抗可抗体普课程

抗可抗体普课程第1页/共72页是以真核细胞的核成分为靶抗原的器官非特异性自身抗体的总称，属自身抗体中的一组抗体。是指抗核酸和核蛋白抗体的总和。靶抗原包括细胞核、细胞质、细胞骨架、细胞分裂周期蛋白等。第2页/共72页二、抗核抗体分类抗DNA抗体：ds-DNA、ss-DNA抗组蛋白抗体：抗组蛋白亚单位H1、H2A、H2B、H3、H4及其复合物抗体。抗DNA组蛋白复合物抗体：狼疮细胞、抗DNP抗体、抗核小体抗体抗ENA抗体：Sm、SSA、SSB

抗非组蛋白抗体抗染色体抗体：

抗着丝点第3页/共72页二、抗核抗体分类5,抗核仁抗体：抗RNA多聚酶Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ、原纤维蛋白、NOR-90和Th/To等抗体。6,抗其他细胞成分抗体：板层素、线粒体、高尔基体、溶酶体、肌动蛋白、波形纤维蛋白、原肌球蛋白、细胞角蛋白、纺缍体、中间体等。第4页/共72页第5页/共72页三、抗核抗体检测方法首选：间接免疫荧光法（IIF）抗原底物片选择：1、HEp-2细胞（人喉癌上皮细胞)2、HeLa细胞（人子宫颈癌细胞）3、Ehrlich（小鼠腹水癌细胞）4、动物器官组织切片第6页/共72页ANA检测方法-IIF法ANA滴度ANA核型第7页/共72页第8页/共72页第9页/共72页第10页/共72页第11页/共72页第12页/共72页第13页/共72页第14页/共72页均质型均质型：分裂间期细胞核质染色均匀一致，分裂期细胞染色质阳性。相关抗体：抗DNP、抗dsDNA、抗核小体抗体、抗组蛋白抗体。第15页/共72页第16页/共72页第17页/共72页第18页/共72页第19页/共72页第20页/共72页第21页/共72页第22页/共72页核仁型：分裂间期细胞核仁着染荧光，分裂期细胞染色质阴性。核仁颗粒型：与抗RNA多聚酶Ⅰ相关核仁均质型：与PM-SCL相关核仁点型（1-2点）：与抗NOR抗体相关核仁

型(N)第23页/共72页第24页/共72页第25页/共72页第26页/共72页第27页/共72页第28页/共72页第29页/共72页第30页/共72页第31页/共72页着丝点型：分裂间期细胞核内均匀散布大小较一致荧光颗粒（40-60），分裂期细胞染色质着丝点密集排列。相关抗体：抗着丝点型抗体第32页/共72页第33页/共72页斑点型：分裂间期细胞核质染色呈斑点状，斑块状，核仁阴性，分裂期细胞染色质阴性。相关抗体：与抗溶性核抗原相关第34页/共72页核膜型：分裂间期细胞荧光染色在核膜周围，分裂

期细胞染色质阴性。相关抗体：抗板层素抗体、gp-210抗体

第35页/共72页第36页/共72页第37页/共72页第38页/共72页第39页/共72页第40页/共72页第41页/共72页第42页/共72页第43页/共72页第44页/共72页第45页/共72页第46页/共72页第47页/共72页第48页/共72页第49页/共72页第50页/共72页第51页/共72页第52页/共72页第53页/共72页五、ANA在各疾病中阳性率

疾病阳性率（%）系统性红斑狼疮（SLE）活动期95-100非活动期80-100药物性狼疮（DLE）95-100混合性结缔组织病（MCTD）95-100系统性硬化（SSc）

70-90干燥综合症（SS）

60-80第54页/共72页五、ANA在各疾病中阳性率

疾病

阳性率（%）多发性肌炎/皮肤炎（PM/DM）

40-60类风湿关节炎（RA）30-50

幼年类风湿关节炎（JRA）20-40慢性活动性肝炎（CAH）10-20重症肌无力（MG）10-20慢性淋巴性甲状腺炎10-20正常人5-10第55页/共72页六、各型ANA临床意义抗DNA抗体1、抗ds-DNA临床意义SLE诊断标准之一活动期SLE阳性率80%-90%,未治疗SLE病人特异性90%，敏感性70%SLE活动指标之一，用于监视SLE病情变化，活动期判断、药物治疗效果观察30%-90%的活动期SLE患者此抗体阳性,且抗体滴度的消长与SLE的活动程度相关，随着疾病活动的控制，抗dsDNA抗体滴度可以下降或消失,可作为治疗监测和预后评价的指标。抗dsDNA抗体与DNA结合成为免疫复合物在肾小球基底膜沉积，或抗dsDNA抗体直接作用于肾小球抗原造成SLE患者的肾损害。抗体高水平伴补体低水平，提示狼疮性肾炎危险性大抗dsDNA抗体阳性的患者较阴性患者发生肾炎的危险性高12倍。第56页/共72页2、抗ss-DNA临床意义对疾病诊断缺乏特异性，SLE阳性率70%以上，DIL：60%-80%，MCTD：20%-50%，PM/DM：40-50%，SSc：14%，SS：13%，RA：8%。非风湿疾病（慢活肝、细菌、病毒感染等）、正常老年人也存在抗ss-DNA一般不用于常规检测第57页/共72页抗组蛋白抗体（AHA）具有H1、H2A、H2B、H3和H4四个亚单位，常以四聚体形式存在,与DNA构成的复合物称为染色质,染色质最基本的单位是核小体(nucleosome).所有组蛋白各成分均可能成为自身抗体的靶抗原.1.SLE的阳性率约30%-80%,并常伴有抗dsDNA抗体阳性,主要以抗H2A、H2A-H2B复合物和抗H1的IgG型抗体为主.2.药物性狼疮的阳性率达95％以上，但不伴有抗dsDNA抗体阳性,主要以抗H2A-H2B为主.常见的药物有肼苯达嗪、异烟肼及氯丙嗪.AHA可以在多种结缔组织病中出现，不具有诊断特异性。第58页/共72页抗DNA组蛋白复和物抗体1、狼疮细胞临床意义LE细胞在活动性SLE中阳性率50%-80%，在缓解期和治疗后性率低。在SS、MCTD、慢活肝、结核、肾炎、白血病中亦可见到LE细胞。2、抗DNP抗体临床意义阳性主要见于SLE，活动期阳性率80%-90%，非活动期20%左右。其它结缔组织病阳性率低于10%，且部分合并SLE第59页/共72页抗DNA组蛋白复和物抗体1、抗核小体抗体核小体含4种核心组蛋白，形成组蛋白八聚体，占据核小体顶部，通过联结DNA与相邻核小体连接。临床意义该自身抗体产生早先于其它抗体，与肾小球肾炎有关。多见于活动性狼疮。在SLE中诊断敏感性58%-71%，特异性高达7%-99%。第60页/共72页抗可提取性核抗原抗体1、抗Sm抗体以患者Smith名字命名,Sm抗原是U族小分子细胞核核糖核蛋白（UsnRNP），具有抗原性的蛋白的分子量是29KD、28KD、13.5KD。Sm抗体和SnRNP是同一分子复合物中的不同抗原位点，故抗Sm抗体很少单独出现，它常于U1RNP抗体相伴，约60％抗U1RNP抗体与抗Sm抗体中的28/29KD有交叉反应。抗Sm抗体阳性均伴有抗U1RNP抗体，而抗U1RNP抗体可以单独存在。①.在SLE中阳性率为30.2%。虽然敏感性较低，但特异性较高。在全部抗Sm阳性的病例中，92.2%为SLE。因此，抗Sm抗体为SLE的标记抗体。②.另外，有人还发现SLE病人由活动期转为缓解期后，狼疮细胞可转阴，ANA、抗DNA抗体效价可降低，但Sm抗体依然存在。因此，对早期、不典型的SLE或经治疗缓解后的回顾性诊断有一定意义第61页/共72页2、抗U1RNP临床上应用较多为U1RNP抗体，U1snRNP由U1RNP和9种不同的蛋白质组成。具有抗原性的分子量有70KD、32KD和22KD。因为以抗核内的核糖核蛋白得名，所作用的抗原是U1小分子细胞核核糖核蛋白（U1snRNP），所以又称抗U1RNP抗体。①.混合性结缔组织病(MCTD)：几乎均为阳性，且滴度很高，对确立MCTD的诊断很有帮助。高滴度的抗RNP，尤其在没有其他自身抗体存在的情况下，一般认为是混合性结缔组织病（MCTD）的诊断标志。MCTD的抗RNP阳性率>95%。此种抗体阳性的患者，常有双手肿胀、雷诺现象、肌炎和指（趾）端硬化。②.系统性红斑狼疮（SLE）：抗RNP抗体在SLE中的阳性率为40%左右，仅产生抗RNP抗体的SLE病人，常常抗DNA抗体阴性，肾脏受累较少，一般来说皮质激素类药物有很好的治疗效果，预后理想，定期监测抗RNP对疗效观察及预后判断有实际意义。抗RNP抗体如和抗ds-DNA抗体、抗Sm抗体同时存在，则发生狼疮肾炎的可能性较大。③.其他结缔组织病：抗RNP抗体在其他结缔组织病阳性率较低且滴度低。混合性结缔组织病阳性率>95%,SLE30%-40%SS14%SSc12%,PM/DM15%。第62页/共72页3、抗SS-A抗体临床意义原发性SS中阳性率40%-95%,SLE20%-60%，SSc24%,PBC20%。抗体阳性可引起亚急性皮肤型狼疮（SCLE）；IgG类抗体通过胎盘可引起新生儿狼疮综合症（NLE），造成先天性心脏传导阻滞。4、抗SS-B抗体临床意义是SS的血清特异性抗体，原发性SS中阳性率65%-85%,SLE10%-15%，且大多为SLE合并SS。亦可引起新生儿狼疮综合症（NLE），造成先天性心脏传导阻滞。抗SSB和抗SSA抗体相伴出现，有单独的SSA出现，但单独的SSB出现的少。抗SSA和抗SSB抗体阳性，可造成新生儿狼疮及先天性房室传导阻滞。且常与血管炎、淋巴结肿大、白细胞减少、光过敏、皮损、紫癜等临床症状相关。第63页/共72页5、抗核糖体抗体（抗-rRNP抗体）①抗rRNP抗体主要见于SLE，常在SLE活动期中存在，阳性率在10%～20%左右，是诊断SLE的特异性抗体。如仅有抗rRNP抗体阳性的SLE患者，ANA常为阴性。抗rRNP抗体阳性患者中枢神经系统病变发生率高。②抗rRNP抗体与抗dsDNA抗体的消长相平行，但与抗dsDNA抗体不同的是不会随病情好转立即消失，可持续1～2年后才转阴。6、抗ScL-70抗体①PSS病人阳性率达30%～40%。虽然阳性率不高，但对PSS（SSC）有较高特异性（特异性达100%）。有抗Scl-70抗体阳性表示病性进展较迅速，皮肤病变往往弥散广泛，易发生肺间质纤维化和指骨末端吸收。②重症弥漫性PSS（SSc）中抗Scl-70抗体阳性率高达75％。有雷诺现象的患者存在抗Scl-70抗体，提示可能发展为PSS。抗Scl-70抗体与恶性肿瘤有明显相关。第64页/共72页7、抗Jo-1抗体①Jo-1抗体对多发性肌炎的诊断具有较强的特异性，是目前公认的多发性肌炎（PM）的血清标记抗体。在多发性肌炎（PM）中阳性率达25％左右。在皮肌炎（DM）中阳性率为7.1%。合并肺间质病变的PM／DM患者，阳性率高达60％。67％抗Jo-1抗体阳性的患者有HLA－DR3抗原。②其他结缔组织病为阴性。③在抗JO-1和抗SSA二项阳性，约80%的多发性肌炎和皮肝炎患者合并有干燥综合征。④而抗JO-1与抗RNP两项阳性者临床上都发现有雷诺氏现象。⑤抗Jo-1抗体综合征：抗Jo-1抗体阳性、急性发热、对称性关节炎、“技工手”、雷诺现象、肌炎、肺间质病变。8、抗增殖性细胞核抗原（PCAN）抗体临床意义是SLE的血清标记性抗体，但敏感性较低，仅3%-6%，与SLE活动性及弥漫增殖性肾小球肾炎相关。第65页/共72页9、抗Mi-2抗体临床意义是肌炎高度特异性抗体（>97%），成人DM（15%-25%）幼年型DM（10%-15%）PM/DM（5%-10%）。抗体阳性患者95%有皮肤病变，多表现为V型及“围巾”型皮疹与表皮增生，对治疗的反应及预后