醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白实验报告_第1页
醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白实验报告_第2页
醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白实验报告_第3页
醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白实验报告_第4页
醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白实验报告_第5页
已阅读5页，还剩8页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

少年易学老难成，一寸光阴不可轻-百度文库 #上式中深色带蛋白质组分的光吸收值应乘以稀释倍数2，例如血清白蛋白组分的分离区带为深色带，浸泡时所加入的0.4mol/L氢氧化钠的量是其它淡色带的2倍，所以应乘以2。五、数据记录及处理1、实验数据蛋白质 0 清 a B Y光吸收值 0 0.002 0.008 0.010 0.0262、数据处理A总=0+0.002+0.008+0.010+0.026=0.046清蛋白%=0.002/0.046=4.3%a蛋白％=0.008/0.046=17.4%B蛋白％=0.010/0.046=21.7%Y蛋白％=0.026/0.046=56.5%六.实验分析1、醋酸纤维薄膜电泳法分离牛血清蛋白的原理：蛋白质是两性电解质。当PH>PI时，蛋白质为负离子，在电场中向阳极移动；当PH<PI时，蛋白质为正离子，在电场中向阴极移动。血清中含有白蛋白、a-球蛋白、B-球蛋白、Y-球蛋白等，各种蛋白质由于氨基酸组分、立体构象、相对分子质量、等电点及形状的不同，在电场中的迁移速度不同，故可用电泳法将其分离。2、电泳注意事项：电泳时需要注意电流和电压的控制，以及电泳时间。根据图谱分析可以估算血清中蛋白质的相对含量。图谱中颜色的深浅和面积大小可以反应血清蛋白质的含量，颜色较深者含量高，面积较大者含量高。由于电离时间等因素的影响，实验存在一定的误差。3、生物化学醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白的试验中，如果区带的分离效果不好，可能存在的影响因素：.电泳时间不足.薄膜在染色或漂洗时重叠紧密且时间很长.薄膜在缓冲液中浸泡的时间不足.点样时薄膜上是否存在多余的水分4、用醋酸纤维薄膜法可以将血清蛋白质分为哪几个区带可分5条带，分别为：a1—球蛋白、a2一球蛋白、B一球蛋白、Y一球蛋白、白蛋白。可能分子量越小，带电量越高，运动速度越快。而这五种蛋白的分子量不同，带电量也不同，在电泳时的速度有快有慢。七、思考题1、影响醋酸纤维薄膜电泳的因素有哪些，其是如何影响的？血清变质：条带数会有偏差。巴比妥溶液PH不合适：影响电泳速率。漂洗次数过多或时间过长：看不清楚条带。点样没点好浓度不均或者条带模糊。2、实验过程中哪些操作会影响到实验条带的完整性，应该如何改正？点样没有点好，盖玻片要直直的压在薄膜上，否则血清不均匀，影响电泳条带形状；血清不宜过多，若过多则条带过宽，分离不完全；也不易过少，过少则条带分离不完全。八、参考文献.陈巍,龚伟宏;宁夏滩羊血清蛋白组分含量的研究》;中国草食动物;2003年S1期.王友基，王钦利;血清蛋白电泳测定的标准化问题初探田;江西医学检验;2002年06期.周丽亚;高静;吴兆亮;李英杰;;血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳实验的改进J];生物学杂志;2008年02期.

人人文库> 全部分类> 行业资料 > 信息产业

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论