日，星期三判断：供试品溶液色谱图中右氧氟沙星

峰面积不得大于对照溶液主峰面积(1.0%)。左氧氟沙星中的光学异构体分离图谱1.右氧氟沙星；2.左氧氟沙星配合交换手性流动相法第25页，共72页，2023年，2月20日，星期三四、含量测定非水溶液滴定法紫外分光光度法高效液相色谱法第26页，共72页，2023年，2月20日，星期三（1）非水溶液滴定法ChP2010吡哌酸的非水溶液滴定测定

【含量测定】取供试品约0.2g，精密称定，加冰醋酸20ml溶解后，加结晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液显纯蓝色，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于30.33mg的C14H17N5O3。第27页，共72页，2023年，2月20日，星期三（2）紫外分光光度法ChP2010诺氟沙星乳膏含量的UV测定。【含量测定】精密称取供试品适量(约相当于诺氟沙星5mg)，置分液漏斗中，加三氯甲烷15ml，振摇，用氯化钠饱和的0.1%NaOH溶液25、20、20和10ml分次提取，合并提取液，置100ml量瓶中，加0.1%NaOH溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，用0.4%NaOH溶液稀释制成每1ml中约含5μg的溶液，在273nm波长处测定A；另取诺氟沙星对照品适量，精密称定，加0.4%NaOH溶液溶解并定量稀释制成每1ml约含5μg的溶液，同法测定，计算，即得。第28页，共72页，2023年，2月20日，星期三（3）高效液相色谱法盐酸洛美沙星含量的戊烷磺酸钠离子对HPLC测定左氧氟沙星的高氯酸钠离子对HPLC测定第29页，共72页，2023年，2月20日，星期三第二节磺胺类药物分析治疗细菌感染性疾病的化学合成药物

磺胺类药物的发现，开创了化学治疗的新纪元–使死亡率很高的细菌性传染疾病得到控制.第30页，共72页，2023年，2月20日，星期三(1)基本结构——苯对氨基磺酰胺芳伯氨基磺酰胺基一、化学结构与性质第31页，共72页，2023年，2月20日，星期三磺胺嘧啶（SD）嘧啶环较活泼第32页，共72页，2023年，2月20日，星期三磺胺甲噁唑（SMZ）5-甲基异噁唑较活泼第33页，共72页，2023年，2月20日，星期三(2)理化性质性状本类药物多为白色或类白色结晶性粉末,在水中几乎不溶,溶于盐酸或氢氧化钠溶液,易溶于乙醇、丙酮，具有一定的熔点。第34页，共72页，2023年，2月20日，星期三例：磺胺嘧啶的性状规定：磺胺嘧啶为白色或类白色结晶或粉末；无臭，无味；遇光色渐变暗。在乙醇或丙酮中微溶，在水中几乎不溶；在氢氧化钠试液或氨试液中易溶，在稀盐酸中溶解。第35页，共72页，2023年，2月20日，星期三（2）熔融变色不少磺胺类药物以直火加热熔融后，可呈现不同的颜色，产生不同的分解产物。如磺胺可显紫蓝色，磺胺嘧啶显红棕色等。第36页，共72页，2023年，2月20日，星期三3.具有酸碱两性碱性酸性pKa:7~8第37页，共72页，2023年，2月20日，星期三4.芳伯胺基反应重氮化-偶合反应氧化反应第38页，共72页，2023年，2月20日，星期三5.磺酰氨基的反应沉淀反应第39页，共72页，2023年，2月20日，星期三6

.苯环上的反应卤代反应第40页，共72页，2023年，2月20日，星期三含氮杂环具有较强的紫外吸收和红外吸收特征在酸性条件下，还可与生物碱沉淀剂发生沉淀反应7.取代杂环的特性第41页，共72页，2023年，2月20日，星期三1、金属离子的取代反应与硫酸铜的成盐反应活泼HOH-↓草绿噁磺胺嘧啶↓黄绿→↓紫色二、鉴别试验第42页，共72页，2023年，2月20日，星期三ChP磺胺甲噁唑与铜盐反应的鉴别ChP磺胺异噁唑与铜盐反应的鉴别第43页，共72页，2023年，2月20日，星期三2、重氮化—偶合反应芳伯氨基噁偶氮化合物~猩红色橙黄色β-萘酚第44页，共72页，2023年，2月20日，星期三ChP2010规定芳香胺类的反应条件第45页，共72页，2023年，2月20日，星期三3.钠盐反应4.高效液相色谱法第46页，共72页，2023年，2月20日，星期三5.红外分光光度法磺胺类药物具有相近的基本母核，其红外光谱特征吸收峰特别相似红外吸收谱图中的特征吸收峰

γ/cm-1

3300～3500氨基

1610,1570,1480,1440苯环

1650～1600氨基

1350,1150磺酰基第47页，共72页，2023年，2月20日，星期三磺胺甲噁唑的红外吸收图谱第48页，共72页，2023年，2月20日，星期三磺胺甲噁唑红外吸收光谱鉴别本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集565图）一致。具体操作：波数400cm-1开始，逐个查看供试品图谱与对照图谱吸收峰位，峰形，强弱，相对大小是否一致。400cm-1~2000cm-1，波数读数误差允许在±10cm-1

，2000cm-1~4000cm-1，波数读数误差允许在±20cm-1

，在400cm-1~2000cm-1

由于峰较多，所以误差不能太大。第49页，共72页，2023年，2月20日，星期三一般杂质：氯化物、炽灼残渣、重金属。酸度溶液的澄清度与颜色三、杂质检查第50页，共72页，2023年，2月20日，星期三酸度查什么？制备中的酸性中间体及副产物方法酸碱滴定，灵敏度法第51页，共72页，2023年，2月20日，星期三碱性溶液的澄清度与颜色查什么？不溶于碱性溶液的杂质和有色杂质方法比色、比浊方法依据溶解性质差异第52页，共72页，2023年，2月20日，星期三2.特殊杂质的检查（有关物质）TLC法（一般了解）复方磺胺甲噁唑注射液中磺胺、对氨基苯磺酸和甲氧苄啶降解产物的TLC检查第53页，共72页，2023年，2月20日，星期三四、含量测定高效液相色谱法滴定法：非水溶液滴定法、永停滴定法、沉淀滴定法第54页，共72页，2023年，2月20日，星期三高效液相色谱法ChP复方磺胺嘧啶片含量的HPLC测定色谱条件与系统适用性试验第55页，共72页，2023年，2月20日，星期三

ChP2010规定磺胺嘧啶钠、磺胺嘧啶锌、磺胺甲噁唑、磺胺多辛和磺胺醋酰钠等原料药和制剂、磺胺嘧啶原料药采用永停滴定法。2.永停滴定法第56页，共72页，2023年，2月20日，星期三【含量测定】精密称定磺胺多辛约0.6g，置烧杯中，加水40ml与盐酸溶液(1→2)15ml，置电磁搅拌器上，搅拌使溶解，再加溴化钾2g，插入铂-铂电极后，将滴定管的尖端插入液面下约2/3处，用亚硝酸钠滴定液(0.1mol/L)迅速滴定，随滴随搅拌，至近终点时，将滴定管的尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，洗液并入溶液中，继续缓缓滴定，至电流计指针突然偏转，并不再回复，即为滴定终点。每1ml亚硝酸钠滴定液(0.1mol/L)相当于31.03mg的C12H14N4O4S。磺胺多辛第57页，共72页，2023年，2月20日，星期三3.非水溶液滴定法磺胺异噁唑原料药及片剂的非水溶液滴定法第58页，共72页，2023年，2月20日，星期三磺胺异噁唑片【含量测定】取磺胺异噁唑片20片，精密称定，研细，精密称取细粉适量(约相当于磺胺异噁唑0.5g)，加二甲基甲酰胺40ml使溶解，加偶氮紫指示液3滴，用甲醇钠滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液恰显蓝色，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml甲醇钠滴定液(0.1mol/L)相当于26.73mg的C11H13N3O3S。第59页，共72页，2023年，2月20日，星期三第三节体内合成抗菌药物分析一、水产品中残留喹诺酮和磺胺类药物的检查（一般了解）第60页，共72页，2023年，2月20日，星期三水产品中残留喹诺酮和磺胺类药物的检查提取方法净化方法第61页，共72页，2023年，2月20日，星期三二、左氧氟沙星的血浆浓度测定第62页，共72页，2023年，2月20日，星期三一、典型药物的结构二、鉴别：硫酸铜（黄绿-紫）；芳香第一胺（猩红）三、化学性质：酸碱两性、取代杂环的特性四、含量测定：第63页，共72页，2023年，2月20日，星期三具有丙二酸呈色反应的药物是：诺氟沙星磺胺嘧啶磺胺甲恶唑司可巴比妥盐酸氯丙嗪第64页，共72页，2023年，2月20日，星期三ChP2010氧氟沙星中“有关物质”的检查方法是：紫外分光光度法薄层色谱法高效液