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毕业答辩产纤维素酶菌株的筛选及酶活测定第1页/共11页姓名:
XXX学号:
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XXX导师:
XXX产纤维素酶菌株的筛选及酶活测定
第2页/共11页目录一、实验材料二、实验方法三、实验结果四、实验结论致谢第3页/共11页1、样品来源:毛红椿根际土壤2、培养基:羧甲基纤维素钠、刚果红培养基、活化培养基、发酵培养基(稻草碎屑培养基)3、仪器:电子天平、灭菌锅、恒温培养箱、分光光度计、水浴锅一、实验材料第4页/共11页二、实验方法和流程采样稀释羧甲基纤维素钠涂布培养摇瓶活化培养刚果红培养基平板培养发酵培养测FPA酶活FPA:filterpaperactivity
第5页/共11页酶活的计算纤维素酶活力的国际单位:1ml酶底物反应液1min内产生相当也1ug/ml葡萄糖的还原糖量规定为1国际单位(1U)。
酶活:U/g;0.5:0.5ml酶液参加反应;c:还原糖浓度,据OD查得ug/ml;10:10ml酶液/g;n:稀释倍数,测定酶活时酶液稀释倍数;t:酶作用时间,30min;180:葡萄糖分子量;2:糖化反应后加入DNS试剂2.5ml将反应液稀释了一倍。第6页/共11页三、实验结果在刚果红培养基培养水解斑第7页/共11页葡萄糖标准曲线第8页/共11页FPA酶活测定结果编号OD糖含量(ug/ml)酶活(U)12350.0216.20.9180.0236.60.9780.0348.81.3040.0308.01.183第9页/共11页四、实验结论
本次试验筛选出来的菌株酶活都比较低,酶活最高的是3号菌,酶活为1.304U;酶活最低的是1号菌,为0.918U。有待进一步诱变育种。目前虽然在纤维素酶方面有了一定成果,但仍存在很多问题,例如:酶活不够高、不能大规模自动化生
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