第十三章革兰氏阳性无芽孢杆菌

第十三章革兰氏阳性无芽孢杆菌第1页，共44页，2023年，2月20日，星期二嗜肺军团菌（L.pneumophila）1976年，美国退伍军人在费城召开军团会议时突然爆发原因不明的肺炎，次年在死者体内分离出该菌，1979年建立军团菌属。嗜肺军团菌是该属中致病性最强的。第2页，共44页，2023年，2月20日，星期二一、生物学特性不同生长阶段形态不同，对数生长期长丝状成团，随时间延长变成短丝、杆状、球状；无芽孢、无荚膜、端生鞭毛营养要求苛刻，需L半胱氨酸、甲硫氨酸和铁盐；活性炭酵母浸液（BCYE）需氧、CO2、生长缓慢圆形、灰色、边缘整齐的菌落第3页，共44页，2023年，2月20日，星期二革兰氏染色阴性，镀银染色呈黑色第4页，共44页，2023年，2月20日，星期二抗原性具有O抗原和H抗原，15个血清型，1和6型最常见抵抗力对化学消毒剂、干燥、紫外线等较敏感第5页，共44页，2023年，2月20日，星期二二、致病性广泛存在于天然水环境和土壤中，以及冷、热水管道系统内第6页，共44页，2023年，2月20日，星期二毒力因子多种酶类如磷脂酶、氨基肽酶、内切酶；细胞毒素、溶血素、T4SS等细胞内寄生（单核细胞和巨噬细胞内增殖）复制生境（内质网囊泡），由繁殖型变为成熟型第7页，共44页，2023年，2月20日，星期二所致疾病--军团菌病经呼吸道吸入带菌飞沫、原虫等媒介传播，人与人之间不传播只感染人，症状有：流感样症状（轻症型）肺炎（重症型）第8页，共44页，2023年，2月20日，星期二弯曲菌属（Campylobacter）胎儿弧菌，自牛肠道中发现16个种，对人类致病的主要是空肠弯曲菌和胎儿弯曲菌胎儿亚种，前者是人类腹泻最常见的病原菌之一，后者在免疫功能低下时可引起败血症、脑膜炎等空肠弯曲菌第9页，共44页，2023年，2月20日，星期二一、生物学性状1.形态与染色

菌体轻度弯曲似逗点状、海鸥状，长1.5～5μm，宽0.2～0.8μm。菌体一端或两端有鞭毛，运动活泼，在暗视野镜下观察似飞蝇。有荚膜，不形成芽胞。革兰氏阴性。第10页，共44页，2023年，2月20日，星期二2.培养特性为微需氧菌，在含2.5～5%O2和10%CO2的环境中生长最好。最适温度为37～42℃。在正常大气或无氧环境中均不能生长本菌营养要求高，需加入血液、血清才能生长两种菌落，一种蔓延生长、边缘不整齐；一种小菌落，圆形、隆起、半透明第11页，共44页，2023年，2月20日，星期二3.生化反应空肠弯曲生化反应不活泼，不发酵糖类，不分解尿素，不液化明胶，靛基质阴性；可还原硝酸盐，氧化酶和过氧化氢酶为阳性；甲基红和VP试验阴性；枸椽酸盐培养基中不生长。第12页，共44页，2023年，2月20日，星期二4.抗原性本菌抗原构造与肠道杆菌一样具有O、H和K抗原。根据O抗原，可把空肠弯曲菌分成60个血清型。第13页，共44页，2023年，2月20日，星期二5.致病性在环境及健康动物体内广泛存在；污染食物和饮水，可引起人类急性肠炎和食物中毒；绵羊等动物流产；其致病因素与肠毒素、内毒素、细胞毒素、侵袭力有关。第14页，共44页，2023年，2月20日，星期二6.微生物学诊断（一）标本采集：

取腹泻病人新鲜粪便或肛拭子、流产胎儿、胎衣、阴道分泌物等立即送检。如不能及时送检，应将标本接种于卡－布运送培养基。（二）检验程序：第15页，共44页，2023年，2月20日，星期二第16页，共44页，2023年，2月20日，星期二第13章革兰氏阳性无芽孢杆菌主要包括李氏杆菌属、丹毒丝菌属及肾杆菌属。均为形态规则、不产生芽孢、需氧、兼性厌氧的革兰氏阳性杆菌，非抗酸性。第17页，共44页，2023年，2月20日，星期二李氏杆菌属

7个种，代表种是产单核细胞李氏杆菌（L.monocytogenes)，引致人和动物的李氏杆菌病。第18页，共44页，2023年，2月20日，星期二一、形态及染色特性短杆菌，两端钝圆，多单在，有时呈“V”形G+，无芽孢、荚膜，有周鞭毛（4根，20-25℃），老龄培养物或粗糙型菌落呈长丝状第19页，共44页，2023年，2月20日，星期二二、培养特性需氧或兼性厌氧菌，1℃-45℃均可生长，30℃-37℃最适，4℃可缓慢增殖（冰箱菌）；营养要求不高，加入血清、全血、0.2-1%葡萄糖或2-3%的甘油生长更佳；第20页，共44页，2023年，2月20日，星期二血液琼脂培养基上可见其周围狭窄的β溶血环；半固体培养基上穿刺培养，沿穿刺线呈云雾状或倒立树木状生长。第21页，共44页，2023年，2月20日，星期二三、生化特性1.可分解多种糖2.触酶：＋（具有过氧化氢酶的细菌,能催化过氧化氢生成水和新生态氧,继而形成分子氧出现气泡）3.H2S：－4.尿素酶：－5.不还原硝酸盐第22页，共44页，2023年，2月20日，星期二四、抵抗力在土壤、牛奶、青贮饲料和粪便中能长期存活；2.在60℃-70℃5-10min可被杀死菌；3.对消毒剂的抵抗力不强：2.5%石炭酸、70%乙醇、2.5%氢氧化钠、2.5%福尔马林均可有效杀灭。第23页，共44页，2023年，2月20日，星期二五、抗原性

具有O抗原（阿拉伯数字表示）及H抗原（小写英文字母表示）,常见1/2a、4b型。与多种细菌存在共同抗原，故血清学诊断意义不大。第24页，共44页，2023年，2月20日，星期二六、致病性1.本菌可细胞内寄生；2.可自然感染多种家畜：猪、马、牛、绵羊；3.病畜表现神经症状“转圈病”、妊畜流产、血液中单核细胞增多；4.孕妇流产，成人脑膜炎，新生儿脑膜炎(10%)。第25页，共44页，2023年，2月20日，星期二毒力因子内化素：含有亮氨酸的蛋白质，与宿主细胞表面的糖蛋白作用，使细菌进入细胞李氏杆菌溶血素（LLO）：促使细菌在细胞内的扩散第26页，共44页，2023年，2月20日，星期二七、微生物学诊断病原学检查接种血液葡萄糖琼脂，露滴状菌落，β溶血；肝、脾、脑组织等涂片、革兰氏染色镜检可见G＋呈Ｖ字排列的小杆菌；病料眼内接种家兔或豚鼠，1d后发生结膜炎，不久败血症死亡；妊娠2w的动物被接种后可发生流产。第27页，共44页，2023年，2月20日，星期二八、免疫与治疗灭活强毒菌株接种小鼠产生数月免疫力；无毒力活菌接种产生恶免疫力不强。控制污染，避免用污染的青储饲料饲喂动物。第28页，共44页，2023年，2月20日，星期二丹毒丝菌属有3个种猪丹毒丝菌（E.rhusiopathiae）是本属唯一一种致病性的细菌。它是猪丹毒病的病原体，通称猪丹毒杆菌。第29页，共44页，2023年，2月20日，星期二一、形态与染色特征本菌为直或稍弯曲的细杆菌，两端钝圆，单在或呈V形、堆状或短链排列，易形成长丝状；G+，但老龄培养物中菌体着色能力较差，呈阴性第30页，共44页，2023年，2月20日，星期二二、培养特性本菌为微需氧菌，实验室培养是兼性厌氧；pH在6.7-9.2范围内均可生长，最适pH为7.2-7.6，生长温度为5-42℃，最适温度为30-37℃；在普通琼脂培养基和普通肉汤中生长不良，如加入0.2-0.5%(W/V)葡萄糖或5%-10%血液、血清则生长茂盛；在麦康凯培养基不生长；在肉汤中呈轻度浑浊，有少量白色粘稠沉淀。不形成菌膜和菌环。第31页，共44页，2023年，2月20日，星期二在血琼脂平板上经37℃24h培养可形成湿润、光滑、透明、灰白色、露珠样的圆形小菌落，并形成α溶血环；有光滑型和粗糙型菌落；在麦康凯培养基不生长；在肉汤中呈轻度浑浊，有少量白色粘稠沉淀。不形成菌膜和菌环。第32页，共44页，2023年，2月20日，星期二发酵试验产酸不产气；甲基红及VP试验阴性。明胶穿刺生长特殊，沿穿刺线横向四周生长，如试管刷状，但明胶不液化。三、生化特性第33页，共44页，2023年，2月20日，星期二四、抵抗力本菌对腐败和干燥环境有较强的抵抗力对常用消毒剂抵抗力不强：甲醛、生石灰乳、过氧乙酸。本菌可耐0.2%苯酚。对青霉素很敏感。第34页，共44页，2023年，2月20日，星期二五、致病性分布广泛，可寄生于哺乳动物、禽类和鱼类等，以猪分离率最高。本菌通过消化道感染，进入血液（菌血症），而后定殖在局部或引致全身的感染。急性期，死亡率高；慢性猪皮肤出现红疹斑块，因此名为“丹毒”。

第35页，共44页，2023年，2月20日，星期二亚急性病例,皮肤疹块第36页，共44页，2023年，2月20日，星期二第37页，共44页，2023年，2月20日，星期二第38页，共44页，2023年，2月20日，星期二第39页，共44页，2023年，2月20日，星期二人也可经外伤感染，发生皮肤病变。注意区分“人丹毒”，由化脓链球菌所致。第40页，共44页，2023年，2月20日，星期二毒力因子未发现外毒素，细菌产生的神经氨酸酶是可能的毒力因子，酶的存在有助于菌体侵蚀宿主细胞。感染动物能产生神经氨酸酶抗体，已证实实验动物通过对该酶的主动或被