中山大学人类染色质标本的制备与观察报告

O二一年七月二十九日O二一年七月二十九日X时间：二时间：二O二一年七月二十九日张皓予15335203一、试验目的把握人体口腔黏膜上皮细胞制备的方法。正确识别巴氏小体的特征及其所在位置。说明人体细胞中核内X染色体的数目和性染色体数目之间存在的关系。二、试验原理X染色质呈现于女性体细胞间期细胞核内。在口腔黏膜细胞、羊水脱落细胞、皮肤结缔组织等细胞中均可检出。用苯酚品红改进染液染色后，即可观看到染色较浓，多位于核膜内侧缘，1μm40%~60%。Barr和Bertram〔1949〕在雌性猫的神经细胞核中觉察，在多数核中部有一个小的深染的小体，而在雄性猫的同样细胞中只能偶而观看到这种小体，此后很多人的争论指出这种与性别有关的两型现象在有袋类、偶蹄类、食肉类和灵长类等动物的多数组织细胞中存在，而在噬齿类中只在少数组织中可以观看到。这种染色质小表达在称为“性染色质”(sexchromatin)，或称为“巴氏小体”(Barrbody)。这种小体常位于核膜的内概况，呈Feulgen阳性反响，标明是DNA质的存在是由于在雌性哺乳动物核中存在两个X个XX则上男性不该有性染色质。但假设一个男人有XXY会有一共性染色质，虽然表示为男性。同样，XXX个巴氏小体。因此，性染色质实质上是一个失活的X什么失活的X染色体会以巴氏小体的形式显示出来?目前，已有很多证据证明，在雌性个体中那根失活的X染色体已经异染质化，成为功能性异染质。使用放射自显影的方法已经证明，失活的X染色体的固缩周期与其它染色体是分歧步的，它在S的。此外，人们也已觉察，晚复制的这根X沿，这个位置也正好是巴氏小体消灭的位置。三、试验仪器与试剂显微镜，水浴锅，牙签，载玻片，盖玻片，镊子，吸水纸。95%乙醇，1mol/L四、试验资料男性和女性人体口腔黏膜细胞。五、试验步调受检者用水漱口，用牙签刮取受检者口腔颊部黏膜，把第一次刮取物弃去，然后再次用牙签刮取黏膜，将其次次刮取物均匀涂布到干净的载玻片上，晾干。9520min，取出晾干。1MHCl3720min，取出后自来水缓缓冲洗。8min，不枯燥，轻轻盖上盖玻片，用吸水纸盖住轻轻压片。镜检，从低倍镜到高倍镜依次观看。六、试验结果1、2、3女性口腔上皮细胞被染色的细胞核与巴氏小体〔箭头〕41、23角的有一不明显的深色斑块，可能是巴氏小体。4氏小体。50个女性细胞有21个有42%；500七、争论1、镜检时觉察女性上皮细胞标本中的细胞数较少，密度低较分散〔图3比照图4〕。可能是由于涂片时不敷均匀，大局部涂在玻片边沿导致在后续固定、冲洗、染色、压片等步调时有细胞流失。也有可能是染色时间不敷或者刮取细胞时刮得太少所致。2、观看觉察女性上皮细胞当中的巴氏小体形态多有些模糊，且染色较浅，可能是由于染色时间较短导致。本试验染色时间为8min，后续试验可以适当延长染色时间〔>10min〕以使试验效果更加明显。八、思考题1、男性没有巴氏小体的理论根底为维持雌雄两性生物基因表达全都，细胞中存在一种剂量抵偿效应，使细胞中只含有一份有活性的X染色体，而多余的染色体失活形成巴氏小体，雌性的两个X染色体所携带的两份基因的遗传效应即可与雄性一个X染色体所具有的一份基因的遗传效应基内幕当。而由于男性自己就只有一条X染色体，所以不需要使多出的X2、男变女的变性手术后，该女性有无巴氏小体？没有，由于变性手术只是转变了个体的外在表型如个别器官的外形和功能等，不克不及转变其细胞内染色体的构成，故该个体仍只有一条X3、鉴定巴氏小体有什么临床意义？巴氏小体的临床意义在于能够用来鉴别性别。例如可以通过对胎儿羊水中取得的脱落的细胞的检查推断性别，如有巴氏小体，胎儿为女性，假设细胞中无巴氏小体，胎儿为男性。原男性变性运发动介入女子工程，可通过检查其白细胞中有无巴氏小体而确定其性别。通过巴氏小体检查可确定胎儿性别和查出性染色体特别的患时间：二O二一年七月二十九日者，如克氏〔Klinefelter′s〕综合征患者外貌为男性，但有一个巴氏小体，可判定患者的核型是