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文档简介

氯霉素眼药水的高效液相色谱分析第1页/共10页氯霉素眼药水的高效液相色谱分析药物分析实验十第2页/共10页眼药水中的氯霉素的测定

氯霉素滴眼液其主要成份氯霉素，辅料为硼酸、硼砂、氯化钠、防腐剂等，为无色或几乎无色的澄明液体。测定氯霉素滴眼液中氯霉素的含量，由于滴眼液中存在的辅料的干扰，首先要分离得到氯霉素的纯样品。因此，采用高效液相色谱法来进行测试，用外标标准曲线法定量。氯霉素第3页/共10页成份A成份A峰面积A样品峰面积A对照外标标准曲线法色谱定量：峰面积与样品浓度成正比。一系列已知浓度的氯霉素溶液眼药水稀释液CAi浓度：C1，C2，C3，C4，C5峰面积：A1，A2，A3，A4，A5第4页/共10页液相色谱的基本流程图流动相

高压泵色谱柱检测器泵输液分离检测

计算机AEGBCDF进样阀进样预备柱第5页/共10页氯霉素含量的测定

精密吸取眼药水0.5mL于50mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度。1、对照品溶液配制2、眼药水样品配制

精密称取5.0mg氯霉素样品于10mL容量瓶中，用甲醇溶解定容，配成0.1mg/mL母液。分别移取1mL，2mL，3mL，4mL，5mL母液于10mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，配成0.01，0.02，0.03，0.04，0.05mg/mL的标准溶液。第6页/共10页色谱操作步骤：1、依次打开检测器、泵的开关2、打开电脑主机，打开操作界面3、排气泡4、设置色谱条件，打开泵开关5、让流动相冲洗色谱系统，至色谱基线水平，约半小时6、基线调零，填写数据文件名及信息7、进样并记录数据8、数据处理及打印报告9、冲洗色谱系统约半小时，关机。第7页/共10页色谱条件：色谱仪岛津LC-15C高效液相色谱色谱柱C18柱（5µm，150×4.6mm或250×4.6mm）柱温室温流动相甲醇∶水（60∶40）（150短柱）甲醇∶水（80∶20）（250长柱）流速1.000ml/min波长272nm第8页/共10页泵柱进样排放泵排放柱进样定量环六通阀Inject：插入针头Load：打入样品Inject：样品进入色谱3、色谱测试用清洗溶剂清洗微量进样针三次，用待测溶液润

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