白细胞血小板血型

白细胞血小板血型第1页/共60页HLA系统第2页/共60页第3页/共60页

在研究组织移植过程中发现，移植物赖以存活的基础由供者和受者细胞表面的抗原决定。这种引起移植物排斥反应的抗原称为移植抗原。亦称为组织相容性抗原（histocompatibilityantigen)。概述第4页/共60页根据其抗原的强弱和诱发排斥反应的程度，分为主要组织相容性抗原（majorhistocompatibilityantigen）和次要组织相容性抗原（minorhistocompatibilityantigen），其中能引起快而强排斥应答的抗原系统称为组织相容性系统（majorhistocompatibilitysystem,MHS），编码MHS的基因群称为主要组织相容性复合体（majorhistocompatibilitycomplex,MHC）。

HLA抗原：是糖蛋白抗原。概述第5页/共60页第6页/共60页II类基因区III类基因区I类基因区人类HLA复合体集中在第6号染色体短臂。MHC的基因结构：第7页/共60页II类基因区III类基因区I类基因区编码编码HLA-II类分子HLA-I类分子补体成分等第8页/共60页Nature,1999,401(28):9226号染色体短臂21、31区全长3,600Kb，占人基因组1/3000224个基因座位，128个功能基因，96个假基因40%功能基因具有免疫功能第9页/共60页第10页/共60页MHC-I类基因经典(HLA-Ia):HLA-A,HLA-B,HLA-C

非经典(HLA-Ib):HLA-E,HLA-F,HLA-GMHC-II类基因

经典：HLA-DP,HLA-DQ,HLA-DR

非经典：HLA-DO,HLA-DM,TAP1,TAP2;LMP2,LMP7MHC-III类基因血清补体成分编码基因炎症相关基因第11页/共60页第12页/共60页连锁不平衡：

两个或两个以上基因座位的等位基因同时出现在一同一条染色体上的几率高于或低于随机出现频率的现象。指单倍型基因呈非随机分布的现象，即某些基因总是经常在一起出现，其单倍型频率（实际检测数值）比理论数值（各种等位基因频率的乘积）要显著增高，而另一些基因又较少出现在一起，这种非自由组合现象称为连锁不平衡

第13页/共60页连锁不平衡现象的可能原因某些单体型可能具有选择优势群体迁移和混杂基因随机漂移近亲繁殖第14页/共60页单元型遗传：

HLA的等位基因在同一条染色体上的特定组合称为单元型。在遗传过程中单元型作为一个完整遗传单位由亲代传给自子代的现象。在遗传过程中，HLA复合体是以单元型作为一个完整的遗传单位由亲代传给子代的，称单元型遗传。亲子间有50%单元型相同；同胞间单元型完全相同或不同的机率为25%；一个单元型相同的为50%。第15页/共60页HLA的多态性(polymorphism)：

指在一随机婚配的全体中，染色体同一基因座位有两种以上的基因型，即可能编码两种以上的产物。

产生机制复等位基因(multipleallele)共显性(codominance)

第16页/共60页HLA-MHC基因多态性第17页/共60页多态性的意义：

（1）赋于种群适应多变环境的能力：抵御各种病原体的侵袭。

（2）调控机体免疫应答的能力：MHC控制机体对特定抗原是否应答以及应答的强度。

（3）个体的终身遗传标志：无亲缘个体间出现MHC型别完全相同的机率极低。

（4）寻找同种器官移植供体的依据：根据HLA配型结果筛选适宜供体，是寻找器官移植供体的唯一方法。第18页/共60页共显性遗传

每对等位基因所编码的抗原都表达于细胞膜上，无隐性基因，也无等位基因排斥现象。

复等位基因

在同一基因位点存在两个以上的基因。由于各个座位上等位基因是随机组合的，故人群的基因型可达108。

第19页/共60页第20页/共60页1、HLAI分子的结构一、HLAI类分子第21页/共60页肽结合区：与抗原肽结合部分，具有

多态性。Ig样区：是TC细胞CD8分子对I类分子

识别结合的部位。

Β2m由15号染色体编码，起稳定分子构型作用。跨膜区：将I类分子锚定在细胞膜上。胞浆区：参与细胞内外跨膜信号的

传递。α链β2m二、MHC分子的结构——：MHC-I类分子第22页/共60页二、HLA-Ⅱ类分子1、HLA-Ⅱ的结构第23页/共60页

肽结合区：与抗原肽结合部分，

具有多态性。Ig样区：是TH细胞CD4分子识别结合的部位。跨膜区：将II类分子锚定在细

胞膜上。胞浆区：参与细胞内外跨膜信号

的传递。二、MHC分子的结构——：MHC-II类分子第24页/共60页两条多肽链链：1和2功能区链：1和2功能区四个功能区肽结合区：1和1组成Ig样区：2和2组成跨膜区胞浆区第25页/共60页MHC-I类分子表达于除成熟红细胞、滋养层细胞和神经细胞之外的各种有核细胞、血小板和网织红细胞表面。MHC-II类分子主要表达于B细胞、树突状细胞、单核/巨噬细胞和活化的T细胞表面。一、MHC分子的分布：

MHC-III类分子主要是一些存在于血清及其其他体液中的可溶性分子。第26页/共60页（3）约束免疫细胞间相互作用（1）参与抗原加工和提呈，MHCⅠ和MHCⅡ不同（2）参与免疫应答的遗传控制HLA的功能：（4）参与免疫细胞的分化第27页/共60页（一）参与加工提呈抗原抗原提呈细胞T淋巴细胞HLA抗原肽T细胞受体抗原第28页/共60页（二）、参与T细胞限制性识别抗原肽HLAT细胞受体CD4/CD8(HLA-II/I类抗原识别受体)抗原提呈细胞T细胞第29页/共60页（三）参与T细胞分化及自身耐受的建立HLA分化免疫细胞带自身抗原的

细胞T×建立中枢性自身耐受T正常T细胞自身反应性T细胞第30页/共60页（四）参与免疫应答的调节调控HLA分子的表达水平活化活化抗原提呈细胞T淋巴细胞第31页/共60页两种抗原处理与递呈途径的比较II类MHC分子递呈途径I类MHC分子递呈途径抗原的主要来源蛋白处理酶抗原处理细胞MHC抗原肽结合部位MHC分子递呈对象吞噬的外来或自身抗原，在循环的膜表面自身抗原溶酶体中的溶酶体酶专业APC吞噬溶酶体II类CD4+T细胞细胞内合成的自身抗原或微生物抗原胞浆中的蛋白酶体所有的有核细胞粗面内质网I类CD8+T细胞第32页/共60页HLA临床应用第33页/共60页HLA与器官移植HLA表达异常与疾病的关系HLA与疾病的相关性HLA亲子鉴定和法医学HLA与输血第34页/共60页一、HLA与器官移植

进行组织器官移植时，往往因供受者之间的HLA型别不同而发生移植排斥反应，其排斥反应的强弱依次为：无亲缘关系者亲属同胞同卵孪生儿＞＞＞第35页/共60页HLA是决定移植手术是否成功的主要因素；移植物的存活率和存活时间与供者和受者之间HLA匹配程度密切相关；肾移植中，重要性依次为HLA-DR、HLA-B、HLA-A；人类HLA等位基因组合总数超过百万亿；第36页/共60页HLA与器官移植HLA表达异常与疾病的关系HLA与疾病的相关性HLA亲子鉴定和法医学HLA与输血第37页/共60页HLA与疾病关联研究热点据不完全统计,大约有50多种疾病与HLA密切相关,目前HLA与疾病关联的研究热点主要集中在两方面:一是IDDM(I型糖尿病)与DQ的关联，另一热点是强直性脊椎炎(ankihsingspongdility,AS)与HLA-B27的关联,AS患者90%~95%带有B27抗原,而正常人群B27的基因频率约为0.034,因此对于临床上怀疑为AS的患者检查B27抗原具有诊断价值

。第38页/共60页HLA异常表达与临床疾病

肿瘤细胞因缺乏HLA-I类抗原，所以细胞毒性T细胞（CTL）对肿瘤细胞不能识别和杀伤。肿瘤细胞细胞毒性T细胞CD8CTL第39页/共60页

举例：

恶性肿瘤细胞HLA-Ⅰ类分子表达减少或缺乏肿瘤细胞逃逸免疫监视；糖尿病异常表达HLA－‖导致免疫细胞攻击胰岛细胞；第40页/共60页HLA与疾病的关联

如：90%以上的强直性脊柱炎患者带有HLA-B27抗原。第41页/共60页RR=1时,无区别;

RR>4时,相关较为肯定;RR<1,表示负相关,是一种保护而不是易感。第42页/共60页

HLA与法医学做个HLA亲子鉴定吧？第43页/共60页HLA与亲子鉴定和个体识别的关系

亲子鉴定的基本原理有以下两点

①在肯定孩子的某个血型基因是来自生父

(biolog-calfather),而假设父亲

(allegedfather)并不带有这个基因的情况下可以排除他是孩子的生父。

②在肯定孩子的某些血型基因是来自生父,而假设父亲也带有这些基因的情况下

,不能排除他是孩子的生父。这时我们

可以计算他是孩子生父的可能性究竟有多大。第44页/共60页

HLA是人类最具遗传多态性的血型系统,其表型数以亿计,除同卵双生子外,两个不同个体问HLA全相合的概率极低,而且终生不变。因此,HLA检测在法医学亲子鉴定和个体识别方面意义相当大,表现在:由于HLA具有单倍型遗传的特点,每个子代均从其父母处得到一条单倍型,因此可用于亲子鉴定;如用分子生物学的检测方法,尚可对极少量的血痕进行检测,在法医学上可用于凶犯或死者的身份鉴定。第45页/共60页通过检测HLA-A,B和Rh,MN,P,ABO共5个血型系统,可使系统总的排除率达到97.37%左右。但HLA检测等不能鉴定陈旧、微量检材,鉴别能力有限,目前国际上一般采用在法医个体识别中起重要作用的VNTR(vamblenumbertademrepeat)和SFIR(shorttandemrepeat)座位用于亲子鉴定。第46页/共60页

HLA与人类研究

关于种族起源的人类学研究可从历史、文化、语言、体质和基因等多方面进行,只有基因受环境影响的程度最低,因此研究价值较大。由于HLA具有连锁不平衡的遗传特点

,某些基因或单倍型在不同种族或地区人群的频率分布存在明显的不同,故在人类学研究中可为探讨人类的起源和民族的演变提供颇有价值的资料。第47页/共60页HLA系统与输血

为了合理使用血液,现代输血提倡“成分疗法”,即对病人输入单一的血液成分。一些接受化疗、放疗的癌症患者或骨髓移植病人,也往往需要血小板或白细胞等血液制剂,为了达到疗效

,应在同胞或随机人群中选择

HLA完

全相合的献血员。目前,临床输血中的发热反应,大部分是

HLA抗体引起的,特别是多次输血病人,

很容易产生

HLA抗体,而在非溶血性输血反应中

70%左右是发热反应。第48页/共60页粒细胞血型第49页/共60页分布：中性粒细胞、嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞。分类：

１.HNA-1抗原：目前发现的唯一具有多态性的粒细胞抗原系统。

２.HNA-2抗原：其中HNA-2a具有临床意义。

３.HNA-3抗原：其中HNA-３a表达于淋巴细胞、血小板、内皮细胞、脾脏、肾脏、胎盘细胞，是粒细胞聚集因子，与输血相关性肺损伤相关。第50页/共60页1.血清学方法：

a.粒细胞凝集试验

b.单克隆抗体特异性粒细胞抗原捕获试验

c.粒细胞免疫荧光试验

d.流式细胞术2.DNA分型技术:PCR-RFLP、PCR-SSP等。粒细胞抗原抗体检测方法第51页/共60页粒细胞抗体的临床应用１.新生儿同种免疫粒细胞减少症2.非溶血性发热性输血反应3.输血相关性肺损伤4.粒细胞输注无效5.自身免疫性粒细胞减少症第52页/共60页血小板血型系统第53页/共60页血小板固有抗原HLA-Ⅰ类抗原：抗原性强红细胞血型抗原：ABO分类第54页/共60页HPA-1a,HPA-1bHPA-2a,HPA-2bHPA-3a,HPA-3bHPA-4a,HPA-4bHPA-5a,HPA-5bHPA-6a,HPA-6bHPA-15a,HPA-15betc.Zwa/b,PLA1/A2Koa/b,SibaBaka/b,LekaYuka/b,Pena/bBra/b,Za