罗替戈汀微球制备及质量评定

2014~2015学年第二学期《工业药剂》实验设计罗替戈汀微球的制备及质量评定学校：安徽中医药大学学院：药学院班级：12药剂2班姓名：学号：2015年6月一、研究背景随着我国人口老龄化的发展趋势，一些老龄化类的疾病困扰着老龄人口的健康，帕金森病是其中典型的一种。帕金森病（Parkinson’sdisease，PD）是一种常见的神经系统变性疾病，老年人多见，平均发病年龄为60岁左右，40岁以下起病的青年帕金森病较少见。我国65岁以上人群PD的患病率大约是1.7%。大部分帕金森病患者为散发病例，仅有不到10%的患者有家族史。帕金森病最主要的病理改变是中脑黑质多巴胺（dopamine,DA）能神经元的变性死亡，由此而引起纹状体DA含量显著性减少而致病。导致这一病理改变的确切病因目前仍不清楚，遗传因素、环境因素、年龄老化、氧化应激等均可能参与PD多巴胺能神经元的变性死亡过程，罗替戈汀对帕金森病有一定的治疗效果。二、立题依据1、理化性质：NRotigotine结构式N罗替戈汀的中文化学名称：（-）-（S）-2-[N-丙基-N-[2-（2-噻吩）乙基]氨基]-5-羟基-1,2,3,4-四氢萘盐盐酸。分子式C19H26ClNOS，分子量为351.91。具有还原性，弱碱性，不稳定性，较高的脂溶性。2、药理性质:罗替戈汀是一种非麦角类多巴胺受体激动剂，通过激动D3/D2/D1而产生抗帕金森作用。由于具有明显的肝首过效应，口服生物利用度很低，国外上市的罗替戈汀贴片存在患者敷贴不便、个体透皮吸收差异大等问题，因而需要开发一种罗替戈汀缓控释制剂，以平衡血药浓度及提高患者依从性。本研究旨在将罗替戈汀包埋于聚乳酸-羟基乙酸共聚物中构建罗替戈汀微球长效释药系统，经肌肉注

射给药，持续缓慢释药实现持续多巴胺能刺激治疗PD。3、罗替戈汀的微球剂目前根据能刺激治疗理念（CDS）治疗理论已研发的产品有左旋多巴泵和罗替戈汀贴片，尽管这些方式可以有效降低由左旋多巴胺诱导的运动并发症，但是这些方式或操作困难，易产生并发症，因此需要研究开发一种临床效果好、患者依从性高的CDS治疗方式，本实验为罗替戈汀的微球剂的剂型设计。三、罗替戈汀微球剂的处方设计0.5%聚乙烯醇溶液7.5mL水相罗替戈汀0.5g乳酸羟基乙酸共聚物（PLGA）0.1g油相0.5%聚乙烯醇溶液7.5mL水相罗替戈汀0.5g乳酸羟基乙酸共聚物（PLGA）0.1g油相4.0mL二氯甲烷4.0mL说明：0.5%聚乙烯醇为水相中的乳化剂；罗替戈汀为主药，PLGA为成微球材料，二氯甲烷为油相溶剂。四、罗替戈汀的微球制备1、仪器和材料仪器：高剪切均质乳化机，冷冻干燥机，质谱仪，高效液相色谱仪，激光粒度仪，扫描电子显微镜。材料：罗替戈汀原料药，乳酸羟基乙酸共聚物（PLGA），聚乙烯醇（PEG），乙2、制备方法:采用乳化一溶剂挥发法制备罗替戈汀微球：（1）乳化配制0.5%PEG溶液7.5mL为水相，将原料药0.5g与PLGA0.1g,溶解于4.0mL二氯甲烷中配制油相，在高速剪切条件下，将油相加入到水相中，得到O/W型乳液。（2）溶剂挥发在低速搅拌条件下挥发有机溶剂，搅拌5h。（3）洗涤将所得混悬液过滤收集微球，并以纯化水清洗微球3〜5次。（4）干燥真空冷冻干燥机中冻干即可。3、实验流程图:水相：0.5%PEG溶液高速剪切条件，油相加入水相-O/W型乳剂油相：罗替戈汀原料药，PLGA溶剂为二氯甲烷五、罗替戈汀微球的质量评价1、粒度及粒度分度采用激光粒度仪测定微球粒径。取120mL0.1%聚山梨酯-20溶液置于粒度仪的样品分散装置中，调节转速为2200r/min进行搅拌。首先测定分散剂背景，然后取微球样品约100mg，倒入其中，待样品分散均匀后，测其粒径。每个样品平行测定3次，结果取平均值。2、形态学研究将微球样品用双面胶固定于平板上，在真空条件下进行喷金，然后扫描电子显微镜观察微球表面特征，并记录。3、载药量及包封率测定精密称取微球样品20mg，置于250mL容量瓶中，用10mL乙腊溶解后，以0.01mol/L盐酸溶解稀释至刻度，摇匀，0.45pm微孔滤膜过滤，续滤液按如下HPLC色谱条件测定含量：色谱柱为DiscoveryC18，流动相为乙腊-0.3%磷酸水（34：66）；流速为1.0mL/min；检测波长为223nm；柱温为35°C；进样量为20ML。根据HPLC色谱图的数据处理，可由如下方法计算：载药量=（微球中药物重量/微球总重量）X100%包封率=（微球实际载药量/理论投料量）X100%4、药物的释放速率精密称取微球样品置20mL带塞离心管中，加入pH7.4磷酸盐缓冲液释放介质9mL，涡旋1min后，放入37.5C的恒温水浴振荡器中，以50r/min的转速振荡。分别于3,6h和1，2,4,6,8,10，12,14,16,18d取出离心管，在5〜8C条件下，3600r/min离心15min。待离心结束后，吸取上清液6mL作为供试品溶液，同时补充等温的释放介质6mL,涡旋1min后放回水浴振荡器中振荡。按照HPLC条件测定供试品溶液溶度，计算累积释放量。5、有机溶剂残留量取二氯甲烷标准溶液和供试品溶液，分别连续进样3次，每次2ml,测得相应的