DB32T 3489-2018玉米粗缩病人工接种鉴定技术与抗性评价规程

ICS65.020B16备案号：江DB32苏省地方标准DBT3489—2018价Technicalregulationforevaluatingmaizevarietiesresistancetomaizeroughdwarfsebyartificialinoculation江苏省质量技术监督局发布IDB32/T3489—2018前言本标准按GB/T1.1—2014《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》编制。本标准由江苏省农业科学院提出并归口。本标准起草单位：江苏省农业科学院。本标准起草人：周彤、杜琳琳、周益军、程兆榜、兰莹、孙枫。1DB32/T3489—2018玉米粗缩病人工接种鉴定技术与抗性评价规程1范围本标准规定了玉米品种粗缩病(病原：水稻黑条矮缩病毒Riceblack-streakeddwarfvirus)抗性人工接种鉴定的有关定义、技术规范及抗性评价标准。本标准适用于省级玉米品种试验，品种抗病性比较试验、主导品种的抗病性监测等均可参照执行。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的的修改单)适用于本文件。NY/T1209-2006农作物品种试验技术规程玉米NY/T2955-2016水稻品种试验水稻黑条矮缩病抗性鉴定与评价技术规程3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1病株infectedplants发生玉米粗缩病症状的玉米植株(病株标准见6.2)。4接种用灰飞虱的准备4.1灰飞虱的来源田间采集灰飞虱若虫或成虫。4.2饲养灰飞虱的基本条件可调控温、光的养虫室(光照每天12h，温度控制在25℃±2℃范围内)、玻璃杯、尼龙纱布(网眼规格1mm)、养虫架、适宜灰飞虱繁殖的水稻种子；转移灰飞虱用黑布、毛笔、吸虫管等。4.3灰飞虱群体的饲养选取饲喂灰飞虱的水稻种子(宜选用武育粳3号)用水浸种24h后，纱布覆盖25℃±2℃催芽24h，选取发芽良好的种子25粒~30粒均匀播于盛有自然肥力土壤的玻璃杯(内径为60mm~200mm)中；大约6d~7d后，待苗长至一叶一心期时，将待产的单头灰飞虱移入杯中进行饲养，约3d后待灰飞虱产卵完毕将成虫移出，7d~10d后开始孵化出1龄若虫备用。4.4饲毒方法2DB32/T3489—2018RT-PCR鉴定为携带水稻黑条矮缩病毒的小麦、水稻或玉米病株栽种于5000mL烧杯中(RT-PCR方法按照NY/T2955-2016附录B执行)，土面覆盖滤纸，将4.3繁育的适量1龄~2龄灰飞虱移入其中,并用纱布封口。饲毒2d后将虫移入预先育有武育粳3号秧苗的1000mL烧杯中饲养，循回11d~13d后，每批随机取出100头以上灰飞虱，按照NY/T2955-2016附录A的要求检测灰飞虱群体带毒情况，计算灰飞虱群体带毒率，备用。5接种5.1育苗方法参鉴品种(含试验预设对照，宜采用玉米品种郑丹958为感病对照)经浸种、催芽；选取50粒左右发芽良好的种子，均匀播于盛有自然肥力土壤的内径为120mm~150mm玻璃杯中。5.2接虫数量选取处于3龄~5龄的获毒灰飞虱群体，按公式(1)计算接种数量：IVS=NPVS ()1式中:IVS—单株有效接种虫量，单位为头每株(头/株)；N—单株接种灰飞虱数量，单位为头每株(头/株)；PVS—灰飞虱带毒率。按照4.4中灰飞虱群体带毒率，计算每株接虫数量，使IVS值控制在3头/株。5.3接种条件于玉米苗二叶一心期选择长势一致的30株苗用于接种(去除其它苗)。接种时间为1d~2d，接种温度25℃±2℃，每天上午和下午各赶虫一次，使灰飞虱分布均匀。接种后赶出灰飞虱并喷施杀虫剂，保证玉米苗上的灰飞虱全部扑杀，喷药后1d再将接种过的玉米苗移栽，15℃~30℃条件下培育。5.4重复重复三次。6调查6.1调查时间在玉米吐丝抽穗期调查玉米病株数。6.2调查标准玉米粗缩病发病症状：植株叶色浓绿、节间缩短，植株矮化，高度常不及健株的一半；叶片变宽变厚，叶片背面出现纵向蜡滴状白色突起；植株根系少而短；雄穗不能抽出或无花粉、雌穗畸形不实或籽粒减少。依据症状有无按附录A记录发病株数量。6.3发病率计算参照公式(2)方法计算发病率。若出现感病对照品种的发病率小于50％，则应分析原因，并重新进行试验。发病率Ri表示，数值以%计，按公式(2)计算：3DB32/T3489—2018Ri=ni100%nt ()2式中:Ri—发病率；ni—病株数；nt—总株数。计算结果精确到小数点后一位。7抗性评价7.1抗性分级标准根据发病率进行抗性评价，各级别评定标准遵照附录B(参照NY/T1209-2006农作物品种试验技术规程玉米)。7.2抗性评定当品种抗性在不同批次间鉴定结果表现不一致时，以发病最重的结果为准。4DB32/T3489—2018附录A(规范性附录)玉米粗缩病品种抗性调查记载表玉米粗缩病品种抗性调查记载表见表A.1。表A.1玉米粗缩病品种抗性调查记载表播种日期调查日期调查人记载人品种编号总株数病株数发病率…感病对照5DB32/T3489—2018附录B(规范性附录)玉米粗缩病品种抗性评