微生物的培养技术及应用第2课时课件 【知识精讲精研+能力拓展提升】 高二下学期生物人教版选择性必修3

第1章

发酵工程第2节

微生物的培养技术及应用第2课时

微生物的纯培养传统发酵通常直接利用原材料中天然酵母菌工业生产通常使用人工选育的高活性酿酒酵母如何获得纯种酵母菌？在微生物学中，将接种于培养基内，在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体成为培养物。3、纯培养的步骤包括：配制培养基、灭菌、接种、分离和培养一、微生物的纯培养1、培养物：2、纯培养：由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物，获得纯培养物的过程就是纯培养。4、“平板划线”一、微生物的纯培养（1）原理：通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。经数次划线后培养，可以分离得到单菌落。①灼烧接种环，直至接种环金属丝烧红②在火焰旁冷却接种环，拔出酵母菌培养液试管的棉塞

③试管口通过火焰

④在火焰附近用接种环蘸取一环菌液

⑤试管口通过火焰，并塞上棉塞

⑥将皿盖打开一条缝隙，将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划3-5条平行线，盖上皿盖。注意不要划破培养基⑦灼烧接种环，待其冷却后，从第一次划线的末端开始作第二次划线。重复以上操作，作第三、四、五次划线。注意不要将最后一区的划线与第一区相连4、“平板划线”重复实验：划3个平板空白对照：1个不划线一、微生物的纯培养（2）操作分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体，这就是菌落。菌落特征：大小、形状、隆起程度、颜色等。二、探究·实践

酵母菌的纯培养不同菌落的颜色与形状分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体，这就是菌落。菌落特征：大小、形状、隆起程度、颜色等。功能：鉴定菌种的重要依据获得单菌落的方法：平板划线法、稀释涂布平板法二、探究·实践

酵母菌的纯培养方法步骤1、制备培养基配制培养基称取去皮马铃薯200g，切成小块，加水1000ml，加热煮沸至马铃薯软烂，用纱布过滤。向滤液中加入20g葡萄糖、15-20g琼脂，用蒸馏水定容至1000ml。灭菌将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞，包上牛皮纸，并用皮筋勒紧，再放入高压蒸汽灭菌锅中，在压力为100kPa、温度为121℃的条件下，灭菌15-30min。将5-8套培养皿包成一包，用几层牛皮纸包紧，放入干热灭菌箱内，在160-170℃灭菌2h。倒平板待培养基冷却到50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。二、探究·实践

酵母菌的纯培养1234（1）拔出锥形瓶的棉塞（2）将瓶口迅速通过火焰（3）用拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，将培养基（10-20mL）倒入培养皿，立即盖上皿盖（4）等待培养基冷却凝固后，将培养皿倒转过来放置倒平板的具体步骤二、探究·实践

酵母菌的纯培养1.培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉温度下降到刚刚不烫手即可。2.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？最好不要用这个平板培养微生物。防止空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。将所倒平板放入37℃的恒温箱中培养12h～24h，观察是否有菌落存在以确定是否被污染或灭菌是否彻底。4.怎么确定所倒平板未被杂菌污染？3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？既可以防止培养基表面的水分挥发；又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。思考·讨论2、接种和分离酵母菌通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。经过数次划线后培养可以分离得到单菌落。单个细胞微生物群单个菌落连续划线分散或稀释生长繁殖原理：“平板划线”实验操作连续划线法分区划线法二、探究·实践

酵母菌的纯培养①接种环只蘸一次菌液,但要在培养基不同位置连续划线多次②划线首尾不能相接③每次划线前接种环进行灭菌④划线后，培养皿倒置培养注意：为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？思考：二、探究·实践

酵母菌的纯培养灼烧时期目的取菌种前每次划线前接种结束后杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者杀死上次划线时残留菌种，使下一次划线的菌种直接来源上次划线的末端，从而使每次划线时菌种数目逐渐减少，直至得到单个细胞避免接种环上可能存在的微生物污染菌种二、探究·实践

酵母菌的纯培养三种灼烧的目的不同3、培养酵母菌完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，将接种后的平板和一个未接种的平板倒置，放入28℃左右(培养温度因酵母菌种类的不同而稍有差异)的恒温培养箱中培养24-48h。思考：为什么要同时放入未接种的平板？作对照，该培养皿无菌落说明培养基没有污染二、探究·实践

酵母菌的纯培养1、下列为几位同学描述的平板划线接种法的划线方式，其中正确的是（

）A.B.C.D.C课堂练习2、下列关于倒平板及对菌种纯化的说法，正确的是()A.倒平板时左手将灭过菌的培养皿盖完全打开，右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿(10～20mL)，左手立即盖上培养皿盖B.使用已灭菌的接种环及培养基之后不需要再灭菌C.平板冷凝后要将平板倒置，以防皿盖上的冷凝水流入培养基D.平板划线法是首先进行梯度稀释，然后将稀释的菌种通过接种环在固体培养基上连续划线，从而将聚集的菌种逐渐分散形成单个菌落C课堂练习3、下面是微生物平板划线示意图，划线的顺序为1、2、3、4、5。下列叙述正确的是()A．在五个区域中划线前后都要对接种环和培养基进行灭菌B．划线操作时完全打开皿盖，划完立即盖上以防杂菌污染C．接种时不能划破培养基，否则会影响菌落的分离和观察D．1、5区的划线最终要连接起来，以便比较前后的菌落数C课堂练习酵母菌的纯培养2.接种和分离酵母菌1.制备培养基3.培养酵母菌①配制培养基（马铃薯、葡萄糖、琼脂、水）②灭菌③倒平板（在酒精灯火焰附近操作）培养基：湿热灭菌（高压蒸汽灭菌锅）培养皿：干热灭菌（干热灭菌锅）课堂小结1、下列有关微生物的分离与培养的叙述中，不正确的是()A．获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染B．倒置平板可防止培养皿盖上的冷凝水滴落造成污染C．倒平板时将培养皿的盖拿开，以便于将锥形瓶中的培养基倒入培养皿D．检验培养基是否被杂菌污染的最有效方法是将未接种的培养基放在恒温箱中培养作业2、有关纯化酵母菌实验操作的叙述，错误的是()A.在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来源于菌液B.第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物C.每次划线前，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种D.划线结束后，灼烧接种环能及时杀死接种环上的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者CA3、下列有关细菌培养的叙述，正确的是()A．在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌B．在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长C．向液体培养基中通入氧气能促